不同產地黃芩中的黃芩苷提取轉移率研究

劉 濤，張 蕾，劉 婷，周雪蓮，羅小偉

(成都大學生物產業學院，四川 成都 610106)

不同產地黃芩中的黃芩苷提取轉移率研究

劉 濤，張 蕾，劉 婷，周雪蓮，羅小偉

(成都大學生物產業學院，四川 成都 610106)

采用同一提取方法對不同產地的黃芩中黃芩苷的提取轉移率進行考察，并對結果進行分析，以研究不同產地黃芩藥材中黃芩苷提取轉移率，完善黃芩藥材的質量標準.實驗結果顯示，不同產地的黃芩藥材的有效成分轉移率有顯著差別，藥材轉移率是影響藥材質量的一個重要參數.建議在黃芩藥材質量標準中加入提取轉移率這項指標作為藥材主要質量指標之一.

黃芩;黃芩苷;轉移率

0 引言

黃芩是中醫臨床常用中藥，具有清熱燥濕、瀉火解毒等功效，其抗菌、抗病毒、抗炎等藥理作用是以黃芩苷為代表的黃酮類化合物［1］.有效成分的轉移率是中藥、天然藥物制備工藝研究中一項重要的指標，轉移率的大小常用于評價與分析制備工藝的合理性與可行性.本課題組曾經發現金銀花中的綠原酸提取轉移率不穩定［2］，而苦參、木蝴蝶及梔子中的相關成分的提取轉移率與藥材的質地有一定的相關性［3］，相關研究也發現，以不同黃芩為原料的中成藥中黃芩苷的轉移率也不穩定［4］.在實驗過程中，本研究也發現黃芩中所含的黃芩苷提取轉移率也存在不穩定的現象，其原因可能與采收時間、產地及加工方法有關.對此，本研究對不同產地黃芩中的黃芩苷的提取轉移率進行了研究.

1 試劑與儀器

1.1 試劑

實驗所用試劑包括:黃芩苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號，10715－200212)，黃芩藥材購自成都國際商貿城荷花池中藥材市場，經有關專家鑒定符合《中國藥典》2010版(一部)黃芩項下標準;甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純;水為純凈水.

1.2 儀器

實驗所用儀器包括:P230Ⅱ型高效液相色譜儀(伊利特公司)，FA2004型電子天平(上海精科實業有限公司)，FW100型杯式粉碎機(北京科偉永興儀器有限公司)，電熱套.

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

取經0℃減壓干燥4 h的黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l mL含40 μg的溶液，制得對照品溶液.

2.2 原藥材含量測定方法

各原藥材的含量測定方法均按照《中國藥典》2010版(一部)黃芩項下方法進行測定，原藥材計算含量時不以干燥品計算(即不扣除水分).

2.3 供試品溶液的制備

取100 g黃芩，再加入800 mL水，加熱煮沸提取1 h，提取3次，合并藥液，冷卻至室溫并測量體積，濾過，取10 mL溶液于100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻.再量取1 mL于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μm)濾過，制得供試品溶液.

2.4 色譜條件與系統適用性實驗

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為甲醇∶水∶磷酸(47∶53∶0.2)，檢測波長280 nm;柱溫25℃，理論板數2 500.

2.5 測定法

分別精密量取對照品溶液與供試品各10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算，即得.

2.6 轉移率計算方法

黃芩苷轉移率計算公式為，

其中，提取液中黃芩苷的總量=3次提取液黃芩苷的濃度×3次合并提取液的體積

2.7 方法學考察

2.7.1 線性關系考察.

取黃芩苷對照品適量，精密稱定，置于50 mL潔凈的容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超聲至對照品完全溶解，其濃度為0.1 mg/mL.從已配好的0.1 mg/mL的黃芩苷對照品溶液中，精密吸取2、4、6、8 mL，置于10 mL容量瓶中，加甲醇定容，其濃度依次為20、40、60、80 μg/mL，在“2.3”項下的色譜條件下測得其峰面積，以峰面積為橫坐標，進樣量(μg)為橫坐標繪制標準曲線.結果，R2=0.9993，表明黃芩苷在20～100 μg/mL之間具有良好的線性關系.

2.7.2 穩定性實驗.

分別吸取供試液，按“2.3”項下的色譜條件下測得樣品4 h內的穩定性.結果顯示，樣品中的黃芩苷在4h之內穩定(RSD=2.83%).

2.7.3 精密度實驗.

取黃芩苷對照品溶液，重復進樣5次，記錄峰面積.結果表明，其精密度良好(RSD值=1.06%).

2.7.4 加樣回收率.

取樣品0.3 g，精密稱定，加入黃芩苷對照品0.8766 mg，按照“2.3”項下的色譜條件測定.結果顯示，加樣回收率在95.4% ～104.4%之間，表明加樣回收率合格.

2.8 結 果

不同產地原藥材中黃芩苷含量及提取轉移率如表1所示.

表1 不同產地黃芩中黃芩苷含量及提取轉移率測定結果

結果表明，不同產地的黃芩藥材中黃芩苷含量及其所含黃芩苷的提取轉移率不同，山西所產的黃芩中其黃芩苷含量較高，提取轉移率也較高，大于80%，且符合相關技術要求.

3 討論

本研究中黃芩提取液的制備工藝參數，如溶媒及其用量、提取時間、提取次數等，是經過單因素及正交試驗確定的，此可以避免提取工藝參數對藥材提取轉移率的影響.由于未按干燥品投料，故計算原藥材含量時也未按照干燥品計算.

本研究參照文獻［3］方法，考察過按照《中國藥典》(一部)黃芩項下“含量測定”的方法對其粗粉和細粉分別進行了含量測定.實驗結果發現，粗粉和細粉含量差別較大.因此，在原藥材含量測定中，本研究將藥材盡量粉碎，以保證原藥材含量的準確性.

有效成分的轉移率是現行新藥研究的重要內容，是衡量工藝參數是否合理的重要指標［6］.本研究測定了不同產地的黃芩藥材中黃芩苷的含量及其轉移率.結果表明，不同的產地的黃芩含黃芩苷以及黃芩苷的轉移率有顯著差距，在所測定的樣品中，山西所產的黃芩其黃芩苷含量最高，所含黃芩苷提取轉移率較高.原因可能是藥材生于不同產地時，采收時間及加工方法不同引起的，其具體原因有待進一步研究.

建議有關部門在黃芩藥材質量標準中加入“提取轉移率”作為主要質量指標，以控制中藥制品的質量.

［1］姚干，何宗玉，方積年.黃芩總黃酮提取及純化工藝的研究［J］.中成藥，2006，29(11):1568 －1571.

［2］徐娜紅，全金龍.炮制方法對黃芩中有效成分黃芩苷含量的影響［J］.臨床合理用藥雜志，2010，3(16):100.

［3］王雷，王學艷，周雪琴，等.黃芩苷在不同溶媒中的穩定性研究［J］.中國藥師，2006，9(2):129 －132.

［4］宋逍，唐志書，崔春利，等.中藥復方制劑中黃芩苷轉移率影響因素研究［J］.陜西中醫，2008，29(6):730 －731.

［5］黎萬壽.黃芩苷提取工藝研究［J］.中草藥，2000，31(2):107－110.

［6］劉濤，萬德光，王永香，等.HPLC法測定金銀花藥材中綠原酸的轉移率［J］.南京中醫藥大學學報(自然科學版)，2008，50(5):350 －352.

［7］劉濤，郭曉恒，吳春梅，等.肺毒清顆粒中有效成分的含量測定及轉移率考察［J］.中國實驗方劑學雜志，2013，19(10):54－56.

［8］張清波，劉麗娟.對《中國藥典》2000年版(一部)收載品種黃岑苷含量測定方法及限量的探討［J］.中國藥品標準，2002，3(4):5 －8.

［9］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京:中國醫藥科技出版社，2010.

Study on Transfer Rate of Extraction of Baicalin from Scutellaria Baicalensis Root

LIU Tao，ZHANG Lei，LIU Ting，ZHOU Xuelian，LUO Xiaowei
(School of Biological Industry，Chengdu University，Chengdu 610106，China)

To study the transfer rate of extraction of baicalin from Scutellaria baicalensis roots in different producing areas and improve available quality standards of Scutellaria baicalensis roots，we use the same extraction method to investigate the transfer rate of extraction，and analyze the obtained results.The experimental results show significant differences among transfer rates of active ingredients of Scutellaria baicalensis roots in different producing areas.We conclude that the transfer rate of extraction is a parameter which affects quality of chinese medicinal materials，and it is recommended that the transfer rate can be added to quality standards for Scutellaria baicalensis roots as one of the main quality indicators.

Scutellaria baicalensis root;baicalin;transfer rate

R282.5

A

1004－5422(2014)01－0007－03

2013－11－20.

成都市科技局高等院校應用成果轉化(12DXYB020JH－002)資助項目.

劉 濤(1976—)，男，博士，高級工程師，從事中成藥新藥開發與再評價研究.