2012年北京市海淀區(qū)手足口病病原檢測結(jié)果分析

北京市海淀區(qū)疾病預(yù)防控制中心(100094) 白 婧 王菊光 韓思媛 陳 玉 施麗飛

手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)是由多種人腸道病毒引起的一種兒童常見傳染病，是我國法定報(bào)告管理的丙類傳染病[1]，容易在兒童中造成暴發(fā)和流行，甚至產(chǎn)生重癥、死亡病例[2-3]。2012年北京市海淀區(qū)手足口報(bào)告病例4985例，是2011年的1.27倍，根據(jù)2012北京市手足口病監(jiān)測方案的要求，2012年3-12月期間，我區(qū)共采集HFMD患者臨床標(biāo)本507例，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果分析總結(jié)，為更好地了解手足口病的流行特征，有效地防控手足口病提供科學(xué)依據(jù)。

材料與方法

1.病例標(biāo)本來源

本研究所用標(biāo)本為2012年3月至2012年12月期間采集于北京世紀(jì)壇醫(yī)院等10家醫(yī)院就診的HFMD患者咽拭子，其中包括：133例散發(fā)病例(散發(fā)病例為監(jiān)測病例，每個(gè)自然月的第一周和第三周，采集于清河圣地婦兒醫(yī)院)、40例重癥病例(手足口病患者神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)等出現(xiàn)危及生命的癥狀和體征，臨床一般診斷為重癥病例)和334例聚集病例(一周內(nèi)，同一托幼機(jī)構(gòu)或?qū)W校等集體單位發(fā)生5例以上，但不足10例手足口病病例；或同一班級(或宿舍)發(fā)生2例及以上手足口病病例)。所有病例標(biāo)本采集后-4℃運(yùn)輸，-20℃保存。507例病例標(biāo)本的年齡在6個(gè)月到31歲之間。男女比例為1.21：1。

2.腸道病毒核酸檢測

(1) 腸道病毒核酸提取 核酸提取采用Roche公司生產(chǎn)的核酸自動(dòng)提取儀用試劑盒MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作。

(2)腸道病毒核酸擴(kuò)增 核酸擴(kuò)增采用愛普益公司生產(chǎn)的腸道病毒通用型、柯薩奇病毒A16型、腸道病毒71型核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

3.儀器設(shè)備

核酸提取采用Roche公司的MPLC2.0型核酸自動(dòng)提取儀；核酸擴(kuò)增采用AB公司的7500Fast型熒光定量PCR儀。

結(jié) 果

1.北京市海淀區(qū)3-12月份HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

應(yīng)用熒光RT-PCR的方法對507例HFMD患者的咽拭子進(jìn)行了腸道病毒的核酸檢測，不同月份病毒核酸檢測結(jié)果見圖1。從圖中數(shù)據(jù)可以看出，6月份為手足口病發(fā)病高峰，采樣件數(shù)達(dá)到145件。患者的咽拭子的實(shí)驗(yàn)室檢測總陽性率為39.05%(198/507)。按照手足口病防控指南(2009)版的要求，對海淀區(qū)內(nèi)手足口病病毒的流行情況進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測，除1月、2月外，其他月份均采集HFMD患者咽拭子5～20份進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室病毒核酸檢測，4-9月，監(jiān)測病例中EV71病毒的陽性率均低于CoxA16病毒的陽性率，5月和9月無EV71病毒檢出；除11月、12月無CoxA16病毒檢出外，全年監(jiān)測病例中CoxA16病毒陽性率均較高，平均陽性率為29.32%；監(jiān)測病例中其他HEV病毒檢出率較低，4月、6月、7月和9月無其他HEV病毒檢出。重癥病例發(fā)病率主要集中在5-9月，符合手足口病的發(fā)病規(guī)律。因北京市疾控中心對2012年聚集病例的采樣標(biāo)準(zhǔn)有所修改，全年聚集病例采樣率較高，占總病例數(shù)的65.88%，5月-7月為手足口病聚集病例的高發(fā)期，病例數(shù)分別為74例,124例和84例。

圖1 北京市海淀區(qū)3-12月份HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

2.北京市海淀區(qū)不同性別HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

對全年檢測數(shù)據(jù)按照性別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)得到海淀區(qū)不同性別HFMD病毒核酸檢測結(jié)果，見表1。監(jiān)測病例男女比例為0.71:1，重癥病例為1.35:1，聚集病例為1.49:1。男女之間各種型別病毒陽性率均無顯著差異(P>0.05)。

表1 北京市海淀區(qū)不同性別HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

表2 北京市海淀區(qū)不同年齡HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

年齡(歲)總病例監(jiān)測病例病例數(shù)EV71CoxA16其他HEV陽性數(shù)陽性率陽性數(shù)陽性率陽性數(shù)陽性率病例數(shù)EV71CoxA16其他HEV陽性數(shù)陽性率陽性數(shù)陽性率陽性數(shù)陽性率0～323313.04%14.35%313.04%30516.67%930.00%00.00%3～613215.38%17.69%00.00%2993311.04%7123.75%31.00%6～12000.00%00.00%00.00%300.00%00.00%00.00%12～4125.00%00.00%00.00%200.00%00.00%00.00%合計(jì)40615.00%25.00%37.50%3343811.38%8023.95%30.90%

3.北京市海淀區(qū)不同年齡HFMD病毒核酸檢測結(jié)果

對HFMD患者咽拭子病毒核酸檢測結(jié)果按照0～3歲、3～6歲、6～12歲以及12歲以上四個(gè)年齡段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，見表2。HFMD以感染0～3歲、3～6歲兩個(gè)年齡段為主，這兩個(gè)年齡段兒童感染的HFMD病原體主要以CoxA16為主，0～3歲59.68%(37/62)、3～6歲62.41%(83/133)。

討 論

近年來，北京地區(qū)一直是手足口病高發(fā)的“熱點(diǎn)”地區(qū)[4]，西城區(qū)(南區(qū))2011年采集的手足口病病例為2010年的2.41倍[5]，豐臺區(qū)從2008年到2010年，手足口病病例報(bào)告數(shù)逐年增加[6]，懷柔區(qū)2009年手足口病報(bào)告病例數(shù)為932例，2010年為722例[7]。自2007年以來北京市手足口病報(bào)告輕癥病例、重癥病例、死亡病例均逐年增加，特別是2010年手足口病報(bào)告病例出現(xiàn)大幅度的增加[8]。2012年海淀區(qū)共采集手足口病例507例，為2011年采集病例的2.47倍，聚集病例數(shù)為334例，占總病例數(shù)的65.88%。

與以往研究相比[5，9]，2012年海淀區(qū)手足口病仍主要以CoxA16感染為主，占實(shí)驗(yàn)室檢出陽性數(shù)的61.11%(121/198)，這與以往不同型別手足口病毒交替流行的研究有所不同，而2012年其他區(qū)縣手足口病研究未見報(bào)道，所以未作比較，有待進(jìn)一步研究。另外，與以往研究相同[6,10-12]，2012年我區(qū)手足口病的高峰期仍舊為5-8月，峰值出現(xiàn)在6月，當(dāng)月全區(qū)手足口報(bào)告病例為1333件。

2012年我區(qū)手足口病重癥陽性病例為15例，其中其他HEV感染7例，EV71為6例，CoxA16為2例。最近的研究結(jié)果顯示EV71感染的危重病例越來越多，2010年北京市共報(bào)告臨床診斷手足口重癥病例610例，EV71為138例，占實(shí)驗(yàn)室檢測陽性數(shù)的54.55%[13]，想要解釋清楚手足口重癥和輕癥病例的發(fā)病機(jī)制，還需要對EV71不同基因型毒株以及其他影響因素做更深入、全面的研究。

除監(jiān)測病例外，重癥病例和聚集病例，男性的病例數(shù)均高于女性，這與2011年本人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及2010年劉雯的研究結(jié)果相一致[14]，這可能與男孩經(jīng)常與小朋友玩耍的比例顯著高于女孩有關(guān)[15]，增加了密切接觸傳播疾病的幾率。而監(jiān)測病例男女比例與假設(shè)結(jié)果不一致的原因，可能是監(jiān)測病例來源單一所致。從不同性別HFMD病毒核酸檢測結(jié)果來看，三種型別病毒，女性患者的陽性率和男性患者的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與曲梅對北京市2009年手足口病的病原結(jié)構(gòu)研究的結(jié)果相一致[10]。

2012年海淀區(qū)手足口病主要高發(fā)于0～3歲和3～6歲兩個(gè)年齡段，分別為129例和363例。其中，重癥病例以0～3歲為主，聚集病例以3～6歲為主。2010年昌平區(qū)HFMD發(fā)病年齡集中在2～4歲年齡組，以EV71為主[16]，與本研究一致，符合手足口病發(fā)病特征[17]。而聚集病例主要以3～6歲的托幼兒童組成，在低年齡段兒童中加強(qiáng)手足口病的宣傳教育，增強(qiáng)托幼機(jī)構(gòu)的防范意識，做到早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早控制，可以有效的減少手足口病聚集疫情的發(fā)生。

參 考 文 獻(xiàn)

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