復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中鹽酸異丙嗪和氯氮的有關物質分析

陳曉英（福建生物工程職業技術學院，福州 350002）

復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊為復方降壓藥，是多組分復方制劑，其主藥成分為：地巴唑、鹽酸異丙嗪、磷酸氯喹、硫酸胍生、維生素B6、氯化鉀、利血平、氯氮、氫氯噻嗪、乳酸鈣、維生素B1、三硅酸鎂。國內文獻多見其各主成分的含量測定[1-5]，而未見對其有關物質的分析。筆者對該制劑的有關物質進行了初步研究，結果發現與高慧欽[5]報道相似，鹽酸異丙嗪和氯氮?性質不太穩定。為此，本研究采用高效液相色譜（HPLC）法對該制劑中鹽酸異丙嗪和氯氮產生的雜質進行了分析，并對市售的不同企業的51批產品進行了分析檢測，為其質量控制提供依據。

1 材料

1.1 儀器

1100型液相色譜儀、6400 LC/MS（液質聯用）儀（美國Agilent公司）。

1.2 藥品與試劑

市售復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊（廠家及批號見表1，規格：均為每粒0.25 g）；鹽酸異丙嗪原料藥（批號：090214，純度：99.2%）、氯氮原料藥（批號：171229-200603，純度：99.92%）均由福建省藥品檢驗所提供；磷酸二氫銨、磷酸、鹽酸均為分析純，甲醇為色譜純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C8（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相A：0.05 mol/L磷酸二氫銨（用磷酸調節pH至3.2），流動相B：甲醇（梯度洗脫，0～20 min，60%A；20～50 min，60%A漸降至15%A；50～55 min，15%A；56～60 min，60%A），流速：1.0 ml/min；檢測波長：254 nm；柱溫：室溫；進樣量：10 μl。

2.2 專屬性試驗

鹽酸異丙嗪結構中含有吩噻嗪環，容易被氧化成醌型化合物，對光敏感，光照下吩噻嗪類化合物更易被氧化。根據此特性，將鹽酸異丙嗪原料藥同時進行光照（4 500 lx）和高溫（60 ℃）處理，處理后的樣品用0.1 mol/L鹽酸（以下簡稱鹽酸）溶解，制成0.5 mg/ml的溶液（a）。

取約2粒膠囊樣品（批號：20111204）細粉于90 ℃加熱處理后，置于25 ml棕色量瓶中用鹽酸溶解并稀釋至刻度，微孔濾膜濾過，作為破壞后供試品溶液（c）。

取約2粒膠囊樣品（批號：20111204）細粉置于25 ml棕色量瓶中，用鹽酸溶解并稀釋至刻度，微孔濾膜濾過，作為供試品溶液（d）。

取上述溶液進樣，記錄色譜圖見圖1。

根據圖1可知，在破壞試驗中，無論是鹽酸異丙嗪原料藥還是膠囊樣品，均存在1個保留時間約為5.4 min的雜質及主峰異丙嗪后面的2個雜質峰。

2.3 空白干擾試驗

圖1 高效液相色譜圖A.溶液a；B.溶液b；C.溶液c；D.溶液d；E.溶液e；1.異丙嗪；2.氯氮?；3.異丙嗪雜質Ⅰ；4.異丙嗪雜質Ⅱ；5.異丙嗪雜質Ⅲ；6.化合物Ⅱ；7.化合物ⅠFig 1 HPLC chromatogramsA.solution a；B.solution b；C.solution c；D.solution d；E.solution e；1.promethazine；2.chlordiazepoxide；3.promethazine impurity Ⅰ；4.promethazine impurity Ⅱ；5.promethazine impurity Ⅲ；6.compoundⅡ；7.compound Ⅰ

圖2 化合物Ⅱ的液相-質譜圖（ESI負離子）Fig 2 LC/MS spectrum of compound Ⅱ（ESI negative ion）

經調查，各不同廠家生產的該制劑的配方和工藝基本相似，按照該品配方制備缺主藥成分鹽酸異丙嗪和氯氮的陰性樣品，按照與制備供試品溶液相同的方法制備成溶液e，進樣后記錄色譜圖。結果表明，在該色譜條件下陰性樣品對主成分測定未見干擾，見圖1E。

2.4 檢測限與精密度試驗

2.4.2 精密度：取溶液d連續進樣6次，記錄色譜圖。結果鹽酸異丙嗪和氯氮主峰峰面積的RSD分別為0.73%、0.52%（n＝6）。

2.5 穩定性試驗

取溶液d在室溫下放置，分別在0、2、4、6、8 h取樣測定，記錄峰面積。結果鹽酸異丙嗪和氯氮主峰峰面積的RSD分別為1.69%、1.09%（n＝5），表明供試品溶液在8 h內穩定。

2.6 有關物質檢查方法與結果

取膠囊2粒，除去囊殼，細粉置于25 ml棕色量瓶中用鹽酸溶解并稀釋至刻度，微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。按“2.1”項色譜條件，進樣10μl，記錄色譜圖，采用雜質與各自主成分面積歸一化法計算雜質的量。

10個企業51批市售膠囊樣品經上述方法測定，其結果顯示，鹽酸異丙嗪的雜質含量均在1%以下，且各廠家的產品中該雜質的量都相對比較穩定；而氯氮的雜質即化合物Ⅱ的量普遍偏高，在1%以下的約占22%、1%～3%約占33%、3%以上的約占45%，最高的一批次甚至接近8%，詳見表1。

表1 51批市售膠囊樣品雜質檢查結果Tab 1 Results of impurity detection in 51 batches of commercially available capsule

續表1Contined tab 1

3 討論

市售復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中鹽酸異丙嗪所產生的雜質，未見有文獻報道其歸屬，而且在《中國藥典》[6]以及《美國藥典》[8]的鹽酸異丙嗪的質量標準中均采用薄層色譜自身對照法進行有關物質檢查，同時也未指明雜質歸屬。因此，復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中鹽酸異丙嗪所產生的雜質歸屬有待進一步研究。

根據初步原因排查，氯氮?的雜質量普遍偏高可能與原料藥的質量有關，但具體原因有待進一步研究。另外，氯氮如何轉化成其氧化物（化合物Ⅱ）也未見報道，需要進一步探討。

綜上，本方法可用于分析復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中鹽酸異丙嗪和氯氮產生的有關物質。

[1]鄧富良，饒均明，周平，等.HPLC測定復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中五種成分的含量[J].中國藥科大學學報，2004，35（5）：446.

[2]修虹.HPLC法測定復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中利血平的含量[J].海峽藥學，2011，23（12）：63.

[3]陳秀琳.HPLC法測定復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中硫酸胍生、磷酸氯喹、維生素B1和維生素B6的含量[J].中國藥品標準，2010，11（6）：453.

[4]田寶勇，劉英華，楊曉華，等.火焰原子吸收法測定復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊中氯化鉀含量[J].河北科技大學學報，2010，31（5）：406.

[5]高慧欽.復方地巴唑氫氯噻嗪膠囊工藝改進和質量研究[D].天津：天津大學，2009：1-53.

[6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：1 026.

[8]The United States Pharmacopeial Convention.USP32/NF27[S].Washington D.C.：The United States Pharmacopeial Convention，Inc.，2009：3 405.