心腦血管疾病患者的載脂蛋白E基因多態性與血脂水平相關性

李 婷 楊蘭輝 穆劍強 張 婷

（云南省紅河州第一人民醫院，云南蒙自661199）

論著／冠心病

心腦血管疾病患者的載脂蛋白E基因多態性與血脂水平相關性

李 婷 楊蘭輝 穆劍強 張 婷

（云南省紅河州第一人民醫院，云南蒙自661199）

目的 探討心腦血管疾病患者的載脂蛋白E（apoE）基因多態性同自身血脂水平的相關性。方法 采用聚合酶鏈反應酶切技術以及血脂檢測技術分別對心腦血管疾病患者（觀察組）和對照組健康人群進行研究，對兩組人群中心腦血管疾病出現率和血脂水平同apoE基因多態性的相關性進行分析。結果 兩組人群中apoE基因多態性的分布不同，對照組中載脂蛋白E3等位基因所占比例高于觀察組，而觀察組中E2和E4所占比例高于對照組，具有統計學差異（P＜0.05）。分析兩組患者的血脂指標，攜帶E2等位基因的人群甘油三酯水平高于攜帶E3和E4的人群，攜帶E4等位基因的人群總膽固醇水平高于攜帶E3和E2的人群。結論 心腦血管疾病患者中載脂蛋白E2及E4等位基因的比例較高，提示兩者是導致心腦血管疾病高危因素之一，甘油三酯水平升高同E2等位基因具有相關性，而總膽固醇水平升高同E4等位基因具有相關性。

載脂蛋白E；聚合酶鏈反應；基因多態性；血脂

動脈粥樣硬化是導致心腦血管疾病的高危因素,在國外的致死率達到了50%[1]，而我國的心腦血管疾病發病率也呈上升趨勢。導致動脈粥樣硬化的因素非常多，包括遺傳因素、年齡因素、性別因素以及高血壓和飲食習慣等。其中由遺傳因素導致的血脂代謝紊亂同心腦血管疾病的發病率密切相關,臨床研究證明載脂蛋白E基因（apoE）同脂質代謝異常具有緊密的相關性。本文對apoE基因多態性在心腦血管疾病患者和健康人群中的分布情況進行了分析，對apoE基因多態性同心腦血管疾病以及血脂水平的相關性進行了分析。

1 材料與方法

1.1 一般資料

我院在2012年9月-2013年9月共收治139例心腦血管疾病患者，臨床均得到確診，疾病類型包括腦梗死、腦梗死合并腦出血、腦梗死合并高血壓、腦梗死合并冠心病等，將患者設為觀察組；選擇116例健康人群作為對照組，對照組和觀察組的年齡因素、性別因素等一般資料沒有統計學差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 實驗方法

1.2.1 apoE基因型檢測 抽取3ml抗凝靜脈血，使用低滲溶血以及酚/氯仿法提取白細胞中的基因組,進行沉淀和洗滌，干燥后放入TE緩沖液進行溶解，然后凍存備用。采用PCR引物對apoE基因特異片段進行擴增，擴增產物長度為244bp。采用酶切鑒定apoE的基因型：首先選擇5m擴增產物，使用2%含量的瓊脂糖凝膠電泳上對DNA片段進行檢測，然后使用凝膠電泳自動成像儀進行觀察和拍照。

1.2.2 血脂檢測 采用酶法分別檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)；檢測儀器為奧林巴斯5821全自動生化分析儀。

1.3 統計分析

使用統計軟件SPSS17.0對數據進行統計學分析。采用t檢驗計量資料的組間比較結果，采用χ2檢驗分類資料的組間構成比，P＜0.05說明具有統計學差異。

2 結果

2.1 apoE基因多態性同心腦血管疾病的相關性

E3/3型比例在兩組人群中的比例最高；觀察組E2/3和E3/4所占比例高于對照組，而E3/3型低于對照組，比較具有統計學差異（P＜0.05），見表1。

2.2 apoE基因多態性同血脂之間的關系

通過對兩組患者的血清總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）及HDL-C進行檢測，結果顯示觀察組TC、TG 和HDL-C指標顯著高于對照組，其中觀察組患者中E4/4比例最高的其總膽固醇水平明顯高于無E4/4的患者，而患者中E2/3比例最高的甘油三脂水平明顯高于無E2/3的患者，比較具有統計學差異（P＜0.05）。見表2。

2.3 apoE基因多態性同心腦血管疾病的相關性分析

apoE不同基因型在腦出血、高血壓、冠心病等腦梗死合并癥患者中所占比例，E2/3、E3/4型所占比例均高于對照組人群，而E3/3型所占比例均低于對照組，而E3/3型在無合并癥的患者中所占比例較高，比較結果具有統計學差異（P＜0.05）。見表3。

表1 對照組和觀察組的apoE基因型的對比情況

表2 觀察組患者不同apoE基因型之間的血脂指標對比

表3 apoE基因多態性同心腦血管疾病的相關性對比

3 討論

載脂蛋白E(apoE)構成血漿脂蛋白的重要成分，主要通過肝臟合成，通常在低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)廣泛存在。apoE基因多態性同許多疾病具有相關性，例如高脂血癥、動脈粥樣硬化、冠心病以及腦卒中等[2]。通過采用聚合酶鏈反應(PCR)方法對人基因組DNA中的apoE片段進行擴增,然后在 聚 丙 烯 酰 胺 凝 膠 電 泳 (polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE)對apoE的基因型進行檢測,通過對apoE基因多態性在心腦血管疾病患者及健康人群中的分布情況進行研究，并聯合血脂和脂蛋白等多項指標，從而分析apoE基因多態性同心腦血管疾病、心腦血管合并癥以及血脂水平之間的相關性。Chow dhury等通過分析147例心腦血管疾病患者、80例腦出血患者以及190健康人群，結果證明E3/4以及E4等位基因是導致腦血栓的高危因素，E2等位基因是導致腦出血的高危因素[3]。Kokub等研究證明E2和E4基因是導致腦血栓和腦出血的高危因素，并且同患者的年齡因素具有相關性。導致結果不一致性的因素是多方面的。首先引發心腦血管疾病的高危因素還有遺傳因素、環境因素、年齡因素等其他因素共同作用；其次選擇病例時，需要大量的樣本才能完成更加深入的研究。盡管不同研究者的研究結果不盡相同，但apoE基因多態性是導致心腦血管疾病的高危因素已經普遍得到肯定。其致病原理是apoE基因多態性通過影響脂質代謝最終導致心腦血管疾病的發生，并對疾病的預后也起到相應的影響。ApoE能夠調節脂質代謝，apoE不同類型的異構體對血漿脂質水平造成的影響有明顯的差異。大部分研究認為，apoE多態性不會對HDL-C及apoA1起到明顯的作用；E2不會對LD受體以及apoE受體產生親和力，而E3和E4之間的親和力沒有顯著差異；E2比例較高的個體其血脂變化為甘油三酯出現升高，E4比例較高的個體其血脂變化為總膽固醇出現升高但甘油三酯沒有明顯變化[4]。

本次研究發現：apoE基因分布情況，心腦血管疾病患者中，載脂蛋白E2和E4等位基因比例顯著高于健康人群，E3等位基因比例顯著低于健康人群，比較具有統計學差異（P＜0.05）；血脂變化方面，E2等位基因同甘油三酯水平升高具有相關性，E4等位基因同總膽固醇水平升高具有相關性，說明載脂蛋白E2 和E4基因是導致心腦血管疾病的高危因素。

［1］ 黃剛，袁剛，汪道文.載脂蛋白及其基因多態性與冠心病的關系[J].臨床內科雜志，2008，21（02）：114-115.

［2］ 王永卿，吳嬋娟，姚敏，張應愛，鄭玲玲.黎族心腦血管疾病患者apoE基因多態性分析[J].檢驗醫學，2012，18（04）：227-228.

［3］ 馬娟，田青.血脂代謝相關基因與冠心病的關系[J].云南醫藥，2009，18（05）：178-179.

［4］ 王永卿，周凱玲，姚敏，符先先，鄭青，鐘祥旭.黎族心腦血管疾病患者載脂蛋白E基因多態性與血脂的關系[J].中國老年學雜志，2012，23（08）：376-377.

李婷，1977年生，女，漢族，紅河蒙自人，主管技師，主要從事生化檢驗方面的工作。