益氣通脈飲對慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影響

吉利 張艷

（遼寧中醫藥大學附屬醫院，遼寧沈陽 110032）

益氣通脈飲對慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影響

吉利 張艷

（遼寧中醫藥大學附屬醫院，遼寧沈陽 110032）

目的：探討益氣通脈飲不同劑量給藥對慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能及心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）含量的影響。方法：采用結扎大鼠左冠狀動脈主干的方法復制急性心梗后心衰大鼠模型，造模成功的大鼠隨機分為模型對照組、中藥等效劑量組、中藥大劑量組、西藥對照組，另設正常對照組，每組8只，分別給予相應藥物或生理鹽水連續灌胃8周后，多普勒超聲心動圖機測定CHF大鼠心功能，酶聯免疫法（ELISA）檢測大鼠血清中ANP、BNP含量。結果：與模型對照組比較，益氣通脈飲各劑量組大鼠治療后心功能各項指標均有不同程度改善，ANP、BNP含量明顯降低。結論：益氣通脈飲可以改善CHF模型大鼠的心功能，降低血清中ANP、BNP含量，從而延緩慢性心力衰竭的發生和發展。

心力衰竭 益氣通脈飲 心功能 ANP BNP

慢性心力衰竭（CHF）是心血管疾病的終末期表現和最主要的死因。近年來，筆者通過臨床研究發現，心氣虛衰是CHF發病的始動因素，而血瘀是CHF的中心病理環節。我們根據CHF的病機特點，篩選藥物制成益氣通脈飲，治療CHF取得了良好的療效。為了進一步探求益氣通脈飲治療CHF的作用機理，我們建立CHF大鼠模型，觀察益氣通脈飲對CHF模型大鼠的心功能及血清心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）含量的影響，現將結果報道如下。

1 實驗材料

1.1 動物10～12周齡健康雄性Wistar大白鼠100只，體重250～300g，由遼寧中醫藥大學實驗動物中心提供。

1.2 試劑益氣通脈飲：由遼寧中醫藥大學附屬醫院中藥房提供，制成每毫升含生藥1.26g的溶液。藥物組成：黃芪30g，人參10g，紅花20g，丹參15g，三七10g，益母草30g，葶藶子20g。科素亞：由杭州默沙東制藥有限公司生產，批號：國藥準字H20000371，規格：50mg/片。大鼠心鈉素（ANP）、腦鈉素（BNP）酶聯免疫試劑盒：購于武漢新啟迪生物科技有限公司，產品編號分別為EIA06242、EIA06249。儀器設備：DH-140B型小動物呼吸機，由浙江醫科大學醫療實驗儀器廠生產；MS-2000多媒體化心電圖軟件，由廣州市龍飛達科技有限公司生產；SONOS5500分色多普勒超聲心動圖機，由Agilent公司生產。

2 實驗方法

2.1 造模與分組參考文獻[1]方法，在無菌操作下，于胸骨左側第3、4肋間皮膚處橫向切開長約1.5cm的切口，鈍性分離軟組織，暴露心臟后，于左冠狀動脈前降支起點下2～4mm處用6號絲線結扎左冠狀動脈主干造成急性心肌梗死模型。術后記錄標準肢體導聯及胸前導聯（紙速50mm/s）心電圖，ST段弓背抬高者為造模成功。常規喂養飼料與水1周后，于第2周將其飼料減半，致大鼠處于半饑餓狀態，常規喂水；于第3周開始，每天游泳1次，致疲乏無力（約20min）；于第4周由電檢科醫生做彩色超聲多普勒心動圖，測定左室收縮末期容積（ESV）、左室舒張末期容積（EDV）、左室射血分數（LVEF）、左室每搏輸出量（SV），進而計算出左室心指數（CI），CI≤180mL/（min·kg）者作為心衰成功模型入選。入選的大鼠隨機分成4組：模型對照組、中藥等效劑量組、中藥大劑量組、西藥對照組，另取心功能正常的大鼠作為正常對照組，每組8只。

2.2 給藥造模成功后，中藥等效劑量組與大劑量組分別按照5.4g/kg、16.2g/kg予中藥煎取液灌胃，即相當于臨床成人劑量與3倍成人劑量；西藥對照組予科素亞混懸液，按4.5mg/kg灌胃，相當于臨床成人劑量；模型對照組與正常對照組以同體積的生理鹽水灌胃。每日1次，共8周。

2.3 觀察指標及檢測方法心功能檢查：給藥結束后由電檢科醫生為大鼠做彩色超聲多普勒心動圖，測定左室收縮末期容積（ESV）、左室射血分數（LVEF）、左室舒張末期容積（EDV）、左室每搏輸出量（SV），各項數值均經計算機處理后獲得。血清ANP、BNP含量測定：給藥結束后，在5%戊巴比妥（2～3mL/kg）腹腔注射麻醉下開胸取左心室腔血2mL，注入試管中，搖勻，4℃3000r/min離心10min，取血清置于-20℃保存，用酶聯免疫法測定ANP與BNP含量，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2.4 統計學方法所有數據均采用SPSS13.0 for windows統計軟件包進行分析。各項指標結果均以（±s）表示，組間比較采用t檢驗。

3 實驗結果

3.1 各組大鼠一般狀態比較除正常對照組外，其他各組大鼠在造模后均出現不同程度的蜷臥、脫毛、消瘦、厭食、便溏等癥狀，尤以未經任何治療的模型對照組最重。模型對照組大鼠一般狀態差，表現為活動度顯著下降，進食及飲水量明顯減少，消瘦明顯。各組大鼠治療后狀態普遍有所改善，尤以中藥等效劑量組最為明顯，表現為食欲增加，活動較多，一般狀態尚可。中藥大劑量組和西藥對照組與模型對照組相比，一般狀態也有所改善，但不如中藥等效劑量組明顯。

3.2 各組大鼠心功能的變化結果見表1。中藥等效劑量組和西藥對照組各項指標之間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

3.3 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較見表2。中藥大劑量組、等效劑量組和西藥對照組大鼠血清ANP、BNP含量比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

4 討論

隨著對慢性心力衰竭研究的深入，專家學者發現了一種肽類物質——利鈉肽類與心衰有關。人類有三種利鈉肽類：心鈉肽（ANP）、腦鈉肽（BNP）和C型利鈉肽（CNP）。ANP主要由心房分泌，生理作用為擴張血管和利尿排鈉，BNP主要由心室合成和分泌[2]，生理作用與ANP相似但較弱，CNP的生理作用尚不明確。在某種意義上，慢性心力衰竭是一種神經激素細胞因子網絡失衡狀態。在初始的心肌損傷以后，腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RAAS）和交感神經系統興奮性增高，多種內源性的神經內分泌和細胞因子激活，加重心肌損傷和心功能惡化，進而又導致神經內分泌和細胞因子被進一步激活，從而形成惡性循環[3]。另一方面，心力衰竭時，心室壁張力增加，ANP及BNP分泌明顯增加，其增高的程度與心衰的嚴重程度呈正相關，可以拮抗這些激素和細胞因子對心血管的不利效應。因而，無論在診斷、治療CHF方面，還是在判斷預后方面，ANP、BNP都有著極為重要的臨床意義[4]。

CHF多歸屬于中醫學“心悸”、“怔忡”、“心痹”等范疇。本研究認為CHF的基本病機為本虛標實，心氣虧虛為本，血瘀為標。益氣通脈飲是基于心氣虛衰為CHF發病的基礎、血瘀是其中心病理環節的理論認識基礎上，結合臨床經驗而組方的。全方由黃芪、人參、紅花、丹參、三七、益母草、葶藶子組成，方中重用補益心氣之劑，輔以活血化瘀之品，使正復邪去，氣充血行，血無“留滯”，氣機調暢。

本研究結果表明，益氣通脈飲能夠改善大鼠的一般狀況，使其食欲增加，活動靈活。中藥等效劑量組、大劑量組以及西藥對照組的心功能指標（ESV、LVEF、EDV、SV）同模型對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01），說明益氣通脈飲和科素亞均能有效地改善大鼠心功能；西藥對照組和中藥等效劑量組之間比較無顯著性差異（P＞0.05），說明益氣通脈飲改善大鼠心功能的療效與科素亞相當。中藥各劑量組和西藥對照組大鼠血清ANP、BNP含量均較模型對照組顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），而中藥各劑量組和西藥對照組之間血清ANP、BNP含量差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 各組大鼠治療后心功能比較（±s）

表1 各組大鼠治療后心功能比較（±s）

注：與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與西藥對照組比較，△P＜0.05。

組別動物數（只）劑量（g/kg）LVEF （%）正常對照組ESV （mL）8 EDV （mL）81±11**SV （mL）79±21**149±16**68±29*模型對照組191±2833±58265±3454±17 8西藥對照組80.004586±32**71±36**150±19**62±13*中藥大劑量組816.2106±21*△53±28*△167±17**61±27△中藥等效劑量組85.498±29**68±26**165±18**63±28*

表2 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較（±s）

表2 各組大鼠血清ANP、BNP含量比較（±s）

注：與正常對照組比較，##P＜0.01；與模型對照組比較，*P＜0.01，**P＜0.01。

組別動物數（只）劑量（g/kg）ANP（pg/mL）正常對照組8 8 8 BNP（pg/mL）38.95±8.3617.48±7.27模型對照組75.56±9.52##39.32±6.64##西藥對照組42.23±5.19**21.79±9.39**中藥大劑量組45.42±11.74**27.49±12.28*中藥等效劑量組60.74±13.41*29.16±10.06*0.0045 8 16.2 8 5.4

目前已經證實，血管緊張素轉換酶抑制劑和血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑除了改善心衰癥狀之外，更重要的是降低心衰患者代償性神經-體液的不利影響，從而延緩心衰進展，降低患者的遠期死亡率。益氣通脈飲是否通過類似的機制，通過調節神經內分泌細胞因子以及影響利鈉肽系統而改善心功能，有待于進一步的研究。

[1]王朔仁，趙明鏡，王振濤，等.建立心肌梗死心氣虛血瘀證和心陽虛血瘀證病癥動物模型的研究.中國中西醫結合雜志，2008，28 （3）：245

[2]Maekawa K，Sudoh T，Furusawa M，et al.Cloning and sequence analysis of cDNA encoding a precursor for porcine brain natrinretic peptide.Biochem Biophys Res Commun，1988，157 （1）：410

[3]Michael CA.B-type natriuretic peptide predicts death inwomen. JAm Coll Cardiol，2006，48：1808

[4]陳灝珠，鐘南山，陸再英.內科學.北京：人民衛生出版社，2013：166

編輯：吳寧

R541.610.5文獻識別碼A

1672-397X（2014）09-0073-02

吉利（1973-），女，博士，副教授，主要從事心血管內科的臨床教學與科研。lgych@163.net

2014-04-10