中青年缺血性腦血管病患者MMP－9和LPA與頸動脈粥樣硬化的關系

譚 瑩 曾 靜 王 磊

湖北醫藥學院附屬太和醫院 1）檢驗部 2）體檢中心 3）神經內科 十堰442000

目前，我國腦血管疾病患者呈現年輕化趨勢，每年新發生的腦卒中患者中10%為45歲以下的中青年，頸動脈粥樣硬化以及不穩定斑塊的破裂和脫落是引發缺血性腦卒中最重要的危險因素。如何為臨床提供早期預測及防治的檢測手段成為大家研究的熱點。溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid，LPA），是近年來發現的一種在動脈粥樣硬化與缺血性心腦血管病發生過程中起核心作用的脂類分子［1］，通過導致內皮細胞屏障的結構和功能改變促進動脈粥樣硬化早期進程。國內外多項研究表明，基質金屬蛋白酶－9（MMP－9）與動脈粥樣硬化斑塊不穩定性相關。本研究就中青年缺血性腦血管病患者頸動脈粥樣硬化斑塊及硬化程度與以上兩種相關因子的濃度進行分析，旨在及時了解頸動脈內膜和斑塊的穩定情況，為中青年缺血性腦卒中事件的發生提供防治依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選擇2012－02—2013－03我院收治的164例中青年缺血性腦血管病患者，男86例，女78例；年齡27～47歲，平均（37.4±6.7）歲。符合全國第4屆腦血管病學術會議修訂標準［2］，并經顱腦CT或MRI證實。排除心腦血管疾病、糖尿病、腫瘤、嚴重肝腎功能障礙、手術、外傷及近有感染史者。60例正常對照組均為我院體檢中心公務員體檢健康人群，男30例，女30例；年齡28～45歲，平均（35.4±5.5）歲。

1.2 方法及儀器

1.2.1 血液檢測：所有受檢者于清晨采集空腹靜脈血3 mL，肝素鈉抗凝，及時分離血漿。采用上海富眾生物科技公司生產的試劑盒，ELISA法檢測血漿MMP－9和LPA，操作步驟嚴格按照試劑盒操作步驟進行。低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）采用直接法，高敏C反應蛋白（hs－CRP）采用免疫比濁法，使用日本OLYMPUYS AU5400全自動生化分析儀檢測，試劑及質控品均由上海科華生物有限公司提供。

1.2.2 頸動脈超聲檢查：采用以色列RIMED公司生產的全數字經顱超聲＋二維超聲模塊超聲診斷儀，探頭頻率8 MHz。受檢者取平臥位，頭部偏向檢查區對側，充分伸展頸部，沿胸鎖乳突肌外緣先橫切再將探頭旋轉90°做縱切掃查，依次顯示頸總動脈及分叉部、頸內動脈起始處及頸外動脈、椎動脈，測量頸動脈內膜－中層厚度（IMT）。正常頸總動脈IMT＜1.0mm，將IMT≥1.0mm視為粥樣硬化斑塊形成。

1.2.3 斑塊的病理學分型：①扁平斑：為早期少量脂質沉積在內膜，形成條帶線狀回聲，貼附在內膜上形成內膜局限性增厚，厚度＜2mm，病變處動脈血管內膜回聲增強，連續性差，有中斷現象。②軟斑：隨著病情發展，纖維組織增生及鈣鹽沉積，斑塊內出血，血栓形成，斑塊突出于管腔內，局部顯示不同程度的混合性回聲或均勻的弱回聲，表面有連續的回聲輪廓及其光滑的纖維帽，為凸起的厚度＞2mm。③硬斑：則表現為斑塊高低不平，強回聲，后伴聲影，伴有聲衰減。④潰瘍斑：指斑塊表面潰瘍形成，斑塊較大，基底較寬，表面出現凹凸。超聲顯示為“火山口”狀。軟斑塊及潰瘍型斑塊為易損斑塊，扁平斑塊及硬斑塊為穩定斑塊。

1.3 統計學方法 采用SPSS 10.0統計軟件，計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩均數比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

通過頸動脈超聲檢查，將缺血性腦血管病患者與對照組檢出頸動脈動粥樣硬化斑塊的比率進行比較：缺血性腦血管病組檢測164例，其中檢出頸動脈動粥樣硬化斑塊83例，斑塊的發生率為50.6%；對照組60例檢出頸動脈動粥樣硬化斑塊8例，發生率為13.3%，可見，缺血性腦血管病組的粥樣硬化斑塊發生率明顯高于對照組（P＜0.01）。將164例缺血性腦血管病患者根據頸動脈超聲檢查結果，按照病理學分型，將其分為無斑塊組、穩定斑塊組、易損斑塊組，與正常健康對照組間的血漿MMP－9和LPA濃度及相關指標濃度進行比較。易損斑組濃度較無斑塊組及穩定斑組都有顯著升高（P＜0.01）；穩定斑組較無斑塊組血漿MMP－9和LPA濃度也有明顯增高（P＜0.01）。見表1。

表1 各組血漿MMP－9和LPA的濃度及相關指標比較 （±s）

表1 各組血漿MMP－9和LPA的濃度及相關指標比較 （±s）

注：與健康組比較：，＊P＜0.01，△P＜0.05；與無斑塊組比較，﹟P＜0.01，▽P＞0.05，與穩定斑組比較，⊕P＜0.01

組別 n MMP－9（ng／mL） LPA（μmol／L）LDL－C（mmol／L）hs－CRP（mg／L）健康對照6082.47±14.61 2.76±0.87 2.28±0.44 2.27±0.86無斑塊組62 121.40±14.50＊3.98±1.60＊ 2.33±0.51△ 2.35±1.14△穩定斑組53 147.25±12.54＊﹟ 4.12±1.56＊▽ 2.32±0.65△ 3.29±1.67＊﹟易損斑組49 226.12±38.63＊﹟⊕4.53±1.79＊﹟⊕ 2.71±0.73＊﹟⊕ 6.15±2.51＊﹟⊕

3 討論

最常見的頸動脈病變是動脈粥樣硬化斑塊形成。國外報道頸動脈粥樣硬化性病變占中青年腦梗死的16%～22%［3］，國內為7.9%～22%［4］。斑塊形成可引起管腔狹窄，使相應供血腦區缺血。一般認為低回聲斑塊、不均質斑塊是產生神經系統癥狀的危險因素，易引起腦卒中或短暫性腦缺血發作，但臨床同時也提出無癥狀的頸動脈狹窄也是腦血管病強有力的致病因素。不穩定斑塊及血栓形成是在多種因素綜合作用下的結果。本文通過研究不穩定斑塊的產生及斑塊破裂后血栓形成的主要影響因素，重要意義就在于了解頸動脈內膜和斑塊的穩定情況，探索預測斑塊破損的指標，進行及時的干預，為臨床檢測及防治不穩定斑塊提供理論依據，防止腦梗死的發生。

在不穩定性斑塊內由巨噬細胞、T淋巴細胞參與的炎性細胞大量分泌MMPs，使纖維成分降解加劇，破壞斑塊纖維帽完整性，從而導致斑塊破損、脫落，產生栓子。MMP－9主要是由巨噬細胞以前酶原形式分泌。國外研究發現，MMP－9在動脈粥樣硬化病變處表達增強，并能促進動脈粥樣硬化斑塊破裂［5］。而在不穩定斑塊中，特別是易發生破裂的斑塊肩部區域，MMP－9含量較高，酶活性明顯增高，通過降解纖維帽內的膠原，是造成斑塊不穩定并破裂的主要因素［6－7］。本研究發現，易損斑塊組MMP－9含量較穩定斑塊及無斑組顯著增高（P＜0.01）；且hs－CRP也顯著高于對照組及無斑塊組，肯定了hs－CRP水平升高與頸動脈粥樣硬化斑塊和腦梗死的發生有密切關系。

LPA是一種重要的VSMC絲裂素原，主要是由活化的血小板和低密度脂蛋白在輕度氧化過程中產生，且位于動脈粥樣硬化斑塊的中心區，當斑塊破裂暴露LPA，使循環中的血小板活化形成大量的微栓子［8］。許多研究還觀察到LPA誘導細胞內游離Ca2＋濃度增加，刺激Na＋／H＋交換，平行地激活有絲分裂原激活蛋白激酶（MAPK），且細胞增加42%，結果導致管腔狹窄。當血小板受凝血酶刺激后迅速產生并釋放LPA，產生的LPA作為細胞間的“磷脂信使”，通過激活特異性G蛋白受體啟動血小板活化，促進血小板聚集，導致血栓形成［9］。本研究中，檢出斑塊的2組LPA濃度明顯高于對照組及無斑塊組（P＜0.01），而穩定斑組較無斑組LPA水平比較無明顯差異（P＞0.05），提示我們LPA是腦血栓形成的危險因子，血漿LPA濃度越高，發生血栓甚至梗死的幾率越大。

頸動脈粥樣硬化以及不穩定斑塊的破裂和脫落是引發缺血性腦卒中最重要的危險因素，血漿中的MMP－9及LPA可作為反映動脈粥樣硬化斑塊易損性、不穩定性的兩個預測指標，中青年缺血性腦血管病患者只要做好頸動脈粥樣硬化的防治及穩定斑塊的治療，結合臨床超聲檢查，做好監測，積極處理頸動脈粥樣硬化性病變，糾正由其引起的管腔狹窄，避免斑塊脫落，一定能減少缺血性腦卒中的發生。

［1］ Chung SM，Bae ON，L im KM，et al.Lysophosphat id ic A cid Induces Thrombogen ic Activity Through Phosphatidylserine Exposure and Procoagu lan tM icroves icle Generation inH um an E ryth rocytes［J］.A rterioscler Thromb Vasc B io l，2007，27（2）：414－421.

［2］ 中華神經科學會，中華神經外科學會 .各類腦血管病診斷要點及腦卒中患者臨床神經功能缺損程度評分標準［J］.中華神經科雜志，1996，29（6）：379－380.

［3］ Varona JF，Guerra JM，Bermejo F，et al.Causes of ischemic stroke in young adults，and evolution of the etiological diagnosis is over the long term［J］.Eur Neurol，2007，57：212.

［4］ 丁建平，宿英英.青年腦梗死病因及危險因素分析［J］.中國腦血管病雜志，2008，5：202.

［5］ Romero JR，Vasan RS，Beiser AS，et al.Association of carotid artery atherosclerosis with circulating biomarkers of extracellular matrix remodeling；the Framingham Off－spring Study［J］.J Stroke Cerebrovasc Dis，2008，17（6）：412－417.

［6］ Lin RT，Chen CH，Tsai PC，et al.Sex－specific effect of matrix metalloproteinase－9functional promoter polymorphism on carotid artery stiggness［J］.Atherosclerosis，2012，223（2）：416－420.

［7］ Loftus IM，Naylor AR，Goodall S，et al.Increased matrix metalloproteinase－9activity in Unstable carotid plague.A potential role on acute plaque disruption［J］.Stroke，2003，31（1）：40－47.

［8］ Siess W，Zhang KJ，Essler M，et al.Lysophosphatidic acid mediates the rapid activation of platelets and endothelial cells by mildly ox idized low density lipoprotein and accumulates in human atherosclerotic lesions［J］.Proc Narl Acad Sci USA，1999，96（7）：6 931－6 936.

［9］ Chung SM，Bae ON，Lim KM，et al.Lysophosphatidic acid induces thrombogenic activity through phoshatidylserine esposure and procoagulant microvesicle generation in human erythrocytes［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2007，27（7）：414－421 .