高效液相色譜法測(cè)定鹽酸莫西沙星含量及其有關(guān)物質(zhì)

高宏偉

摘 要：采用高效液相色譜法對(duì)鹽酸莫西沙星含量及其有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，苯甲硅烷基鍵和硅膠色譜柱（250mm×4.0mm，5μm），流動(dòng)相為甲醇-四丁基硫酸氫銨磷酸鹽緩沖液（34∶66），檢測(cè)波長(zhǎng)為293nm，柱溫為45℃，流速為1.0mL/min。結(jié)果表明，所建立的方法專(zhuān)屬性、精密度、準(zhǔn)確度、耐用性均較好，可用于鹽酸莫西沙星含量及其有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；鹽酸莫西沙星；檢測(cè)

1 材料

1.1 儀器

高效液相色譜儀（Hitachi Chromaster-5430檢測(cè)器，Hitachi Chromaster-5310 柱溫箱，Hitachi Chromaster-5110 泵），Chromaster色譜工作站，日本Hitachi公司；Intersil ph（250mm×4.0mm，5μm） 色譜柱； AR1140電子天平。

1.2 試劑

鹽酸莫西沙星對(duì)照品、鹽酸莫西沙星峰位對(duì)照品（美國(guó)藥典中雜質(zhì)對(duì)照品，含有雜質(zhì)A～E）、鹽酸莫西沙星雜質(zhì)對(duì)照品，德國(guó)Bayer公司； 鹽酸莫西沙星片（規(guī)格： 400mg） ， 德國(guó)Bayer公司；甲醇為色譜純?cè)噭?其余試劑為市售分析純?cè)噭Ｋ疄榧儍羲?/p>

Moxifloxacin hydrochloride R1=F R2=OCH3

Impurity A：6，8-fluor-moxifloxacin R1=F R2=F

Impurity B：6，8-dimethoxy-moxifloxacin R1=OCH3 R2=OCH3

Impurity C：8-ethoxy-moxifloxacin R1=F R2=OC2H5

Impurity D：6-methoxy-8-fluor-moxifloxacin R1=OCH3 R2=F

Impurity E：8-hydroxy-moxifloacin R1=F R2=OH

Fig.1 Structure of moxifloxacin hydrochloride and its related substances

2 方法

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性

色譜柱：Intersil ph（250mm×4.0mm，5μm）；流動(dòng)相：四丁基硫酸氫銨磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀1.0g與四丁基硫酸氫銨0.50g，加水溶解并稀釋成1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5）甲醇（66：34）；流速：1.0ml/min；柱溫：40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：293nm；進(jìn)樣量：20μl。理論板數(shù)按鹽酸莫西沙星峰計(jì)算不低于2000。各物質(zhì)間的分離度應(yīng)大于1.5，拖尾因子應(yīng)小于2.0。

2.2 溶液配制

對(duì)照品溶液：取鹽酸莫西沙星對(duì)照品約10mg，置10ml容量瓶中，加磷酸溶液（1→1000）溶解并稀釋至刻度，搖勻。供試品溶液：取本品5片，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于莫西沙星100mg），置100ml容量瓶中，加磷酸溶液（1→1000）溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量用水稀釋成0.1mg/ml的溶液。

3 結(jié)果與討論

3.1 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

取供試品溶液分別進(jìn)行酸、堿、氧化、熱及光照破壞試驗(yàn)，分別加入1mol/L鹽酸5mL，1mol/L氫氧化鈉5mL，30%雙氧水5mL調(diào)節(jié)pH至中性，直火燒2h，在4500lx光照條件暴露24h后，取續(xù)濾液20μl進(jìn)樣，記錄色譜圖。主要降解產(chǎn)物經(jīng)與雜質(zhì)峰位對(duì)照品比較均為雜質(zhì)A～E，主成分峰與降解雜質(zhì)峰分離良好。

3.2 線性相關(guān)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取鹽酸莫西沙星對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成濃度約為1mg/ml的貯備液。精密量取貯備液0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，各進(jìn)樣20μl，記錄色譜圖。得線性回歸方程，結(jié)果表明，莫西沙星在0.02mg/ml～0.2mg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

3.3 儀器精密度試驗(yàn)

取濃度約為0.1mg/ml的鹽酸莫西沙星對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，各進(jìn)樣20μl，記錄峰面積。平均峰面積為6384032，RSD為0.34%。結(jié)果表明儀器精密度良好。

3.4 回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取鹽酸莫西沙星對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成濃度約1mg/ml的對(duì)照品貯備液。加流動(dòng)相溶解并稀釋制成0.1mg/ml的溶液，作為對(duì)照溶液；精密量取對(duì)照品貯備液0.8、1.0、1.2ml各3份至10ml容量瓶，加入處方量混合空白輔料，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；計(jì)算莫西沙星的回收率，平均回收率為100.2%，RSD為0.87%。

3.5 樣品測(cè)定

取對(duì)照品溶液和供試品溶液，測(cè)定三批樣品含量及有關(guān)物質(zhì)。批號(hào)BJ07725，含量99.6%，有關(guān)物質(zhì)0.045%；批號(hào)BJ12685，含量100.1%，有關(guān)物質(zhì)0.081%；批號(hào)BJ08256，含量99.8%，有關(guān)物質(zhì)0.054%。

參考文獻(xiàn)

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