探討影響脂肪組織病理切片質量的因素

張萍 李小梅

探討影響脂肪組織病理切片質量的因素

張萍 李小梅

脂肪組織；病理切片

在病理制片工作中, 常常會遇到脂肪組織, 由于其組織結構特殊, 如果將這些按常規程序的脫水、浸臘等處理時,其中含有豐富脂肪組織的標本難以將其完全溶出, 而使切片不順利, 經常出現破碎、擠壓或切片不完整等現象, 直接影響病理切片質量, 造成病理診斷的困難。所以湖北省荊州市第三人民醫院在處理組織過程中通過調整脫水、浸臘的時間,來保證脂肪組織切片的完整。現將改進后的方法整理如下。

1 取材和固定

由于脂肪組織具有大量脂肪細胞聚集而成, 而疏松的結締組織將成群的脂肪細胞分隔成許多脂肪小葉, 僅有少量的膠原纖維、血管和神經, 因此對組織固定要充分。取材時組織厚薄要均勻, 一般大小為2 cm×1.5 cm×0.3 cm為宜, 標本固定的好壞直接影響制片的各個環節, 標本離體后應及時的固定, 防止組織發生干縮變硬或自容、腐敗。所以固定對于制作脂肪組織切片至關重要［1］。本科是每天下午3點取材放入10%福爾馬林液固定至第二天上午8點。

2 脫水、透明、浸蠟

因為脂肪組織大部分為脂肪滴, 不利于液體與這些組織的相互滲透。乙醇脫水必須徹底, 盡量使脂肪溶解, 與常規組織同步用全自動脫水機對組織進行處理, 全自動的病理組織脫水機是用甲醛、乙醇、二甲苯、石蠟對組織進行處理的, 乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟浸蠟。同步處理完后將脂肪組織再移至杯中進入65℃恒溫箱中繼續浸蠟2～3 h(石蠟：溶點為56～58℃,內加入少量蜂蠟, 比例20：1), 以盡可能除去組織中的透明劑,使脂肪細胞內充滿蠟以增加組織的硬度, 達到支掌組織的作用［2］。這樣處理的脂肪組織可以保證脂肪組織切片完整。

3 切片和染色

作為脂肪組織的切片不能切的太薄、過薄的切片脂肪含量較少, 影響對中性脂肪的顯示［3］。在切片時要注意水溫控制一般以43℃為宜, 因為水溫過高或浸蠟不足都可使攤片時組織向四周散開, 不僅造成撈片困難、且使組織結構松散融化, 為了使脂肪組織顯示結構完整, 組織切片厚度5～6 μm為宜。

在進行HE染色時, 組織要先在69℃烤箱內烤10 min, 再用1000～1500 W的電熱吹風距離載玻片2～3 cm吹3～5 min, 這樣即能使組織內的蠟融化、又使組織與載玻片粘貼牢固不易脫片。進入蘇木素染色顏色宜深一些。本科一般在蘇木素中染10 min,染色過程中鹽酸乙醇的分化較為關鍵, 分化一定要恰到好處［2］。

3 結果

提高脂肪組織切片質量的關鍵是脫水或浸蠟。脂肪組織脫水、透明后要加倍延長浸蠟時間, 使組織得以充分浸蠟增加組織硬度, 使組織不變形, 才能保證切片平整、組織連片順利且易攤平、無皺折, 塌陷現象, 不易破碎、脂肪細胞框架完整。使鏡下脂肪組織結構清晰, 層次分明, 無假象。切片質量是指導醫師作出準確診斷的重要保證。

［1］ 周顯.脂肪組織制片的改良方法.臨床與實驗病理學雜志, 2009,25(2):216.

［2］ 邵凌波,陳宇中.提高皮膚脂肪組織切片質量的體會.現代實用醫學, 2002,14(12):669.

［3］ 胥維勇,楊群,范小莉.顯示神經內分泌細胞的方法.中國組織化學與細胞化學雜志, 2006, 15(1):106-107.

434000 湖北省荊州市第三人民醫院