浙南地區女性人群OPRM1基因多態性（rs1799971）與舒芬太尼自控鎮痛效果的研究

諸光峰 上官王寧 張高嬌

浙南地區女性人群OPRM1基因多態性（rs1799971）與舒芬太尼自控鎮痛效果的研究

諸光峰 上官王寧 張高嬌

目的 探討OPRM1基因多態性（rs1799971）對浙南地區女性婦科手術患者舒芬太尼自控鎮痛效果的影響。方法收集浙南地區婦科手術患者200例，抽取外周血，采用直接測序法，分析患者OPRM1基因多態性（rs1799971），比較不同基因組患者之間舒芬太尼的累積量，記錄鎮痛起效時間、持續時間、VAS分值及不良反應。結果 AA型127例，AG型62例，GG型11例，OPRM1基因多態性（rs1799971）基因突變頻率為36．50%，各基因組術后2、6、12h舒芬太尼累積量比較，AA組累積量最少，AG組及GG組均較AA組增高，差異有統計學意義（P＜0．05），術后24、48h，GG組較AA組及AG組增高，差異有統計學意義（P＜0．05）。各基因型組間不良反應發生率的差異均無統計學意義（均P＞0．05）。結論 在浙南地區女性人群中，OPRM1基因多態性（rs1799971）對舒芬太尼鎮痛效果有顯著影響。

OPRM 基因多態性 舒芬太尼 自控鎮痛

手術患者由于手術本身及麻醉等因素的需要，術后常需要鎮痛。阿片類鎮痛藥，如舒芬太尼，主要作用于中樞神經系統的μ受體，其鎮痛療效在不同個體間差異甚大，其中一個重要機制為不同基因對阿片類受體，尤其是μ受體的影響存在差異，μ受體是G蛋白偶聯受體，由μ阿片受體基因（OPRM）來編碼[1]。不同的基因型對嗎啡用量及其代謝產物6-葡萄糖醛酸嗎啡（M-6-G）有不同的影響[2]。筆者通過研究OPRM1基因多態性（rs1799971）對患者自控鎮痛舒芬太尼用量的影響，以闡述不同基因型與舒芬太尼代謝及鎮痛效果的關系，現將結果報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2010-01—2014-05溫州市中西醫結合醫院婦科收治行婦科手術患者200例（包括子宮全切術、子宮次切術、開腹子宮肌瘤剝除術），均為漢族，浙南地區，年齡20～53（41.71±11.98）歲；ASAⅠ～Ⅱ級。術前行簡易智能精神狀態檢查量表（MMSE）評估，消除認知功能障礙對術后鎮痛及疼痛評估的影響，排除患有嚴重肝臟和腎臟疾病、糖尿病、肝病、抑郁癥、焦慮癥、長期使用止痛藥患者，術前1周服用解熱鎮痛類或者阿片類藥物者，使用與阿片類藥物動力學相抵觸的聯合制劑者。排除因采血失敗、不合作、缺乏隨訪、初期疼痛視覺模擬評分法（VAS）＜2的患者，以及嚴重惡心、嘔吐等原因中途退出研究者。經本院倫理委員會批準，所有患者均充分了解研究方案并簽署知情同意書。

1.2 方法 術前禁食12h，禁飲8h。入手術室后，在手術開始60min內輸入乳酸林格液以補充禁食所失液體量。麻醉誘導：予咪唑安定0.1mg/kg、芬太尼5μg/kg、維庫溴銨0.1mg/kg靜脈注射，誘導氣管插管，接Drag麻醉機行純氧機械間歇正壓通氣（IPPV），維持呼末二氧化碳分壓（PETCO2）4～5kPa。術中靜脈持續輸注效應室靶控濃度為2～3μg/ml的丙泊酚、每隔30min靜推維庫溴銨2mg，吸入濃度為2.5%～3.2%的七氟烷維持全麻；術中低血壓采用麻黃堿5mg，心動過緩采用阿托品0.5mg處理。術中維持PETCO2的穩定，同時監測心率（HR）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、平均動脈壓（MAP）和中心靜脈壓（CVP），維持血流動力學穩定。所輸入的液體均置入溫水箱中保溫達35℃。術中維持平均動脈壓60～90mmHg。

舒芬太尼PCA泵配方：100ml 0.9%氯化鈉溶液中含舒芬太尼200μg，單次量0.04μg/kg，鎖定時間10min，設定最大量24μg/h，不設背景輸入量。拔管后10min開始鎮痛。

1.3 觀察指標 鎮痛效果評估指標采用VAS，0分為無痛，10分為最痛，并在患者靜息狀態記錄VAS分值。患者入院即記錄VAS分值作為基礎對照值，并依次記錄術后2、6、12、24、48h VAS分值。術前一晚由固定的神經精神科醫師對患者進行焦慮抑郁評估，消除心理因素及其他因素對術后鎮痛的影響。觀察患者不良反應發生情況。

1.4 基因型分型

1.4.1 DNA提取 所有受檢者均晨起抽取靜脈血3ml，采用DNA試劑盒（日本Takara公司），提取人白細胞基因組DNA。將提取好的DNA置于-80℃冰箱保存備用。

1.4.2 基因型檢測 上游引物∶5＇-GGT CAAA CTT GTC CCA CTT AGA TCG C-3＇，下游引物∶5＇-AAT CAC ATA CAT GAC CAG GAA GTT T-3＇。行直接測序方法，讀取個體的基因型。

1.5 統計學處理 采用SPSS17.0統計軟件，計量資料以表示，不同基因型組間比較采用方差分析，等位基因、基因型頻率和遺傳平衡定律（Hardy-Weinberg定律）及不良反應發生率的比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 各基因分型及其一般資料的比較 OPRM1基因多態性（rs1799971）不同基因型分布如下：AA型127例，AG型62例，GG型11例，基因突變頻率為36.50%，結果顯示各組年齡、BMI、SBP、DBP、FPG、AST、ALT、肌酐、麻醉持續時間、MMSE評分比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），詳見表1。

表1 OPRM基因多態性（rs179997）各組患者一般資料的比較

2.2 Hardy-Weinberg平衡分析 OPRM基因多態性（rs1799971）基因型Hardy-Weinberg平衡分析，結果顯示趨向于遺傳平衡（χ2=0.86，P=0.35）。

2.3 各基因型患者術后舒芬太尼累積量及VAS比較 各基因型患者術后2、6、12h舒芬太尼累積量比較發現，AA組累積量最少，AG組及GG組均較AA組增高，差異有統計學意義（P＜0.05），術后24、48hGG組較AA組及AG組增高，差異有統計學意義（P＜0.05）。其余比較無統計學差異（P＞0.05）。3組間術后2、6、12、24、48hVAS分值比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），詳見表2、3。

2.4 各基因型組不良反應的比較 所有患者僅9例出現惡心、嘔吐、大汗等不良反應，其中AA組4例，AG組2例，GG組3例，各組不良反應的比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

本研究中浙南地區女性人群rs1799971基因突變頻率為36.50%，其在亞洲人中發生率35%～47%（中國人35%，泰國人44%，馬來西亞人45%，印度人47%），本研究結果與國內外研究基本一致[3]。本研究選取浙南地區女性人群作為研究對象，盡量消除性別因素及地域因素的影響，術前進行MMSE評分，盡可能排除認知功能差異對實驗結果產生的影響[4]。本研究發現，與AA基因型相比，AG基因型患者舒芬太尼累積量在術后2、6、12h明顯增多，而GG基因型舒芬太尼累積量在術后各個時段均明顯增多；GG基因型較AG基因型舒芬太尼累積量在術后24h明顯增多。各基因型組間不良反應的差異均無統計學意義（均P＞0.05）。

表2 OPRM基因多態性不同基因型組患者術后PCA鎮痛期間舒芬太尼累積量（μg）

表3 OPRM基因多態性不同基因型組患者術后PCA鎮痛期間VAS的比較（分）

舒芬太尼、芬太尼、嗎啡等外源性阿片類鎮痛藥主要作用于μ受體繼而發揮鎮痛作用。μ受體基因至少存在43個SNP[4]，在編碼區僅數個SNP會引起μ受體氨基酸順序的改變。例如，如果位點268的絲氨酸被脯氨酸替代后可嚴重損害μ受體的信號[5]。有研究發現，rs1799971基因突變導致μ受體N末端區的N-糖基化的40位點的天冬酞氨變為天冬氨酸，從而改變受體與配體的親和力和受體的作用效能，且提示G等位基因純合子個體OPRM1與內啡肽的親和力是A等位基因純合子的3倍[6]，致β-內啡肽與μ阿片受體親和力增加，影響其代謝率及利用率。這可解釋本研究中AG及GG基因型患者在術后48h內需要更多的舒芬太尼才能達到鎮痛效果。Chou等[7]發現，在全膝關節整形術后，突變純合子GG組對術后鎮痛嗎啡的需要量比AA組、AG組均明顯增多，研究結果與本研究結果類似。

本研究對OPRM1基因多態性（rs1799971）在浙南地區女性人群中的分布及其對舒芬太尼累積量的影響做了初步研究。但本實驗仍存不足之處：首先，由于實驗室條件限制，本研究暫未對血漿舒芬太尼及其代謝產物濃度進行測定，缺少其藥代動力學指標；其次，本研究樣本量尚小，不足以代表浙江地區人群，有待加大樣本量進一步研究；第三，對還有待進一步研究關于增加術后舒芬太尼用藥量的確切作用機制。。

[1]Gro sch S,Niederberger E,Lotsch J,et al．A rapid screening method for a single nucleotide polymorphism(SNP)in the human MOR gene[J]Br J Clin Pharmacol,2001,52(6):711-714．

[2]Lotsch J,Zimmermann M,Darimont J,et al．Does the A118G polymorphism at the mu-opioid receptor gene protect against morphine-6-glucuronide toxicity[J]?Anesthesiology,2002,97(4): 814-819．

[3]Tan E C,Tan C H,Karupathivan U,et al．Mu opioid receptor gene polymorphisms and heroin dependence in Asian populations[J]．Neuroreport,2003,14(4):569-572．

[4]Cordes M A,Stevenson S A,Driessen T M,et al．Sexually-motivated song is predicted by androgen-and opioid-related geneexpression in the medial preoptic nucleus of male European starlings(Sturnus vulgaris)[J]．Behav Brain Res,2014,29(278C): 12-20．

[5]Horner K A,Hebbard J C,Logan A S,et al．Activation of mu opioid receptors in the striatum differentially augments methamphetamine-inducedgene expression and enhances stereotypic behavior[J]．J Neurochem,2012,120(5):779-794．

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[7]Chou W Y,Yang L C,Lu H F,et al．Association of mu-opioid receptor gene polymorphism(A118G)with variations in morphine consumption for analgesia after total knee arthroplasty[J]．Acta Anaesthesiol Scand,2006,50(7):787-792．

Association between OPRM1 gene polymorphisms and effect of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia

Objective To investigate the association between OPRM1 gene polymorphisms and efficacy of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia．Methods Two hundred patients undergoing hystermyoma received postoperative patient-controlled analgesia(PCA)with sufentanil from January 2010 to May 2012．Peripheral blood samples were collected for DNA extraction．OPRM1 gene(rs1799971)polymorphisms were detected．The sufentanil consumption,the release time on analgesia,analgesic duration,VAS,and adverse reaction were documented and compared among different genotype groups． Results Genotyping analysis revealed that the genotype distribution of polymorphisms in OPRM1 gene was AA in 127 cases,AG in 62 cases,and GG in 11 cases．The frequency of OPRM1 mutation was 36．5%．The sufentanil consumption at 2h,6h and 12h after surgery and VAS at 24h and 48h after surgery in GG group were higher than those in AG and AA groups(P＜0．05)． Conclusion The results indicate that OPRM1 gene polymorphism has the significant impact on analgesic efficacy of sufentanil．

μ-opioid receptor gene Polymorphisms SufentanilPostoperative analgesia

2014-07-28）

（本文編輯：嚴瑋雯）

325000 溫州醫科大學（諸光峰為在職研究生，現在溫州市中西醫結合醫院麻醉科工作）；溫州醫科大學附屬第二醫院麻醉科（上官王寧）；溫州市中西醫結合醫院麻醉科（張高嬌）

上官王寧，E-mail：sgwning@163.com