不同孕齡氣體信號分子NO、CO和H2S與胚胎停育相關性的研究

韓 蓓 葛 華*

（包頭醫學院第一附屬醫院婦產科，內蒙古 包頭 014010）

不同孕齡氣體信號分子NO、CO和H2S與胚胎停育相關性的研究

韓 蓓 葛 華*

（包頭醫學院第一附屬醫院婦產科，內蒙古 包頭 014010）

目的 研究不同孕齡氣體信號分子與胚胎停育的相關性，并確定劑量反應關系，以提供作為胚胎停育篩查的標志物。方法 選擇對照組、病例組各90例，采集外周靜脈血，采用ELISA方法，測定血漿中NO、CO和H2S的濃度。結果 在正常妊娠和胚胎停育的孕婦外周血中均可檢測到內源性氣體信號分子NO、CO和H2S的存在。對照組NO、CO和H2S濃度隨孕齡增加而升高，經統計學分析具有顯著性差異，P＜0.05。病例組NO和H2S濃度隨孕齡增加而升高，具有顯著性差異，P＜0.05；病例組不同孕齡CO濃度隨孕齡增加呈升高趨勢，但無顯著性差異。結論 NO、CO和H2S濃度降低是導致胚胎停育的重要因素。

胚胎停育；妊娠；氣體信號分子；孕齡；一氧化氮；內源性一氧化碳；硫化氫

胚胎停育是指胚胎或胎兒已死亡滯留在宮腔內尚未自然排出者，它是一種特殊情況的自然流產。大多數孕婦胎兒停止發育后無明顯癥狀，部分孕婦可能出現陰道流血，一般無腹痛，這與先兆流產不同。B超監測胚胎，如≥6周無妊娠囊，或雖有妊娠囊但變形皺縮，當妊娠囊已≥4 cm卻看不到胎芽，胎芽的頭臂長度≥1.5 cm卻無胎心博動，即可判定胚胎停育。

生物體及細胞內存在復雜多樣的信號途徑，其中氣體信號分子以其獨有的可連續產生、傳播迅速、快速彌散等特點使生物醫學研究進入了全新階段。氣體信號分子即NO、CO和H2S等，是一種相對分子質量較小的氣體分子，是一種獨特的、具有類似特性的血管活性物質，具有不通過受體發揮作用、可以自由通過細胞膜、內源性關鍵酶可調節其生成、在生理濃度時有很明確的特殊功能、依賴或不依賴第二信使介導其細胞學效應等特點，但它們都具有特定的細胞和分子作用的靶點，具有舒張血管、抑制血小板聚集和抑制細胞增殖等作用。因此，氣體信號分子是從另一個角度去審視胚胎停育發生的原因，更加完善胚胎停育病因的確定，有助于監測胚胎停育的發生與早期干預。

1 資料與方法

1.1 資料

180例血樣標本來自內蒙古科技大學包頭醫學院第一附屬醫院產科門診及病房孕56～91 d胚胎停育的患者和正常對照組人群，采集的靜脈血于EDTA-Na2抗凝，離心后取上層血漿進行實驗。

1.2 方法

1.2.1 實驗分組

病例組：共90例，年齡26～35歲，身體健康，根據B超監測胚胎，≥8周有妊娠囊但變形皺縮，當妊娠囊已≥4 cm卻看不到胎芽，胎芽的頭臂長度≥1.5 cm卻無胎心搏動者，且孕酮、β-HCG一周內連續檢測3次，結果無明顯升高甚至降低者；正常對照組：共90例，年齡26～35歲，身體健康，正常要求人工流產婦女，孕齡≥8周，胚胎監測符合正常妊娠，且孕酮、β-HCG一周內連續檢測3次，結果呈顯著倍增趨勢者；將全部樣本按孕齡分組，分為妊娠56～63、64～70、71～77及78～91 d共4組。

1.2.2 實驗方法

本實驗研究采用酶聯免疫法。

1.2.3 統計學方法

2 結 果

2.1 人群年齡比

經過統計分析，病例組和對照組年齡比較無統計學意義，P＞0.05，可認為兩組人群年齡無差異。

2.2 不同孕齡氣體信號分子測定結果

從表1可以看出，對照組三種氣體信號分子濃度隨孕齡的增加逐漸升高，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05。從表2可以看出，病例組NO、H2S濃度隨孕齡的延長逐漸升高，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05；CO濃度隨孕齡的延長雖然有逐漸升高的趨勢，但經統計學分析，無顯著性差異，P＞0.05。

表1 對照組不同孕齡氣體信號分子測定結果（）

表1 對照組不同孕齡氣體信號分子測定結果（）

組別例數 NO CO H2S 56～63 d 21 95.8333±35.4063219.2143±88.0137758.0952±373.8163 64～70 d 22 120.4318±46.9866285.8636±79.0762876.3636±294.3401 71～77 d 24 127.3333±37.2936285.5208±79.8906938.1250±257.3308 78～91 d 23 130.1957±25.9714289.8261±58.07021008.2610±190.9224檢驗值 - 3.846 8.416 8.512 P值 - 0.012 0.038 0.037

表2 病例組不同孕齡氣體信號分子測定結果（）

表2 病例組不同孕齡氣體信號分子測定結果（）

組別例數 NO CO H2S 56～63 d 24 73.4792±5.2822163.4792±33.1142 593.9583±121.5567 64～70 d 22 82.2273±14.2107188.5227±39.6080 604.5455±138.3999 71～77 d 20 96.1500±18.2922178.7750±41.9512 606.0000±134.4051 78～91 d 24 97.1250±35.3040193.0625±48.7387 739.5833±151.6139檢驗值 - 30.812 2.392 6.027 P值 - 0.000 0.074 0.001

2.3 同一孕齡不同組間氣體信號分子測定結果

2.3.1 孕齡56～63 d不同組間氣體信號分子測定結果

從表3可以看出，在孕齡56～63 d時，病例組血漿NO、CO濃度低于對照組，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05；病例組血漿H2S濃度低于對照組，經統計學分析，結果無顯著性差異，P＞0.05。

表3 孕齡56～63 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

表3 孕齡56～63 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

組別 例數 統計表示 t值 P值NO 對照組 21 95.8333±35.4063 2.865 0.009病例組 24 73.4792±5.2822 CO 對照組 21 219.2143±88.0137 2.737 0.011病例組 24 163.4792±33.1142 H2S 對照組 21 758.0952±373.8163 1.925 0.066病例組 24 593.9583±121.5567

2.3.2 孕齡64～70 d不同組間氣體信號分子測定結果

從表4可以看出，在孕齡64～70 d時，病例組血漿NO、CO和H2S濃度低于對照組，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05。

表4 孕齡64～70 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

表4 孕齡64～70 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

組別 例數 統計表示 t值 P值NO 對照組 22 120.4318±46.9866 3.650 0.001病例組 22 82.2273±14.2107 CO 對照組 22 285.8636±79.0762 5.162 0.000病例組 22 188.5227±39.6080 H2S 對照組 22 876.3636±294.3401 3.920 0.000病例組 22 604.5455±138.3999

2.3.3 孕齡71～77 d不同組間氣體信號分子測定結果

從表5可以看出，在孕齡71～77 d時，病例組血漿NO、CO和H2S濃度低于對照組，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05。

表5 孕齡71～77 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

表5 孕齡71～77 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

組別 例數 統計表示 t值 P值NO 對照組 24 127.3333±37.2936 3.608 0.001病例組 20 96.1500±18.2922 CO 對照組 24 285.5208±79.8906 5.674 0.000病例組 20 178.7750±41.9512 H2S 對照組 24 938.1250±257.3308 5.488 0.000病例組 20 606.0000±134.4051

2.3.4 孕齡78～91 d不同組間氣體信號分子測定結果

從表6可以看出，在孕齡78～91 d時，病例組血漿NO、CO和H2S濃度低于對照組，經統計學分析，結果有顯著性差異，P＜0.05。

3 討 論

正常妊娠是一種半同種移植，母體免疫系統對胚胎的父系抗原所產生的反應表現為一種特殊類型的妊娠免疫耐受，當這種免疫耐受狀態遭到破壞并發生免疫排斥時，將可能導致胚胎停育而發生自然流產。

表6 孕齡78～91 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

表6 孕齡78～91 d不同組間氣體信號分子測定結果（）

組別 例數 統計表示 t值 P值NO 對照組 23 130.1957±25.9714 3.521 0.001病例組 24 97.1250±35.3040 CO 對照組 23 289.8261±58.0702 5.996 0.000病例組 24 193.0625±48.7387 H2S 對照組 23 1008.2610±190.9224 5.152 0.000病例組 24 739.5833±151.6139

NO是重要的內皮源性的血管擴張劑和平滑肌松弛劑，可擴張子宮動脈并維持妊娠子宮靜止[1]，但促使子宮內膜的蛻膜化是NO促進著床發生的最主要機制，在蛻膜反應中[2]NO可能通過子宮內膜的血管系統而發揮作用，并通過NO強大的血管舒張作用以及增加子宮內膜血管通透性促進著床的發生。實驗研究證實，妊娠后內源性NO合成明顯增加，參與調節血管擴張和子宮免疫抑制[3]。大鼠子宮和胎盤中CO在妊娠末期生成增加，在注射高鐵血紅素后可使子宮肌層的收縮受到抑制[4]，使血管平滑肌舒張，調節妊娠期間血流動力學改變，使循環血管保持一定的松弛，以適應妊娠的需要。H2S有很多與NO和CO相似的生理學作用：對細胞有保護作用；調節細胞的增殖和凋亡；血管調節機制。在內毒素刺激的小鼠巨噬細胞炎性反應發生中，H2S促進巨噬細胞中CO，從而介導了H2S對NO的抑制效應[5]。在本研究中，通過對外周血NO、CO和H2S濃度的檢測，分別比較相同孕齡對照組及病例組NO濃度的差異，結果得出：對照組和病例組中隨著孕齡的增長血漿NO與H2S濃度均升高，經統計學分析具有顯著性差異，隨著孕齡的增長，對照組血漿CO濃度升高，經統計學分析具有顯著性差異，病例組血漿CO濃度有升高趨勢，經統計學分析無顯著性差異；相同孕齡情況下，病例組中NO與CO濃度明顯低于對照組，經統計學分析具有顯著性差異，除孕齡56～63 d外，H2S濃度在相同孕齡對照組與病例組之間比較均具有統計學差異。這說明，當發生胚胎停育時，孕婦血液中的NO、CO和H2S濃度較胚胎正常發育者明顯降低，這可能是導致胚胎停育的原因之一，進一步說明氣體信號分子的細胞-細胞間信息傳遞、細胞增殖與凋亡、免疫調節等重要生理功能在維持正常妊娠中起到了關鍵性的作用；一旦氣體信號分子在體內血液中的濃度降低，將導致一系列的功能紊亂，進而可能影響胚胎的正常發育，造成胚胎停止發育、流產、早產等一系列嚴重后果。通過對氣體信號分子濃度與孕齡的研究結果我們可以做出推測：氣體信號分子的濃度越低，胚胎停育發生的時間可能越早。

研究表明，三種氣體信號分子之間分別在生成及代謝途徑、轉運、作用靶點、信號轉導通路及生物學效應上存在著復雜的相互作用。NO可以調節許多酶和蛋白的活性，并直接導致酶激活或失活[6]。由于NO供體能提高血管平滑肌細胞中胱硫醚裂解酶的表達[7]，因此，內源性H2S在大鼠主動脈組織中的產生可以因為NO供體的給予而增高。當發生胚胎停育時，氣體信號分子在細胞-細胞間信息傳遞、細胞增殖與凋亡、免疫調節功能中的作用不顯著，相互之間的協同或制約的機制消失，導致一系列的功能紊亂，最終造成胚胎停止發育并最終導致流產的發生。

因此，我們綜合本研究結果給出了一個可以參考的早期胚胎發育的檢測指標，并根據其在孕婦血漿中的表達，可以初步判斷胚胎的發育情況，進而采取積極措施預防甚至干預胚胎停育的發生。

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R714

：B

：1671-8194（2014）07-0068-03

包頭市醫藥衛生科技計劃項目，項目編號：WSJJ2013087

*通訊作者：E-mail:hb2009hb@126.com