高尿酸癥合并高脂血癥患者血小板活化功能的研究

王 輝，董萬利，方 琪，倪建強，張 瑩，黃惠芳

高脂血癥是心腦血管疾病的發病原因之一，近年研究發現，血尿酸作為一項血生化指標，不僅可導致痛風的發生，還常與高血壓病、糖尿病、動脈粥樣硬化、腦梗死、冠心病等疾病密切相關，而動脈血栓、腦血管疾病、動脈粥樣硬化等許多疾病的發生均與血小板的功能改變有關。高脂血癥和高尿酸癥是否引起血小板的活化，臨床研究還不明確。血小板活化后合成和釋放的物質血栓烷B2(TXB2)及血小板α 顆粒膜蛋白140(GMP-140)，可以反映血小板不同時相的活化狀態，是血小板活化的特異性標志物。本次實驗通過對高尿酸癥和高脂血癥患者血清中TXB2及GMP140 水平的檢測，了解血小板活化狀況與高尿酸和高血脂的關系，為臨床診斷提供依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源

1.1.1 單純高尿酸組(A 組)選取單項尿酸高于正常值標本，即血尿酸＞420 μmol/L(本醫院生化室血尿酸參考范圍150 μmol/L～420 μmol/L)，共計30 例，其他各項指標均為正常參考值范圍內。

1.1.2 單純高血脂組(B 組)選取單項血脂高于正常值標本，即總膽固醇TC＞5.72 mmol/L、甘油三酯TG＞2.30 mmol/L、低密度脂蛋白LDL＞3.36 mmol/L(本醫院生化室血脂參考范圍分別為TC:2.90～5.72 mmol/L、TG:0.35～2.30 mmol/L、LDL:2.07～3.36 mmol/L)共計30 例，其他各項指標均為正常參考值范圍內。

1.1.3 高尿酸合并高脂血組(C 組)選取尿值標本，即血尿酸＞420 μmol/L，血脂高于正常值標本，即總膽固醇TC＞5.72 mmol/L、甘油三酯TG＞2.30 mmol/L、低密度脂蛋白LDL＞3.36 mmol/L，共計30例，其他各項指標均在正常參考值范圍內。

1.1.4 正常對照組(D 組)選取各項指標都在正常參考值范圍內的標本，共收集30 例。以上所有標本，共計120 例，均來自于2013 年2 月～2013年5 月在我院的體檢人群，排除合并糖尿病、冠心病、繼發性高血壓、血液病、肝、腎功能不全及影響血脂、尿酸代謝疾病的病例。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 研究對象均于清晨空腹抽取肘靜脈血兩管，檢測血小板聚集功能的血液用含有枸櫞酸鈉抗凝劑的真空采血管采集，充分混勻，應用PL-11 血小板分析儀進行進行血小板聚集功能的檢測;尿酸、TC、TG、LDL 的血液用促凝管采集。充分混勻，以3000 r/min，離心10 min 后，進行各項指標的檢測，并調取患者當天的血常規報告，排除血象異常的標本。

1.2.2 儀器 OLYMPUS AU5400 全自動生化分析儀，奧林巴斯產業株式會社生產;PL-11 血小板分析儀，南京神州英諾華醫療科技有限公司生產;Anthos 2010 酶標儀，Anthos fluido 自動洗板機，奧地利Anthos 儀器公司生產;B.D EDTA-2K 抗凝真空采血管和B.D 檸檬酸鈉抗凝真空采血管，美國Becton Dickinson 公司產品。

1.2.3 方法 血小板聚集試驗:按照PL-11 血小板分析儀使用說明書操作，記錄血小板最大聚集率(PAgT);血小板GMP-140 及TXB2測定:嚴格按照試劑盒說明書操作，結果以吸光度(OD)表示，所購買于上海逸晗生物科技有限公司。

1.2.4 統計處理 采用SPSS17.0 軟件進行數據的統計與分析，數據以±s 表示。數據資料采用t 檢驗，組間對比采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

A 組GMP-140(11.7±4.4)ng/ml、B 組GMP-140(11.6±3.8)ng/ml 及C 組GMP-140(12.7±5.3)ng/ml 均高于正常對照D 組(10.3±0.5)ng/ml，差別均有統計學意義(P＜0.05)且C 組與正常對照組的差別有明顯統計學意義(P＜0.01)，而C組GMP-140(12.7±5.3)ng/ml 又明顯高于A 組GMP-140(11.7±4.4)ng/ml 與B 組GMP-140(11.6±3.8)ng/ml，差別有統計學意義(P＜0.05)。A 組TXB2(195±23)pg/ml 及B 組TXB2(180±17)pg/ml，C 組TXB2(224±33)pg/ml 高于正常對照D 組(80.5±16)pg/ml，差別有統計學意義(P＜0.05)，C組與正常對照組的差別有明顯統計學意義(P＜0.01)，而C 組TXB2(224±33)pg/ml 又明顯高于A組TXB2(195±23)pg/ml 及B 組TXB2(180±17)pg/ml，差別有統計學意義(P＜0.05)。血小板最大聚集率PAgT，A 組、B 組、C 組均高于對照組D 組，差別有統計學意義(P＜0.05)，而C 組PAgT 又明顯高于A 組、B 組，差別有統計學意義(P＜0.05)。

表1 單純性高尿酸組、高血脂組及高尿酸合并高血脂組與正常對照組GMP-140、TXB2、PAgT 比較(±s)

表1 單純性高尿酸組、高血脂組及高尿酸合并高血脂組與正常對照組GMP-140、TXB2、PAgT 比較(±s)

* 與正常對照組比較P＜0.05;＊＊與正常對照組P＜0.01;＆與高血脂組和高尿酸組比較P＜0.05

3 討論

GMP-140 是一種高糖基化的單鏈跨膜糖蛋白，其介導參與的血小板/內皮細胞黏附及血管壁炎癥狀態，是導致動靜脈血栓形成的新的發病機制［1］。血栓素A2(TXA2)主要由血小板微粒合成和釋放，有收縮血管、激活血小板和促進血小板聚集的作用。當血管內皮損傷時，循環血液中的血小板在損傷部位黏附，黏附后的血小板合成TXA2增加，前列環素(PGI2)合成減少，從而導致PGI2/TXA2平衡失調、冠狀動脈收縮、血小板聚集、血栓形成并誘發和加重心肌缺血，TXA2還能促使致密管系統中的Ca2+的游離，引起致密管收縮，并釋放出二磷酸腺苷(ADP)和5-羥色胺(5-HT)，使附近的血小板發生聚集。TXB2是TXA2最終穩定代謝產物，因此可以用TXB2來反映血漿中TXA2的水平［2］。血小板聚集功能是指血小板與血小板之間相互黏附而產生聚集的能力，可以反應血小板的功能，臨床上可以用來判斷病癥并發癥的風險和治療效果［3］。

本次研究通過對采集的標本GMP140 和TXB2水平以及血小板最大聚集率的測定，發現高尿酸、高血脂患者體內的血清GMP-140、TXB2水平與正常者相比，存在明顯的升高現象，且與血小板功能關系改變密切，在高血脂合并高尿酸的人群中這種血小板活化現象更為明顯嚴重。

高尿酸除可引起關節炎、痛風石、尿酸結石等臨床癥狀外，現在多數流行病學和臨床研究傾向于高尿酸血癥作為血栓形成一個獨立危險因素，是引起心血管疾病的一個重要原因。NHANEIII 等［4］研究結果顯示，血尿酸水平＞416.5 μmol/L 是腦卒中的一個獨立危險因素。血尿酸與心腦血管疾病關系逐漸成為研究熱點，在心腦血管疾病的發病及預后中起著至關重要的作用［5］。在高脂血癥的患者中，血脂會危害冠狀動脈，形成粥樣硬化。大量脂類物質，在血漿中沉積移動，降低血液流速，通過氧化作用沉積在動脈血管內，并長期黏附在血管壁上，損害動脈血管內皮，形成血管硬化。當人體由于長期高脂血癥形成動脈粥樣硬化后，使冠狀動脈內血流量變小、血管腔內變窄，心肌注血量減少，造成心肌缺血，導致心絞痛，形成冠心病及血栓等［6］。因此對高尿酸和高血脂引發的疾病預防極為重要。

高尿酸和高脂血癥患者血清中血小板過度活化，促進了血栓的發生和發展。而其中的TXB2和GMP140 不僅是血小板活化的標志，本身亦是血小板活化的刺激因子，因此阻斷和抑制上述介質可能會在一定程度上抑制血小板的活化以及由此帶來的一系列不良的連鎖反應，從而為心腦血管疾病，動靜脈血栓的形成治療提供新的方向和途徑。加強對高血脂和尿酸患者血小板的活性監測，對引發的并發癥預防起到一定的作用。

［1］Myers DD，Hawley AE，Farris DM，et al.P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis［J］.Journal of Vascular Surgery，2003，38(5):1075-1089.

［2］Gibbins JM.Platelet adhesion signalling and the regulation of thrombus formation［J］.Journal of Cell Science，2004，117(16):3415-3425.

［3］張遠梅.高血壓伴高脂血癥患者血小板聚集功能變化分析［J］.吉林醫學，2012，33(9):1815-1815.

［4］Waddington C.Elevated uric acid can raise risk for CHD［J］.Cardiol Today，1999，2(1):15.

［5］Vázquez-Mellado J，Alvarez Hernández E，Burgos-Vargas R.Primary prevention in rheumatology:the importance of hyperuricemia［J］.Best Practice ＆ Research Clinical Rheumatology，2004，18(2):111-124.

［6］Talayero BG，Sacks FM.The role of triglycerides in atherosclerosis［J］.Current cardiology reports，2011，13(6):544-552.