細針穿刺細胞學及細胞塊技術在頸部腫大淋巴結診斷的意義

張春梁，陳水平，黃麗云，晉 雯

細針穿刺細胞學及細胞塊技術在頸部腫大淋巴結診斷的意義

張春梁，陳水平，黃麗云，晉 雯

目的探討細針穿刺細胞學聯合細胞塊技術對于明確診斷頸部腫大淋巴結的意義。方法選擇頸部腫大淋巴結病例109例行細針穿刺涂片并制備細胞塊切片，必要時行免疫細胞化學染色檢測，比較單純常規穿刺涂片與涂片聯合細胞塊切片檢查結果，分析相應技術診斷的準確性。結果109例中，單純常規細針穿刺涂片與最終診斷的符合率僅為54.1%，聯合細胞塊切片符合率為78.9%，免疫細胞化學染色檢查后符合率則達到95.4%。結論常規細針穿刺涂片聯合細胞塊切片及免疫細胞化學染色對于頸部腫大淋巴結診斷有較高的應用價值，但對于少數差分化腫瘤及惡性淋巴瘤的診斷存在一定局限性。

活組織檢查，針吸；頸；淋巴結；淋巴瘤；淋巴轉移；免疫組織化學；染色與標記；細胞診斷學

細針穿刺細胞學（fine needle aspiration cytology，FNAC）通過細針穿刺、負壓吸取采集病變部位細胞標本，觀察人體組織的腫瘤及非腫瘤性病變。由于FNAC技術具有簡單、快捷、經濟、患者痛苦少等優點，在臨床病理診斷中已被廣泛應用［1］。

臨床上頸部淋巴結腫大是常見癥狀之一，因其位置表淺，所以常成為患者首發的臨床癥狀，甚至是唯一的臨床癥狀（例如鼻咽癌）。淋巴結腫大病因較復雜。完整淋巴結外科手術活檢行病理學診斷被認為是臨床淋巴結病變確診最可靠、準確的手段，但是有創傷并有一定危險性；淋巴結粗針穿刺認為是可信賴的檢查方法；細針穿刺則認為在淋巴結腫大患者初次就診時最有效的檢查方法，特別是它在免疫細胞化學染色檢查的支持下［2］。現回顧性分析筆者科室2010年1月－2013年8月頸部腫大淋巴結細針穿刺109例病例的資料，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 109例中，男性60例，女性49例，年齡（49.44±13.20）歲（16～84歲）。行常規細針穿刺涂片并制備細胞塊切片，必要時行免疫化學染色檢查。所有病例均經淋巴結粗針穿刺或活檢、手術標本病理檢查、隨訪追查病史證實。

1.2 方法 穿刺前了解患者病史，明確淋巴結的大小、質地、深度、活動度及與周圍血管（頸動脈）的關系，并向患者解釋細針穿刺的危險性及局限性。

穿刺時患者選臥位或坐位，選定合適的穿刺點，常規消毒，左手固定淋巴結，右手持持針器（內固定7號針頭、10mL一次性注射器）刺入淋巴結，4～5mL負壓下，在淋巴結內變換方向快速抽吸，吸取足夠標本后解除負壓退針。將采集的樣本均勻涂于玻片上，分別行DQ染（Diff-Quick stain）及蘇木精一伊紅染色法（H-E染色），光學顯微鏡觀察細胞形態。

細胞涂片顯微鏡下閱片為陽性涂片后，如診斷或臨床治療需要可再次穿刺收集足量標本，拔針后將吸取物注入含有生理鹽水的10mL離心管內，以2 500r／min離心10min，吸去上清液，輕輕刮動細胞塊，包裹、常規脫水、石蠟包埋、切片、H-E染色，觀察其形態學變化，必要時行免疫細胞化學染色檢查。

細胞塊制作、切片及免疫化學染色均由病理技術人員專人操作，穿刺、閱片均由同一位病理醫師進行，并經上級病理醫師復核。

1.3 統計學處理 數據采用SPSS 11.5軟件進行統計分析，選擇χ2檢驗，P＜0.05為差別具有統計學意義。

2 結 果

109例中，常規細針穿刺涂片聯合細胞塊切片及免疫化學檢測最終確診104例，5例無法確診（表1）。不同方法檢測結果比較見表2。

2.1 淋巴結肉芽腫性炎癥 共10例，其中8例通過常規涂片細胞學觀察明確診斷，其余2例制備細胞塊，切片可見典型慢性肉芽腫或伴有郎罕氏巨細胞、干酪樣壞死，亦可明確診斷。

2.2 淋巴結轉移性癌 差分化癌2例無法明確類型。

2.2.1 淋巴結轉移性鱗狀細胞癌 28例中，12例常規涂片鏡下即可明確為鱗狀細胞癌；10例細胞塊需要切片后可明確診斷，6例需要行免疫化學染色（P63、CK5／6等）檢查后確診為鱗狀細胞癌。

表1 頸部淋巴結細針穿刺診斷結果與組織學診斷結果Tab 1 FNAC and histology diagnosis result of the swelling cervical lymph nodes

表2 不同方法檢測結果比較Tab 2 Comparison of detection results from different methods

2.2.2 淋巴結轉移性腺癌 59例中，35例經常規涂片；15例聯合細胞塊切片；9例需經免疫化學染色（CK8／18、TTF-1、CK7、CK20、Villin等）明確為腺癌。

2.2.3 淋巴結轉移性小細胞癌 共3例，均經細胞塊切片及免疫化學染色檢查（CD56、NSE、CgA等）后最終明確診斷。

2.2.4 淋巴結轉移性差分化癌 共2例，經細胞塊切片及免疫化學染色檢查最終只能明確淋巴結轉移癌，仍未能明確腫瘤的具體類型。

2.3 淋巴瘤 共7例，其中4例為淋巴瘤復發，常規涂片即可明確淋巴瘤，收集標本細胞塊制片及免疫化學染色檢查最終符合原淋巴瘤分型；其余3例涂片為疑似淋巴瘤病例，后續檢查仍未明確淋巴瘤診斷。

3 討 論

與淋巴結組織病理學檢查比較，淋巴結細針穿刺技術最主要的爭論在于淋巴結組織學結構的缺乏［2］，不利于疾病的診斷，特別是腫瘤的分型。細胞塊切片技術的應用正是為了減少細胞病理學和組織學之間的差異發展起來的［3］，其介于細胞學和組織學過渡階段，形態接近于組織病理學。將淋巴結剩余的穿刺標本制備成細胞塊的主要目的就是最大限度提高對細胞穿刺標本的利用價值，集合有限量的細胞和組織碎片，聯合常規和輔助的檢測項目，盡量發掘在細胞塊上可以應用的檢測方法［4］。

細胞塊常規切片可以盡可能地保留病變的組織學結構，在某種程度上彌補單純細胞學涂片的不足，提高診斷的準確性，甚至可以明確腫瘤的具體分型。本組中，單純常規細針穿刺涂片與最終診斷的符合率為54.1%，聯合細胞塊切片符合率為78.9%，符合率提高了24.1%，差別有統計學意義（P＜0.01）。此外，細胞塊可以連續切片后行免疫化學染色檢查，通過對其染色結果的判定，有助淋巴結病變（特別是腫瘤）性質、分型的判定。本組中，行免疫化學染色檢查后符合率大幅度提高，符合率為95.4%，差別有統計學意義（P＜0.01）。

Wright等通過比較細針穿刺細胞學、熒光染色、抗酸染色和結核菌培養4種診斷結核病的方法，得出細針穿刺細胞學診斷結核具有快速、準確等優點，診斷敏感性78%，特異性91%，是首選診斷淋巴結結核病的方法［5］。本組中，淋巴結肉芽腫性炎癥診斷符合率100%，顯示細針穿刺的準確性。

針對淋巴結轉移癌的病例，常規涂片及細胞塊切片、相應的多個抗體聯合檢測，基本可明確診斷，部分病例可以初步判定其原發部位，指導臨床尋找原發灶。在實際工作中，癌型特征較明顯時可以分型，如果細胞分化不好，特征不明顯時，可以提示臨床傾向何種類型以供參考，不能勉強分型以免影響患者治療［6］。

淋巴結細針穿刺如果沒有足夠的組織標本支持，淋巴瘤很難明確診斷［7］。即使針對有懷疑的病例需收集足夠多的標本制備細胞塊，但由于淋巴瘤診斷的復雜性及細針穿刺的局限性，細胞塊切片仍然很難清晰觀察淋巴結組織結構的改變，明確淋巴瘤的診斷，尤其是淋巴瘤分型仍然很困難，特別是非霍奇金T細胞淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤［2］。但隨著免疫化學和分子病理學發展，基因檢測應用逐漸增多，淋巴結FNAC的淋巴瘤診斷將可逐漸達到細胞形態、免疫表型、基因表型的準確分型［8］。

盡管淋巴結細針穿刺常規細胞學觀察聯合細胞塊切片技術明顯提高了淋巴結病變診斷的準確性，但是誤診、漏診仍然存在，特別是差分化癌及淋巴瘤。本組中有2例差分化癌及3例淋巴瘤無法確診。

細針穿刺廣泛應用于臨床，但傳統的單純細胞學涂片檢查準確率不是很滿意，使其在現代醫學診斷中的價值受到懷疑，因此要更好地拓展這項技術，需在傳統細胞學涂片的基礎上聯合細胞塊切片、免疫化學染色的檢測。為了進一步提高診斷的準確性，還須注意以下幾點：（1）密切聯系臨床及其他輔助檢查資料；有必要時，可借助B超、CT檢查等進行定位；（2）患者既往史及現病史十分重要，需要詳細詢問。本組1例反復咳嗽、咳痰，以肺部感染收入院，體檢發現右側頸部上段結節，后詳細詢問病史，患者3月前出現鼻涕中帶少許血絲，細針穿刺考慮右側頸部淋巴結轉移性惡性上皮性腫瘤，傾向鱗狀細胞癌，后行鼻咽活檢為鼻咽非角化癌。（3）行細針穿刺及涂片制作時，應由經驗豐富，穿刺技術熟練的醫師操作；應由經驗豐富且受過細胞學診斷專業培訓的病理醫師進行閱片；（4）積極開展細胞塊及免疫組織化學染色、流式細胞儀等在細胞穿刺診斷中的應用。

［1］馬青松，陳 冰，王 敏，等.細針吸取細胞塊與細針吸取細胞學聯合應用對涎腺腫瘤的診斷價值［J］.中華實用診斷與治療雜志，2009，23（9）：870-872.

［2］Georgia M，Sven S，Christoph W，etal.Fine needle aspiration and core needle biopsy in the diagnosis of lymphadenopathy of unknown aetiology［J］.AnnHematol，2012，91：1477-1484.

［3］王 超，周小鴿，余小蒙.細胞塊免疫細胞化學和原位雜交在針吸細胞學中應用［J］.臨床與實驗病理學雜志，2006，22（1）：96-97.

［4］陳光勇，余小蒙.介紹一種細針吸取標本的細胞塊制作方法［J］.中華病理學雜志，2011，40（8）：558-559.

［5］Wright CA，vanderBurg M，Geiger D，etal.Diognosing mycobacterial lymphadenitis in children usin fine needle aspiration biopsy：Cytomor-Phology，ZN staining and autofluorescence making more of less［J］.DiagnCytopathol，2008，36（4）：245-248.

［6］聞春艷，張文杰，張麗榮.頸部淋巴結轉移癌146例細胞學分析［J］.吉林醫學，2011，11（31）：6638-6639.

［7］Yorihisa Q，Soichiro N，Yasuharu S，etal.Cervical lymph node extirpation for the diagnosis of malignant lymphoma［J］.Surg Today，2013，43：67-72.

［8］Jan I S，Chung P F，Weng MH，etal.Analysis of fine needle aspiration cytology of the salivary gla［J］.JFormosMedAssoc，2008，107（5）：364-370.

（編輯：張慧茹）

Diagnostic Significance of the Fine Needle Aspiration Cytology and Cell Block Technology in Cervical Lymphadenopathy

ZHANG Chunliang，CHEN Shuiping，HUANG Liyun，JIN Wen
Department of Pathology，Basic Medical Sciences，Fujian Medical University，Fuzhou 350108，China

ObjectiveTo explore the diagnostic significance of combined use of the fine needle aspiration cytology（FNAC）and cell block technique（FNACB）in the cervical lymphadenopathy.Methods109cases of cervical lymphadenopathy were examined by combined FNAC and FNACB as well as immunocytochemistry（ICC）when necessary，and compared with FNAC only to analyze the diagnostic accuracy.Results The diagnostic accuracy of FNAC，FNAC＋FNACB，and FNAC＋FNACB＋ICC was 51.4%，78.9%and 95.4%，respectively.ConclusionFNAC combined with FNACB and ICC is of higher diagnostic value but has some limitations in accurate diagnosis of poorly differentiated carcinomas and malignant lymphoma.

biopsy，needle；neck；lymph nodes；lymphoma；lymphatic metastasis；immunohistochemistry；staining and labeling；cytodiagnosis

R322.25；R323.1；R446.8；R733.4；R730.26

A

1672-4194（2014）01-0054-03

2013-10-31

福建醫科大學 基礎醫學院病理學系，福州 350108

張春梁（1978－），男，助教

晉 雯.Email：jinwen9484＠163.com