溫 鋼,叢學琦
(吉林化工學院生物工程技術系,吉林吉林132022)
十二烷基苯磺酸鈉(sodium dodecyl benzene sulfonate.簡稱SDBS)作為一種陰離子表面活性劑,被廣泛用于合成人工洗滌劑,是人工洗滌劑主要有效成分[1].隨著人工洗滌劑使用范圍的擴大和使用量的增加,使SDBS可通過多種渠道進入環境中,造成了嚴重的環境污染.目前,學者們對SDBS的致畸性和致癌性的觀點不一,但是可以肯定的是,SDBS攝取過量對生物來說有一定毒性[2-4].生物降解法能夠完全降解環境中的SDBS,因此利用微生物來處理含SDBS污水是目前較實用的一種方法[5].本研究以SDBS作為唯一碳源,通過對松花江龍潭橋排污口污泥進行篩選和分離,得到了兩株能以SDBS為唯一碳源生長的菌株MB3和MB4菌株,并對其降解特性進行研究.
吉林市龍潭橋下生活污水排污口
(1)富集培養基
MgSO4·7H2O 0.14 g,FeSO4·7H2O 0.000 5 g,K2HPO40.33 g,KCl 0.06 g,酵母膏 1.2 g,SDBS 0.025 g,pH 7.0.
(2)篩選培養基
MgSO4·7H2O 0.14 g,FeSO4·7H2O 0.000 5 g,K2HPO40.33 g,KCl 0.06 g,酵母膏 1.2 g,SDBS 0.05 g,瓊脂 15 g,pH 7.0.
(3)發酵培養基
MgSO4·7H2O 0.14 g,FeSO4·7H2O 0.000 5 g,K2HPO40.33 g,KCl 0.06 g,酵母膏1.2 g,SDBS 濃度視情況而定,pH 7.0.
(1)菌種的富集
1 g污泥加入10 mL無菌水中,搖勻,制成10%的菌懸液.用移液槍吸取1 mL菌懸液加入99 mL富集培養基中,30℃、140 r/min搖床培養3 d.
(2)菌株的篩選
用稀釋法對富集后的菌液依次進行稀釋,將濃度為10-6、10-7、10-8的稀釋液分別涂布于篩選培養平板上,30℃培養5 d后,挑取生長旺盛的單菌落于篩選培養平板中反復劃線,對菌株進行純化,然后接種于斜面保存.
(3)菌體生長量的測定
菌株接種于發酵培養基中,SDBS的濃度為100 mg/L,30℃、140 r/min搖床培養,用分光光度計測定460 nm處的OD值[7].
(4)SDBS降解率測定
采用亞甲藍分光光度法[8].
(5)菌株SDBS最高耐受濃……