CXCL9、IL-22在尋常型白癜風患者外周血中的表達及其臨床意義

葉筱燕，戴永江，蒙秉新，曾慧明，丁 艷

（1.海南省人民醫院皮膚科，海口570102；2.海南醫學院附屬醫院皮膚科，海口570311）

白癜風是一種表皮色素細胞的消失所造成的獲得性皮膚疾病，全球發病率約0.5%。其發病機制尚未明確，但可能涉及遺傳因素、自身免疫性疾病、神經系統疾病因素、有毒代謝物及黑色素細胞生長因子的缺乏等。趨化因子9（C-X-C motif 9，CXCL9）屬于趨化因子CXC 家族的成員，其對T 細胞及單核細胞具有誘導和趨化作用［1］。CXCL9的受體為趨化因子受體3（CRCX3），已有文獻指出CXCR3在白癜風患者皮膚組織及外周血單一核細胞（PBMC）中呈現高表達，可能參與了白癜風的發病過程，因此推測CXCR3 的配體CXCL9 可能與白癜風發病相關［2］。IL-22是近年來新發現的一種在急性炎癥期釋放的細胞因子，有研究發現在急性炎癥期患者外周血中可檢測到IL-22處于較高的水平［3］。本研究通過檢測尋常型白癜風患者外周血清中CXCL9及IL-22的表達水平并探討其臨床意義，為進一步探討尋常型白癜風的發病機制提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年3～8月本院皮膚科門診就診的35例尋常性白癜風患者為試驗組，并進一步分為進展期白癜風患者組（簡稱進展組）和穩定期白癜風患者組（簡稱穩定組）。尋常型白癜風患者男24 例，女11 例，年齡22～52 歲，平均（34.57±8.31）歲，病程0.5～12年，平均（3.18±2.68）年。診斷標準：依據中國中西醫結合皮膚性病專業委員會色素學組關于白癱風臨床分型及療效標準。排除標準：免疫性疾病、系統性疾病、肝腎功能不全及斑癬、糠疹等其他致色素減退性疾病患者；近1個月內使用過糖皮質激素、免疫抑制劑、外用藥物及紫外線照射治療的患者。尋常型白癜風進展期20例，穩定期15例，其中局限型18例，散在型8例，泛發型5例，肢端型4例。對照組20例為隨機抽取的同期在本院門診體檢的健康人員，男11例，女9例，年齡28～53歲，平均（29.14±9.31）歲。各組的性別和年齡均具有可比性。所有患者及健康對照者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 血清采集 尋常型白癜風患者確診后，未給予治療，于次日8時空腹抽取肘部靜脈血5mL，即刻離心收集血清，吸取上清液，液氮-70 ℃冷凍保存，以防血液組織溶解；相同方法收集對照組血清。

1.2.2 主要試劑 CXCL9鼠抗人單克隆抗體ELISA 檢測試劑盒及IL-22ELISA 試劑盒均購自R＆D System。Elx800型酶標檢測儀為美國BIO-TEK 公司產品。

1.2.3 檢測方法 采用ELISA 檢測血清CXCL9及IL-22含量，嚴格按照試劑盒說明書及相關實驗步驟進行操作。

1.2.4 白癜風分型 依據診斷標準依據中國中西醫結合皮膚性病專業委員會色素學組關于白癱風診斷方法進行臨床分型［4］。進展期：白斑增多，原有白斑逐漸向正常皮膚移行、擴大，境界模糊不清，易發同形反應；穩定期：白斑停止發展，境界清楚，白斑邊緣色素加深，沒有新的白斑出現。

1.2.5 尋常型白癜風患者皮損面積的測量 采用濕布取樣法［5］。濕布描記取樣后采用圖像分析軟件Image-pro plus6.0精確測量皮損面積。尋常型白癜風患者皮損面積為12.50～47.12cm2，平均（19.54±10.07）cm2。

1.3 統計學處理 采用SPSS17.0統計軟件進行分析，計量資料以±s表示，采用獨立樣本t檢驗比較實驗組和對照組CXCL9、IL-22的表達；采用單因素ANOVA 比較進展組、穩定組與對照組之間CXCL9、IL-22的表達；若方差齊，兩兩之間比較采用LSD 檢驗法。若方差不齊，組間比較則采用近似F檢驗Welch法，兩兩比較則采用Dunnttt′s T3法。CXCL9、IL-22與白癱風患者年齡、病程及皮損面積的相關性分析采用Spearman等級相關檢驗，均為雙側檢驗，檢驗水準α＝0.05。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血清CXCL9、IL-22水平比較 對照組血清CXCL9值為（639.71±139.21）pg／L，試驗組為（1 302.82±433.63）pg／L，兩者比較差異有統計學意義（P＜0.01）。對照組血清IL-22值為（26.21±8.27）ng／L，試驗組為（50.09±12.38）ng／L，兩者比較差異有統計學意義（P＜0.01）。結果見圖1、2。

圖1 兩組血清CXCL9水平比較

圖2 兩組血清IL-22水平比較

2.2 進展組、穩定組及對照組血清CXCL9、IL-22水平比較 3組血清CXCL9、IL-22水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。3組血清CXCL9與IL-22兩兩比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），其中進展組血清CXCL9和IL-22水平最高，穩定組次之，對照組最低，見表1。

2.3 相關性分析 尋常型白癜風患者血清CXCL9水平與年齡、病程及皮損面積無相關性（P＞0.05）；血清IL-22水平與年齡、病程及皮損面積也無相關性，見表2。

表1 3組血清CXCL9、IL-22水平比較

表2 尋常型白癜風患者血清CXCL9、IL-22水平 與年齡、病程及皮損面積的相關性分析

3 討 論

趨化因子是細胞因子的一個超家族。為一類結構相似、對白細胞等具有趨化作用的小分子多肽，可由樹突狀細胞、淋巴細胞、單核巨噬細胞、內皮細胞以及腫瘤細胞等多種細胞產生［6-7］。CXCL9又稱干擾素（IFN）-y誘導單核因子（Mig），是趨化因子CXC亞族的一員。CXCL9的生物活性作用證實是通過屬于G 蛋白偶聯受體超家族的CXCR3介導完成［8-9］。已證實CXCL9及其受體CXCR3 在多種疾病中發揮重要作用，包括自身免疫性疾病、慢性系統性疾病、感染、器官移植排斥反應和多種腫瘤的治療等［7］。IL-22是近年來發現的一種在急性炎癥期釋放的細胞因子，由CD4＋T 細胞分泌，起正向免疫調節作用。皮膚的上皮細胞為IL-22的主要效應細胞，IL-22可以通過刺激角質形成細胞的增殖與遷移［10］。

本研究發現，白癜風患者血清中IL-22水平高于對照組，且在白癜風進展期處于較高水平，提示患者體內處于免疫激發狀態。穩定期患者血清中IL-22明顯下降，但仍高于對照組，與文獻報道一致，推測白癜風的病程及預后與血清IL-22水平的變化存在關聯性［10］。本研究發現，尋常型白癜風患者血清CXCL9水平遠高于對照組，提示在皮膚損傷修復過程中，機體在各種損傷因子刺激作用下，分泌大量的CXCL9，使大量效應性T 淋巴細胞定向向皮損組織中遷移，引發免疫炎性反應促進白癜風皮損形成，保持白癜風的進一步發展。CXCL9在進展期白癜風患者組中的表達水平高于穩定期白癜風患者組中的表達，也提示CXCL9參與了白癜風發病的進程。表皮在微量元素變化、精神因素、微循環障礙、飲食、煙酒、藥物刺激、機械性刺激、外傷等外界誘因存在的前提下，可刺激機體表達CXCL9，后者可以趨化炎性反應因子在皮膚受損處積聚，進一步產生其他CXC類趨化因子，導致級聯效應，加重白癜風皮膚損傷。Pearson相關分析結果顯示，尋常型白癜風患者血清CXCL9水平與尋常型白癜風患者年齡、病程及皮損面積無相關性，可能與觀察病例數較少，穩定期白癜風比例較高有關。

綜上所述，尋常型白癜風病患者外周血CXCL9、IL-22的表達水平顯著升高，且與疾病分期存在關聯，提示CXCL9 及IL-22可作為尋常型白癜風病治療的靶目標。

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