運脾溫陽顆粒對脾虛泄瀉大鼠胃黏膜結構及血漿中CCK、PP濃度的影響

邵南齊 高青 朱萱萱 王海丹 付金芳 代永霞

（1.鄭州澍青醫學高等專科學校，河南鄭州 450064；2.江蘇省中醫院，江蘇南京 210029）

運脾溫陽顆粒對脾虛泄瀉大鼠胃黏膜結構及血漿中CCK、PP濃度的影響

邵南齊1高青1朱萱萱2王海丹2付金芳1代永霞1

（1.鄭州澍青醫學高等專科學校，河南鄭州 450064；2.江蘇省中醫院，江蘇南京 210029）

目的：探討運脾溫陽顆粒對脾虛泄瀉大鼠胃黏膜結構及血漿中膽囊收縮素（CCK）、胰多肽（PP）濃度的影響。方法：用大黃加飲食失節法制作大鼠脾虛泄瀉模型，將造模成功大鼠隨機分為模型組、思密達組和運脾溫陽顆粒高、中、低劑量組，每組10只，另取同批次正常大鼠10只作為正常組，分別灌胃相應藥物或生理鹽水10d后，檢測大鼠胃黏膜細胞形態學改變和血漿中CCK、PP濃度。結果：脾虛泄瀉模型大鼠胃黏膜細胞受損，血漿CCK濃度下降，PP濃度升高；給予高、中劑量運脾溫陽顆粒治療后，上述指標均得以明顯改善而接近正常大鼠。結論：運脾溫陽顆粒改善脾虛泄瀉大鼠癥狀可能是通過保護胃黏膜細胞，調整血漿中CCK、PP濃度而發揮作用的。

泄瀉脾虛 運脾溫陽顆粒 胃黏膜 膽囊收縮素 胰多肽 實驗研究

運脾溫陽顆粒是由蒼術、山楂、炮姜、肉豆蔻、茯苓、澤瀉等六味藥（其質量比為10∶10∶3∶6∶10∶10）采用現代工藝制成的顆粒劑，臨床上用于治療小兒遷延性腹瀉，總有效率達93%[1]。前期研究發現，運脾溫陽顆粒能使脾虛小鼠的炭末推進率減慢，可增強阿托品抑制腸蠕動的作用，修復脾虛大鼠的小腸黏膜以及升高脾虛大鼠血液中NO和胃泌素濃度，從而改善胃腸功能[2-4]。本研究將進一步觀察運脾溫陽顆粒對脾虛模型大鼠的胃黏膜形態學和血漿中膽囊收縮素（CCK）、胰多肽（PP）濃度的影響。

1 實驗材料

1.1 動物SD大鼠，雄性，體重200～220g，由南通大學實驗動物中心提供，合格證號：scxk（蘇）2012-0008。

1.2 藥品及試劑運脾溫陽顆粒：由江陰天江藥業有限公司提供（批號20120115）；思密達：由博福-益普生（天津）制藥有限公司提供（批號E15565）。膽囊收縮素（Cholecystokinin，CCK）試劑盒：美國BD公司生產，批號：201326KO；胰多肽（panoreatio polypeptide，PP）試劑盒：美國BD公司生產，批號：20130326TY。

1.3 器材FA1004型電子分析天平（上海菁海儀器有限公司），DD-5000型大容量低速離心機（長沙英泰儀器有限公司），UV-2000紫外-可見分光光度計（尤尼科上海儀器有限公司）等。

2 實驗方法

2.1 造模與分組、給藥造模組大鼠采用大黃苦寒瀉下結合飲食失節法制作脾虛大鼠模型，每日灌胃給予100%大黃水提液（0.2mL/10g，1次/d），灌胃前禁食8h，自由飲水，造成飲食失節，連續灌胃14d，出現類似臨床脾陽不足泄瀉的癥狀如便溏、納呆、體重減輕、體溫偏低、畏寒等作為脾虛指標。造模成功的大鼠隨機分為模型組、思密達組和運脾溫陽顆粒高、中、低劑量組，每組10只。另取同批次正常大鼠10只為正常組。正常組、模型組大鼠給予等量生理鹽水，自由飲食；思密達組給予2.13g/kg思密達；運脾溫陽顆粒高、中、低劑量組分別給予30.0g/kg、15.0g/kg、7.5g/kg運脾溫陽顆粒。各組大鼠每日定時灌胃給藥，1次/d，連續10d。

2.2 取樣及檢測末次給藥2h后，大鼠眼眶取血4mL，注入試管中，3000r/min離心，取血漿，用酶聯免疫法檢測CCK、PP，同時將大鼠脫頸椎處死，取胃，用10%福爾馬林固定胃，送病理檢查。

3 實驗結果

3.1 一般狀態造模前，所有大鼠一般生理性自主活動良好，活動敏捷，飲食、二便、皮毛均正常，組間無顯著性差異。實驗期間，與正常組比較，模型組動物逐漸出現便溏、肛門污穢、消瘦、活動逐漸減少、拱背、扎堆、瞇眼、毛發干枯無光澤等癥狀。各治療組大鼠每日體重緩慢增加，大便逐漸變稠到干，活動增多，毛發蓬松有光澤接近正常組。實驗末，模型組大鼠體重嚴重下降，與正常組比較有非常顯著性差異（P＜0.01）；運脾溫陽顆粒高、中劑量組大鼠體重比模型組顯著增加（P＜0.01）。提示運脾溫陽顆粒對大黃和飲食失節致脾虛大鼠體重減輕有一定的改善作用，見表1。

3.2 胃黏膜組織學正常組：胃組織及小腸組織黏膜層黏膜上皮細胞及腺體排列整齊，無明顯變性壞死，無充血，黏膜下層無炎細胞浸潤，無水腫。模型組：胃組織局部黏膜下層可見少量炎細胞浸潤，無水腫。思密達組：胃部及小腸組織黏膜層黏膜上皮細胞及腺體排列整齊，無明顯變性壞死，無充血，黏膜下層無炎細胞浸潤，無水腫。運脾溫陽顆粒高劑量組：胃黏膜層黏膜上皮細胞及腺體排列整齊，無明顯變性壞死，無充血，黏膜下層無炎細胞浸潤，無水腫。運脾溫陽顆粒中劑量組：胃組織局部黏膜下層可見少量炎細胞浸潤。運脾溫陽顆粒低劑量組：胃組織局部黏膜下層可見少量炎細胞浸潤。見圖1。

3.3 血漿中CCK和PP含量模型組大鼠血漿中CCK濃度明顯低于正常組（P<0.01），而PP的濃度明顯高于正常組（P<0.01）。運脾溫陽顆粒高、中劑量組大鼠血漿中CCK明顯高于模型組（P＜0.01或P＜0.05），PP的濃度明顯低于模型組（P＜0.01或P＜0.05）。提示運脾溫陽顆粒對大黃和飲食失節致脾虛大鼠的治療作用可能與調節血中CCK和PP的濃度有關。見表2。

4 討論

遷延性腹瀉是兒科臨床常見病，主要表現為稀便、大便次數增多，如不及時治療導致嚴重水電解質紊亂可危及小兒生命。遷延性腹瀉屬于中醫久瀉、慢性腹瀉范疇。中醫兒科專家江育仁認為脾虛失運和氣虛陽虧是小兒遷延性腹瀉的基本病機[5]，遂提出運脾溫陽法治療小兒遷延性腹瀉。運脾溫陽顆粒方中蒼術運脾燥濕為主藥，佐以山楂消積導滯，炮姜、肉蔻溫運脾陽，茯苓、澤瀉健脾滲濕。全方具有運脾溫陽、消積導滯滲濕的功能。

大黃苦寒，有較強的瀉下功用，久服可使機體元氣損傷，脾胃功能減弱，從而影響水谷精微的吸收。本實驗中，大鼠灌胃大黃后逐漸出現便溏、肛門污穢、消瘦、活動逐漸減少、拱背、扎堆、瞇眼、毛發無光澤的現象符合中醫脾虛泄瀉癥候的特點[6]。

本實驗中，脾虛大鼠出現泄瀉、消瘦，影響食物的消化吸收，胃組織局部黏膜下層見少量炎細胞浸潤，給予大劑量運脾溫陽顆粒后胃黏膜修復正常，說明運脾溫陽顆粒可以修復胃黏膜結構，有助于改善脾虛癥狀。

CCK和PP是重要的胃腸激素。CCK主要來源于十二指腸和上段空腸的I細胞，能促進膽囊收縮，同時增加膽汁分泌，抑制胃排空，調節胃腸運動，促進胰腺腺泡分泌各種消化酶，提高消化能力[7]。PP是由胰腺和胃腸內的PP細胞分泌的多肽激素，PP抑制食欲，減少攝食量，其分泌與體重呈負相關，目前研究發現PP抑制膽囊收縮素、胰酶和膽汁的釋放，同時收縮膽總管括約肌，但松弛膽囊平滑肌，影響脂質的消化吸收[8-11]。因此，CCK和PP對膽汁分泌的影響作用相反。

本實驗中脾虛大鼠胃排空加速，腸蠕動加快，腹瀉，脂類物質消化吸收受影響，血漿中CCK濃度下降，而PP濃度升高。經運脾溫陽顆粒治療后脾虛大鼠血漿中CCK濃度顯著升高，PP濃度顯著降低。因此我們可以推測，運脾溫陽顆粒修復胃黏膜、減慢胃排空速度、改善胃腸營養物質消化吸收、有效改善脾虛泄瀉大鼠的臨床癥狀等功效，可能是通過調節CCK和PP等胃腸激素水平而實現的。

表1 各組大鼠實驗不同時期體重比較（±s）g

表1 各組大鼠實驗不同時期體重比較（±s）g

注：與正常組比較，△△P＜0.01；與模型組比較，**P＜0.01。

組別動物數（只）正常組劑量（g/kg）10實驗前開始給藥（造模結束）時-實驗末（給藥10d后）208.0±7.1279.5±11.2324.5±10.1**模型組-212.0±7.9168.0±12.3△△189.5±17.6△△10思密達組102.13210.0±8.5162.5±8.9△△229.0±14.3△△**運脾溫陽顆粒高劑量組1030.0212.0±7.5166.0±8.8△△233.5±8.8△△**運脾溫陽顆粒中劑量組1015.0210.0±7.5174.0±10.7△△221.5±12.3△△**運脾溫陽顆粒低劑量組107.5211.0±7.4170.0±8.89△△200.5±10.7△△

圖1 各組大鼠胃黏膜組織形態學改變（×100）

表2 各組大鼠血漿中CCK和PP含量比較（±s）

表2 各組大鼠血漿中CCK和PP含量比較（±s）

注：與正常組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別劑量（g/kg）CCK（pg/mL）正常組PP（pg/mL）-533.8±39.2**97.60±9.7**模型組117.5±7.8△△-454.7±18.8△△思密達組2.13524.2±38.1**98.2±7.7**運脾溫陽顆粒高劑量組30.0540.8±52.7**99.9±3.2**運脾溫陽顆粒中劑量組15.0498.1±44.9*109.1±3.8*△運脾溫陽顆粒低劑量組7.5492.0±59.5114.4±8.4△△

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R256.340.5文獻識別碼A

1672-397X（2014）09-0075-03

邵南齊（1973-），男，碩士，講師，中藥藥理學專業。shaonanqi@126.com

2014-04-01

編輯：吳寧

澍青醫專重點科研項目（12001）