甲胎蛋白異質體檢測對鑒別良惡性肝病的價值

劉煥英，劉愛玲，趙鳳梅

甲胎蛋白（AFP）主要來自胚胎的肝細胞，胎兒出生后約2周甲胎蛋白從血液中消失，因此正常人血清中AFP的含量尚不到20 μg／L。目前，臨床上廣泛認可AFP可作為肝細胞癌的診斷以及療效觀察指標，但AFP屬于胚胎性蛋白，對診斷肝癌有局限性［1］。因部分良性肝病、生殖系統和胃腸道的一些惡性腫瘤中AFP也升高，且部分肝癌患者AFP始終持續低濃度陽性。因此，肝癌早期診斷的特異性指標具有重要的臨床研究意義。研究發現，血清總AFP含AFP－L1，來自良性肝病，占其主要部分；AFP－L2來自孕婦；而AFP－L3則為肝癌細胞特異［2］。總AFP因糖鏈組成和結構上與植物血凝素親和性不同，采用電泳法分離出小扁豆凝集素結合AFP－L3，其正常參考值為10%～15%，＞15%即可診斷肝細胞肝癌（HCC）。即使總AFP僅輕微升高，或無影像學證據，都提示有發展為HCC可能，凡是AFP－L3＞15%的患者應嚴密監測并定期隨訪［3］。AFP在患者不同病理情況下產生的分子糖鏈結構各不相同，肝癌病理情況下主要產生與小扁豆凝集素具有強結合力的甲胎蛋白異質體（AFP－L3），美國食品藥品監督管理局 （FDA）2005年批準檢測AFP－L3指標用于肝癌預警，并把AFP－L3診斷肝癌的陽性臨界值定為10%［4］。筆者采用親和微量離心柱法分離AFP－L3，應用電化學發光法對不同肝病患者總AFP和AFP－L3進行檢測，探討AFP－L3在鑒別良惡性肝病中的應用價值。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇筆者所在醫院 2009年 07月—2013年06月肝病門診及住院患者287例的AFP陽性血清（AFP＞20 μg／L），根據患者的臨床診斷分為 5組：A 組為 AFP≥400 μg／L 的肝癌患者 86 例，男 46 例，女 40 例，年齡 31～71歲，平均（61．5±10．31）歲；B 組為 AFP＜400 μg／L 的肝癌患者62 例，男 45 例，女 17 例，年齡 25～69 歲，平均（51．3±11．03）歲；C組為肝硬化患者59例，男32例，女27例，年齡28～68歲，平均（47．5±8．41）歲；D 組 38 例慢性肝炎患者，男 25 例，女 13 例，年齡 18～67 歲，平均（37．11±8．34）歲；E 組為自身免疫性肝炎患者42例，男16例，女26例，年齡35～59歲，平均（36．1±10．64）歲。以上 5 組患者的血清標本分離后凍存－70℃環境中。

1．2 儀器與試劑 羅氏COBAS 8000免疫生化一體機及配套試劑（羅氏公司）；親和微量離心柱系統（北京熱景生物技術有限公司）。

1．3 測定方法 AFP－L3的分離采用親和微量離心柱法，柱內預先裝有耦聯了小扁豆凝集素的瓊脂糖，可特異性地結合AFP－L3，當血清流過離心管時，樣本中的AFP－L3與管內親和介質結合，經過清洗和離心洗脫過程，獲得含有AFP－L3的樣本，然后用電化學發光法檢測總AFP和AFP－L3的含量，計算 AFP－L3 占 AFP 總量的百分比，AFP－L3／AFP＞10%為陽性判斷標準［5］。

1．4 統計學方法 采用SPSS10．0統計軟件進行數據處理。不同組別間 AFP－L3陽性率比較采用 χ2檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結 果

A、B、C、D 及 E 組患者血清 AFP－L3／AFP 陽性者分別為77 （89．53%）、50 （80．65%）、6 （10．17%）、4 （10．52%） 及 3（7．14%）例。肝癌組與非肝癌組AFP－L3／AFP陽性率比較差異有統計學意義（85．81%vs 9．35%，χ2＝124．34，P＜0．01）；肝癌AFP≥400 μg／L 組與 AFP＜400 μg／L 組間、 肝硬化組與慢性肝炎組（P＝0．08，P＞0．05）、慢性肝炎組與自身免疫肝炎組（P＝0．06，P＞0．05）、自身免疫肝炎組與肝硬化組（P＝0．07，P＞0．05）的AFP－L3／AFP陽性率比較差異均無統計學意義。

3 討 論

肝癌是指發生于肝臟的惡性腫瘤，包括原發性肝癌和轉移性肝癌兩種，人們日常說的肝癌指的多是原發性肝癌。原發性肝癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，根據最新統計，全世界每年新發肝癌患者約60萬，居惡性腫瘤的第五位。原發性肝癌按細胞分型可分為肝細胞型肝癌、膽管細胞型肝癌及混合型肝癌。甲胎蛋白由新生的幼稚肝細胞分泌，胎兒的肝細胞沒有發育（分化）完全，分泌的甲胎蛋白量很大，所以孕婦的甲胎蛋白會呈陽性。過去一直認為是診斷原發性肝癌的特異性腫瘤標志物，具有確立診斷、早期診斷、鑒別診斷的作用［6］。近年大量的臨床卻發現，部分肝硬化患者會長期出現AFP達到上千，但多年都沒有肝癌的跡象；同時發現約20%的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP 仍不超過 10 μg／L［7］。

本文結果顯示，AFP≥400 μg／L 和 AFP＜400 μg／L 的肝癌組其總AFP－L3／AFP陽性率明顯高于非肝癌組，差異有統計學意義，表明用本方法檢測的AFP－L3／AFP＞10%為診斷指標時，可以有效地區分良、惡性肝病患者；而低濃度AFP陽性肝癌組與高濃度AFP陽性肝癌組相比，其AFP－L3陽性率差異無統計學意義，表明AFP－L3用于肝癌診斷不受AFP≥400 μg／L作為肝癌診斷標準的限制，如果患者血清中總AFP只有輕微升高，而AFP－L3所占比例超過10%，就提示肝癌發生的可能性較大［8］。對這樣的患者進行隨訪和嚴密監控是很有必要的。筆者同時對非肝癌患者之間AFP－L3／AFP陽性率進行比較，結果顯示差異均無統計學意義，與文獻報道基本一致［9］。

［1］韓 風，邱大鵬，陳偉瑜，等．甲胎蛋白異質體和甲胎蛋白信使核糖核酸用于診斷肝細胞癌［J］．中國臨床醫學，2010，17（1）：45－46．

［2］沈 錚，沈 霞．甲胎蛋白及其異質體檢測的臨床應用價值［J］．上海醫學檢驗雜志，2000，15（6）：361－362，370．

［3］鄺妙歡，歐陽文婷，林建華，等．甲胎蛋白異質體3、異常凝血酶原、甲胎蛋白檢測肝細胞癌的對照研究［J］．中華普通外科學文獻（電子版），2010，04（4）：311－314．

［4］ 董懷平，王 力，趙岐剛，等．AFU、AFP－L3、HCY聯合檢測對原發性肝癌早期診斷臨床價值的研究［J］．中國實驗診斷學，2007，11（4）：485－487．

［5］高 錦，徐愛芳，鄭虹英，等．微量離心柱法檢測AFP－L3的臨床應用研究［J］．中華實驗和臨床病毒學雜志，2010，24（6）：461－463．

［6］ 張國慶，王 斌，劉振疆，等．AFP、AFP－L3和AFU聯合檢測在原發性肝癌診斷中的應用［J］．新疆醫科大學學報，2005，28（2）：150－152．

［7］ 周文策，易劍鋒，李玉民．AFP－L3、GP73 及 DLC－1在原發性肝癌中的研究進展［J］．國際外科學雜志，2009，36（10）：712－715．

［8］ 王向臣，曲建香，鹿理友，等．AFP、AFP－L3、GP73 聯合檢測在肝癌診斷中的應用［J］．醫學檢驗與臨床，2011，22（6）：50－52．

［9］ 蔣 英，謝 延，宮 賀，等．AFP－L3在肝細胞癌早期診斷中的應用價值研究［J］．中國熱帶醫學，2009，9（2）：292－293．