K-ras基因突變對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的影響

劉暉群 劉敏知 熊林楷

NSCLC是目前臨床上最常見的肺癌類型。諸多研究表明，分子生物學(xué)因素如癌基因、抑癌基因、腫瘤細(xì)胞脫氧核糖核酸含量、腫瘤粘附分子、腫瘤血管生成等對(duì)NSCLC的生物學(xué)行為均可以產(chǎn)生巨大的影響，從而決定著NSCLC的形態(tài)特征、生長(zhǎng)方式、惡性程度、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等，并進(jìn)一步影響著患者的預(yù)后[1-3]。本研究旨在探討K-ras基因突變對(duì)NSCLC患者預(yù)后的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2006年3月-2008年7月江西省腫瘤醫(yī)院收治的92例患者，所有患者均經(jīng)病理檢查確診為NSCLC，且臨床資料完整，相關(guān)檢查得到完善。排除隨訪丟失的患者以及采用其他方案治療的患者。根據(jù)患者是否發(fā)生K-ras基因突變將上述患者分為K-ras基因突變陽(yáng)性組、K-ras基因突變陰性組。K-ras基因突變陽(yáng)性組患者11例，包括男性9例，女性2例；年齡54～73歲，平均(61.7±7.8)歲；病理分型包括腺癌10例，鱗癌1例；臨床分期Ⅱ期3例，Ⅲa期1例，Ⅲb期5例，Ⅳ期2例；有吸煙史患者7例，從未有過(guò)吸煙史患者4例。K-ras基因突變陰性組患者81例，包括男性52例，女性29例；年齡50～72歲，平均(59.7±8.0)歲；病理分型包括腺癌69例，鱗癌7例，其他類型5例；臨床分期Ⅱ期22例，Ⅲa期8例，Ⅲb期37例，Ⅳ期14例；有吸煙史患者69例，從未有過(guò)吸煙史患者12例。K-ras基因突變陽(yáng)性組與K-ras基因突變陰性組之間的患者性別、年齡、病理類型、臨床分期、吸煙史相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 治療方案 嚴(yán)格按照美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(NCCN)提供的NSCLC治療指南給予研究對(duì)象綜合治療。11例K-ras基因突變陽(yáng)性組患者，4例采用以手術(shù)為主的綜合治療，7例采用以化療為主的綜合治療；在化療方面，培美曲塞聯(lián)合鉑類(PP方案)治療10例，吉西他濱聯(lián)合鉑類(GP方案)治療1例，化療周期2～6個(gè)，平均(4.5±0.9)個(gè)。81例K-ras基因突變陰性組患者，30例患者采用以手術(shù)為主的綜合治療，51例患者采用以化療為主的綜合治療；在化療方面，PP方案治療74例，GP方案治療7例；化療周期2～6個(gè)，平均(4.3±1.0)個(gè)。2組患者治療方案、化療方案、化療周期數(shù)相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2.2 K-ras基因突變檢測(cè) 采用蝎形探針擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)(ARMS法)對(duì)研究對(duì)象組織學(xué)標(biāo)本行K-ras基因突變檢測(cè)，試劑盒由英國(guó)Delivering Pharmacogenomics公司生產(chǎn)，檢測(cè)K-ras基因第12位以及第13位密碼子的7種突變，包括Gly12Cys(GGT>TGT)突變、Gly12Val(GGT>GTT)突變、Gly12Ala(GGT>GCT)突變、Gly12Arg(GGT>CGT)突變、Gly12Asp(GGT>GAT)突變、Gly12Ser(GGT>AGT)突變、Gly13Asp(GGC>GAC)突變。

1.2.3 隨訪方式 對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行隨訪，隨訪方式包括門診就診、電話、E-mail等方式，記錄每個(gè)患者的生存情況，本研究中末次隨訪日期為2014年2月，所有研究對(duì)象均得到有效隨訪。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 NSCLC患者K-ras基因突變率及其突變類型

92例NSCLC患者，11例患者K-ras基因突變陽(yáng)性，陽(yáng)性率為11.96%。K-ras基因突變類型分別為K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突變3例，K-ras Gly12Val(GGT>GTT)突變2例，K-ras Gly12Ala(GGT>GCT)突變2例，K-ras Gly12Arg(GGT>CGT)突變2例，K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突變與K-ras Gly12Val(GGT>GTT)突變并存1例，K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突變與 K-ras Gly12Ala(GGT>GCT)突變并存1例。

2.2 K-ras基因突變陽(yáng)性組與K-ras基因突變陰性組之間中位生存期的比較

K-ras基因突變陽(yáng)性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者2例，總生存時(shí)間17～24個(gè)月；Ⅲa～Ⅳ期患者9例，總生存時(shí)間6～35個(gè)月，中位生存期10個(gè)月。K-ras基因突變陰性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者22例，總生存時(shí)間15～67個(gè)月，中位生存期25個(gè)月；Ⅲa～Ⅳ期患者59例，總生存時(shí)間7～28個(gè)月，中位生存期19個(gè)月。Log-rank檢驗(yàn)顯示K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期顯著低于K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

自從20世紀(jì)80年代以來(lái)，諸多科研工作者對(duì)肺癌尤其是NSCLC的病因、診斷、治療、預(yù)后進(jìn)行了大量的分子生物學(xué)研究，從而認(rèn)識(shí)到NSCLC的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、侵襲、多藥耐藥等生物學(xué)行為與機(jī)體內(nèi)細(xì)胞基因功能或結(jié)構(gòu)異常有關(guān)，如抑癌基因的突變與失活、原癌基因的突變與失活、端粒酶相關(guān)的細(xì)胞永生性激活、宿主抗腫瘤免疫基因的破壞、基因不穩(wěn)定性、轉(zhuǎn)移抑制相關(guān)基因異常、旁分泌與自分泌生長(zhǎng)因子的激活、腫瘤血管生長(zhǎng)因子的激活等[4-5]。隨著研究的深入，目前已經(jīng)初步形成了NSCLC分子診斷、分子分期、分子治療、分子預(yù)后等新的理論[6]，各種NSCLC分子生物學(xué)標(biāo)志物逐步應(yīng)用于臨床。

K-ras基因?qū)儆谠┗颍ㄎ挥谌梭w染色體12p12.1，編碼1種定位于細(xì)胞膜上的p21-ras偶聯(lián)蛋白，其功能主要是將細(xì)胞生長(zhǎng)、分化信號(hào)從激活受體傳導(dǎo)至蛋白激酶。K-ras基因突變后其編碼的蛋白會(huì)喪失滅活的功能，從而刺激細(xì)胞自發(fā)性生長(zhǎng)、分化，在各種惡性腫瘤如NSCLC、胰腺癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等的發(fā)生以及發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[7]。目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)K-ras基因突變與NSCLC的研究報(bào)道較多。Meng等[1]報(bào)道，20%～30%的NSCLC患者K-ras基因突變陽(yáng)性，其中以腺癌最為常見，K-ras基因突變可以縮短N(yùn)SCLC患者尤其是早期腺癌患者的總生存期。Garassino 等[8]報(bào)道，NSCLC患者的藥物敏感性、腫瘤生物學(xué)行為受K-ras基因突變類型的影響。

在本研究中，我們對(duì)92例NSCLC患者進(jìn)行了K-ras基因突變檢測(cè)，有11例患者K-ras基因突變陽(yáng)性，其中9例為單位點(diǎn)突變，2例為多位點(diǎn)突變，K-ras基因突變陽(yáng)性率為11.96%，略低于前述20%～30%的比例，這可能是由于地域差異、抽樣誤差等因素所致。此外，我們還分析了K-ras基因突變對(duì)NSCLC患者中位生存期的影響，由于K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅰa～Ⅱb期患者病例數(shù)過(guò)少，無(wú)法求出中位生存期，因此本研究?jī)H對(duì)K-ras基因突變陽(yáng)性組Ⅲa～Ⅳ期患者與K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期的比較，結(jié)果顯示前者中位生存期顯著低于后者(P<0.05)，這說(shuō)明K-ras基因突變對(duì)NSCLC患者預(yù)后在一定程度上可以產(chǎn)生負(fù)性影響，但是其確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

[1] Meng D,Yuan M,Li X,et al.Prognostic value of K-RAS mutations in patients with non-small cell lung cancer:a systematic review with meta-analysis〔J〕.Lung Cancer,2013,81(1):1-10.

[2] Li H,Xie L,Lai RS.Association of EGFR mutations with low BRCA1 gene expression in non-small cell lung cancer〔J〕.Mol Clin Oncol,2013,1(1):195-199.

[3] Jian-Wei B,Yi-Min M,Yu-Xia S,et al.Expression levels of ERCC1 and RRM1 mRNA and clinical outcome of advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Pak J Med Sci,2013,29(5):1158-1161.

[4] Oak CH,Wilson D,Lee HJ,et al.Potential molecular approaches for the early diagnosis of lung cancer (review)〔J〕.Mol Med Rep,2012,6(5):931-936.

[5] Perlikos F,Harrington KJ,Syrigos KN.Key molecular mechanisms in lung cancer invasion and metastasis:a comprehensive review〔J〕.Crit Rev Oncol Hematol,2013,87(1):1-11.

[6] Pendharkar D,Ausekar BV,Gupta S.Molecular biology of lung cancer-a review〔J〕.Indian J Surg Oncol,2013,4(2):120-124.

[7] Ishida M,Igarashi T,Teramoto K,et al.Mucinous bronchioloalveolar carcinoma with K-ras mutation arising in type 1 congenital cystic adenomatoid malformation:a case report with review of the literature〔J〕.Int J Clin Exp Pathol,2013,6(11):2597-2602.

[8] Garassino MC,Marabese M,Rusconi P,et al.Different types of K-Ras mutations could affect drug sensitivity and tumour behaviour in non-small-cell lung cancer〔J〕.Ann Oncol,2011,22(1):235-237.