穩定過表達miR-125b對乳腺癌MCF-7細胞轉移能力的影響

湯鋒，楊玨，李潤樂，格日力，奚濤**

(1. 青海大學高原醫學研究中心，青海 西寧 810016；2. 中國藥科大學生物技術中心，江蘇 南京 210009；3. 青海大學農牧學院，青海 西寧810016）

穩定過表達miR-125b對乳腺癌MCF-7細胞轉移能力的影響

湯鋒1,2，楊玨2，李潤樂1,3，格日力1*，奚濤2**

(1. 青海大學高原醫學研究中心，青海 西寧 810016；2. 中國藥科大學生物技術中心，江蘇 南京 210009；3. 青海大學農牧學院，青海 西寧810016）

目的：通過構建穩定表達miR-125b的真核表達載體以探討miR-125b對乳腺癌MCF-7細胞轉移能力的影響。方法：構建重組質粒pSilencer 4.1-miR-125b并轉染MCF-7細胞，通過G418篩選得到穩定過表達miR-125b的乳腺癌細胞系MCF-7-miR-125b，并結合二維劃痕愈傷實驗、三維Transwell侵襲小室實驗和集落形成實驗考察過表達miR-125b對乳腺癌細胞系轉移能力的影響。結果：成功獲得了穩定過表達miR-125b的乳腺癌細胞系MCF-7-miR-125b，其在二維和三維水平的遷移能力均明顯強于MCF-7細胞，細胞新生克隆數較MCF-7亦有顯著提高。結論：miR-125b可使乳腺癌細胞轉移能力增強。

miR-125b；真核表達載體；乳腺癌；細胞轉移

近年來，乳腺癌發病率呈不斷升高的趨勢，嚴重威脅著女性健康。腫瘤細胞轉移是影響癌癥患者生活質量和導致死亡的重要原因之一[1-2]，深入探索腫瘤的轉移機制及尋找轉移相關的靶點已成為癌癥治療的重要手段。MicroRNA（miRNA）是一種長度約18～26 bp的單鏈小分子RNA，是由具有發夾結構的約70～90 bp的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成，在轉錄后水平調控靶基因的表達[3]。近來研究表明，miRNA在乳腺癌發生、發展及轉移中發揮重要的作用，其中miR-373、miR-21、miR-10b和miR-200c等均與乳腺癌轉移密切相關[4-9]。

miR-125b與線蟲lin-4具有很強的同源性，位于染色體11q24并在細胞分化中扮演著重要的角色[10-11]。……