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青海省玉樹州豬弓形蟲感染情況調(diào)查

2014-03-22 07:51:45代代青海省玉樹州畜牧獸醫(yī)工作站815000
當代畜禽養(yǎng)殖業(yè) 2014年8期
關(guān)鍵詞:血清

代代 青海省玉樹州畜牧獸醫(yī)工作站 815000

弓形蟲病(Toxoplasmosis)是一種世界范圍內(nèi)廣泛流行的專性細胞內(nèi)寄生的人畜共患寄生蟲病,可自然感染豬、黃牛、水牛、馬、山羊、綿羊、鹿、兔、貓、犬和雞等16 種動物。在各種家畜中以豬的感染率最高,在養(yǎng)豬場感染死亡率高達60%以上。

1 材料與方法

1.1 材料

豬弓形蟲IgG 抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)由深圳芬德生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),主要用于檢測豬血清或血漿中弓形蟲特異性抗體,評估豬場弓形蟲感染狀況。我們采用該試劑盒對玉樹州5 縣1 市的生豬養(yǎng)殖場豬弓形蟲感染概況進行了調(diào)查。

我們于2013年4~11月于玉樹州5 縣1 市的生豬養(yǎng)殖場采集豬血液,每只豬采集3~5mL 血液,待血液凝固析出血清后,以2500r/min 離心5min 分離血清,-20℃保存?zhèn)錂z。

1.2 方法

(1)樣品制備。用樣品稀釋液將待檢血清按100 倍稀釋(如2μl 血清加入198 μl 樣品稀釋液中混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20 倍稀釋。

(2)檢驗方法。使用前將試劑盒置室溫下30 分鐘,恢復至室溫。取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2 孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存??瞻讓φ湛准訕悠废♂屢?00μl,陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。混勻,置37℃下反應30 分鐘??廴タ變?nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,重復洗滌5 次,拍干。每孔加酶標記物100μl(空白孔除外),置37℃下反應30 分鐘。洗滌步驟同前。每孔依次加底物液A、底物液B 各50μl,混勻,37℃避光反應10 分鐘。每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450 nm(可用630 nm 作參比波長)測定各孔吸光值(A 值)。

(3)結(jié)果判定。實驗正常的情況下,陰性對照≤0.20,陽性對照≥0.5;C.O(臨界值)=2.1×陰性對照均值(陰性對照均值小于0.1 時按0.1 計算);樣品值>C.O 為陽性,樣品值≤C.O 為陰性。

2 結(jié)果

通過本次調(diào)查,我們明確了青海玉樹州5 縣1市的豬弓形蟲感染概況,調(diào)查結(jié)果顯示,在玉樹州所收集到768 份豬血液樣品中,共檢測到118 份血清樣品呈弓形蟲血清抗體陽性,豬弓形蟲血清抗體陽性率為15.36%;玉樹市、雜多縣、稱多縣、治多縣、囊謙縣及曲麻菜的豬弓形蟲血清抗體陽性率分別為19.25%、16.81%、16.56%、15.94%、8.60%、11.61%及15.36%,經(jīng)統(tǒng)計學分析不同縣、市間的豬弓形蟲血清學陽性率,無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。

3 討論

弓形蟲是豬的“五大高熱病”的病原之一,感染了弓形蟲的豬肌肉中會存在弓形蟲孢囊,人們食用了生的或不熟的肉質(zhì)能夠引發(fā)弓形蟲感染。在本次調(diào)查中,我們采集到768 份豬血液樣品中,共檢測到118份血清樣品呈弓形蟲血清抗體陽性,豬弓形蟲血清抗體陽性率為15.36%,遠低于先前報道的我國中部地區(qū)37 個大規(guī)模養(yǎng)豬場24.5%的弓形蟲感染率。由此看來,我州防治弓形蟲的工作取得了一定的進展。

然而我州的豬弓形蟲感染率仍然處于較高的感染水平。以往的調(diào)查顯示,弓形蟲流行豬場多與流浪貓的出入(有的場本身養(yǎng)貓)有關(guān);還有報道稱,土壤中弓形蟲卵囊污染較嚴重的豬場,豬群的弓形蟲感染率也較高,土壤的污染程度或許可以反映豬場弓形蟲感染率,而土壤的污染程度又與豬場貓群密度有重要關(guān)系。因此,在一定地域中控制和預防豬群感染弓形蟲的關(guān)鍵在于控制本區(qū)域內(nèi)的貓和嚙齒動物的數(shù)量。因此豬舍內(nèi)應嚴禁養(yǎng)貓并防止貓進入圈舍,并嚴防飲水及飼料被貓糞直接或間接污染。

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