三種HIV抗體檢測初篩方法與確證方法的比對

何秋陽 楊紅櫻 云南省大理州第一人民醫(yī)院檢驗科 671000

艾滋病（Acquired immuno deficiency syndrome，AIDS）是由人類免疫缺陷病毒（Human immuno deficiency virus，HIV）感染引起的獲得性免疫缺陷綜合征，是一種嚴重危害人類健康的傳染性疾病，當前我國HIV流行呈逐年上升的趨勢，在一些高危人群中尤為嚴重。其傳播途徑有3條：性接觸傳播、血液傳播和母嬰傳播。

血液傳播途徑與臨床輸血和接受血液制品等相關(guān)，為了預(yù)防醫(yī)源性感染，了解患者接受血液、血液制品前和術(shù)前的HIV感染情況，筆者對患者輸血、血液制品前和術(shù)前血清樣本用ELISA法進行HIV抗體篩查，對陽性標本進行兩種金標法測定，同時隨機抽取30例陰性對照標本也進行兩種金標法測定。對陽性標本和對照標本送檢HIV確證實驗室用WB法進行確證實驗，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 標本 2009年1月－2010年12月我院輸血或手術(shù)患者的標本43 800例分離血清后用ELISA法檢測HIV抗體，初篩陽性228例，另隨機抽取30例陰性結(jié)果的標本。

1.2 試劑 HIV ELISA試劑盒（珠海麗珠試劑股份有限公司提供），膠體金試劑（上海科華生物工程股份有限公司提供），膠體硒試劑（美國雅培公司生產(chǎn)）。

1.3 儀器 Muhiskan MK3酶標儀和洗板機為熱電上海儀器有限公司生產(chǎn)。

1.4 試驗方法 用抗－HIV ELISA法檢測全部標本，對陽性標本再用兩種金標法復(fù)檢，三種檢測結(jié)果只要有一種為陽性，均判為初篩陽性，獲陽性血清228份，隨機抽取30例陰性結(jié)果的標本用兩種金標法檢測，并送檢此258份血清至云南省大理州疾病預(yù)防控制中心的HIV確證實驗室進行確證實驗。以上各項試驗操作及結(jié)果判讀均嚴格按操作規(guī)程和試劑說明書進行，所有試劑均在有效期內(nèi)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用Excel2003軟件進行數(shù)據(jù)整理，采用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

確認結(jié)果陽性即認為感染HIV病毒，陰性即認為未感染，在此基礎(chǔ)上得出ELISA法和兩種金標法的真實性指標（見表1）。ELISA法無漏檢作為初篩批量檢測方法是一種較好的方法，但其特異性為98.84%略低于兩種金標法，兩種金標法與確證方法的符合率都很高，可達到99.22%，科華無金標漏檢，雅培金標漏檢率為5.7%（見表2），用金標法對其陽性標本進行復(fù)查，可以得出與確證方法相近的結(jié)果，與馬金旗報道的基本一致。

表1 258例ELISA法、兩種金標法和確證法檢測結(jié)果分布情況

表2 ELISA、兩種金標法與確證方法的符合率（%）

3 討論

抗－HIV檢測是一項較為特殊的檢測，會涉及患者隱私、工作人員的職業(yè)防護和暴露的評估、國家傳染病防治等許多方面。出現(xiàn)假陽性會給患者造成巨大的精神壓力，甚至?xí)疳t(yī)療糾紛，假陰性會漏檢感染者，不利于早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，早控制病情。HIV無癥狀感染期可長達6個月～10年，最后發(fā)展為艾滋病，出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多器官、多系統(tǒng)損害，合并各種條件致病菌、寄生蟲、其他病毒感染，或并發(fā)腫瘤等。5年死亡率約為90%，死亡多發(fā)生在出現(xiàn)臨床癥狀的2年之內(nèi)。血液傳播途徑與臨床輸血和接受血液制品輸注相關(guān)，如果輸入被HIV感染獻血員的血液或血制品可能會感染HIV，即輸血感染HIV，為了區(qū)分是輸血或血液制品前還是進行輸血、血液制品等診療活動后導(dǎo)致的醫(yī)源性感染，患者進行輸注等診療活動前應(yīng)做抗－HIV抗體的檢測，這樣既可以保護相關(guān)工作人員，也可以減少醫(yī)療糾紛，維護醫(yī)院利益，還可以早發(fā)現(xiàn)感染患者，以便治療及控制疫情。選擇敏感性、特異性都高的檢測方法有助HIV感染的診斷和防治，HIV抗體的檢測是最主要的檢查方法，也是疾病預(yù)防控制中心規(guī)定的初篩實驗室的檢測方法。抗－HIV ELISA法特異性、敏感性都較高，特別適合批量標本的檢測，可以作為臨床大批量標本HIV抗體的初篩試驗；金標法不僅特異性、敏感性高，而且操作簡便、快速，不需要其他醫(yī)療設(shè)備，試劑便于保存（一般室溫保存），每人份試劑均進行獨立包裝，且每人份均帶有質(zhì)控帶，非常適合于標本量少、醫(yī)療設(shè)備匱乏的基層醫(yī)院的檢測，對ELISA法檢測出的陽性標本進行復(fù)檢，能較快確認標本HIV陽性可能性，評估職業(yè)暴露的風(fēng)險程度。兩種方法可相互結(jié)合，及時對患者做出診斷，及早采取措施保護職業(yè)暴露人員。任何一種試劑都有窗口期，不可能100%特異性和敏感度，檢測的同時應(yīng)進行自愿咨詢，有接觸史和高危人群，一次檢測陰性情況下，用不同試劑應(yīng)在6～18個月之間進行多次隨訪檢測，爭取做到早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，盡量減少漏檢率。

［1］ 陳焱，陳曦.湖南省艾滋病流行現(xiàn)狀與流行趨勢分析〔J〕.實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2005，6：42－44.

［2］ 劉競，劉鳳霞，馬金旗.受血者輸血前血液傳染指標檢測及自知率調(diào)查的意義〔J〕.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2003，13（6）：78－79.

［3］ 中國疾病預(yù)防控制中心.全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范〔S〕.（出版單位不詳），2009：5－18.

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［7］ 張卓然，倪語星.臨微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗〔M〕.第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1988：396－397.