錫盟地區犬感染布魯氏菌病的血清學調查

徐桂杰 蘇乙拉 內蒙古錫林郭勒職業學院 026000

目前，犬布魯氏菌病在全球多個國家和地區都有發生，而且發病數量逐年上升，由犬布魯氏菌病感染人的病例報道也日益增多。因此犬布魯氏菌病的控制和根除對人類健康和公共衛生安全具有重要意義。開展錫盟地區犬感染布魯氏菌病的血清學調查，可以了解犬布病在本地區的流行情況，并且能為預防和控制人間犬布魯氏菌感染提供參考。

1 實驗方法

1.1 試驗材料

從錫盟地區隨機采集145 只犬的血樣。

1.2 試驗方法

無菌采集受檢犬的靜脈血1.0～1.5mL，離心析出血清-20℃冷凍備用。進行虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗。

（1）虎紅平板凝集試驗∶于潔凈陶瓷板上滴加30uL 抗原，隨后加入30ul 受檢血清，攪拌混勻，同時設立陽性和陰性血清對照。

（2）試管凝集試驗∶對平板凝集試驗顯示陽性的血清抗體進行半定量檢測。

(1)于96 孔板第一孔加入200uL0.5%石炭酸，以后每孔加人100uL0.5%石炭酸。

(2)于第一孔中加入受檢血清20ul，混合均勻后吸取20uL 加入第二孔中，依次做倍比稀釋。即從第1 至第12 孔血清稀釋度分別為1∶10、1∶20、1∶40、l∶80、1∶160、1∶320、1∶640……。

(3)將100 uL20 倍稀釋的抗原加入各血清中，振蕩混勻，此時血清稀釋度分別為1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280……。

(4)同時設立陽性血清和陰性血清對照。

(5)置于濕盒中放入3 度溫箱，24h 后取出讀取結果。

1.3 結果判定

(1)虎紅平板凝集試驗：在陽性和陰性對照成立的前提下，受檢血清在4min 內出現肉眼可見的凝集現象者判為陽性(+)，無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性(一)。

(2)試管凝集試驗：在陽性和陰性對照成立的前提下，以出現50%以上凝集現象的最高稀釋度判為血清抗體效價。血清效價l∶80 以上判為陽性；1∶20和1∶40 判為疑似反應；無凝集現象，液體均勻渾濁者判為陰性。

2 結果分析

(1)用虎紅平板凝集試驗，從錫盟地區采集的145份受檢血清中檢出陽性血清7 份，陽性率為4.82%。

(2)對7 份陽性血清進行的試管凝集試驗顯示：陽性血清2 份(抗體效價為1∶80)，陰性血清3 份，疑似血清2 份。

(3)通過血清學檢測可判為布魯氏菌感染犬2例，占總樣本數的1.37%。

(4)試管凝集試驗驗證平板凝集試驗，其符合率為28.5%(2／7)。

3 討論

使用平板凝集試驗不能對布魯氏菌病進行確診，可作為篩選試驗,結合患犬發病情況，試管凝集試驗的特異性較高。通過血清學檢測可判定布魯氏菌感染率為1.37%。

4 預防

養犬業的發展給公共衛生帶來了許多問題，狗咬傷人同時能傳染很多種人畜共患的傳染病,其中犬布病應引起重視。隨著城市家養寵物犬的逐年增多，寵物犬中本病的流行情況也是一個值得研究的問題。在牧區，犬多因進食患病動物臟器而感染本病。人與病犬密切接觸,病犬的分泌物中帶有的布氏桿菌極有可能使人感染。因此要加強犬的管理,防止其感染布氏桿菌病。定期對其進行血清學檢查,一旦發現后及時進行無害處理,將犬尸藥物消毒、焚燒或深埋處理。養犬者應提高警惕，須經常對環境及犬進行藥物消毒,以防布氏桿菌病傳染給人。