乳腺浸潤性導管癌患者癌組織c-Met蛋白的表達及病理意義

謝小麗

湘潭市湘鋼醫(yī)院，湖南湘潭 411101

目前全球乳腺癌發(fā)病率一直呈上升趨勢，近年我國乳腺癌發(fā)病率的增長速度明顯高于發(fā)達國家，國內腫瘤登記地區(qū)乳腺癌發(fā)病率位居女性惡性腫瘤的第1 位。c-Met 蛋白是由c-Met 原癌基因編碼的一種蛋白產物，研究顯示c-Met 蛋白參與細胞色素細胞信號傳導和骨架重塑，其與腫瘤細胞的增殖分化、浸潤轉移以及血管生長有密切關系[1]。國外有學者研究顯示在多種腫瘤的發(fā)展和轉移過程中，均可見c-Met 蛋白的過度表達和基因擴增[2]。本文筆者選擇本院近年收治的乳腺浸潤性導管癌患者，采用免疫組化法研究c-Met 蛋白的表達與乳腺癌病理特征的關系，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2008年1月—2013年5月本院乳腺浸潤性導管癌患者78例的臨床病理標本，全部患者均為女性，年齡31～62歲，平均45.5±3.8歲。其中腫瘤直徑＜2 cm 16例，腫瘤直徑2～5 cm 54例，腫瘤直徑＞5 cm 8例；TNM 分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期46例；Ⅲ期16例，Ⅳ期4例；病理分級：Ⅰ級13例，Ⅱ級45例，Ⅲ級20例；出現(xiàn)淋巴轉移40例，無淋巴轉移38例。

1.2 方法

全部石蠟病理切片首先進行脫蠟及水化處理，微波法修復抗原，室溫下滴加抗原修復液10 min，然后滴加正常山羊血清封閉液20 min，甩去多余液體，不洗。然后滴入美國Zymed 公司生產的兔抗人c-Met 多克隆抗體，在37 ℃下孵育30 min 后放入冰箱12 h，設置冰箱溫度為4 ℃；然后取出切片復溫后，每張切片滴加二抗50μL，在37℃下再次孵育40 min，孵育完成后，洗滌并采用蘇木素襯染，最后于顯微鏡下觀察蛋白表達情況。

1.3 觀察方法

每張切片選擇3 個高倍視野進行腫瘤細胞計數(shù)，并統(tǒng)計每張切片的陽性細胞率及陽性細胞染色強度，陽性細胞以胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒狀染色為標準。c-Met 蛋白表達情況以陽性細胞百分比及染色強度評分進行判定，具體評分方法參考文獻[3]，無色0 分，淺黃1 分，深黃2 分，棕黃色3 分；染色強度評分×陽性細胞百分比結果大于1 為。c-Met 蛋白表達陽性，結果≤1 為c-Met 蛋白表達陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用Excel2003 錄入，以SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用Fisher 確切概率法或Pearson χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

本組78例患者病理標本中，34例c-Met 蛋白陽性，占43.6%。c-Met 蛋白在不同腫瘤大小及病理分級Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級乳腺癌組織中表達陽性率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；c-Met 蛋白在有淋巴結轉移及TNM 分期Ⅲ—Ⅳ期乳腺癌組織中表達陽性率明顯高于無淋巴轉移及TNM Ⅰ—Ⅱ期乳腺癌組織，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。具體見表1。

3 討論

c-Met 為肝細胞生長因子受體，具有酪氨酸激酶活性，c-Met位于人體七號染色體的長臂上，包含21 各外顯子，其中有許多細胞生長調控序列[4]。c-Met 在不同細胞或細胞不同分化階段其具體功能不同，主要功能有促進肝細胞、內皮細胞的分裂，誘導細胞形態(tài)改變，在胚胎發(fā)育過程中控制細胞的移動。c-Met 蛋白是由c-Met 原癌基因編碼的一種蛋白產物，c-Met 基因及c-Met 蛋白參與調控腫瘤細胞的增殖分化和轉移，國外有學者研究顯示在多種腫瘤的發(fā)展和轉移過程中，均可見c-Met 蛋白的過度表達和基因擴增，并且c-Met 蛋白的高表達很可能是c-Met 基因擴增、轉錄增強的結果[5]。研究顯示c-Met 的激活是癌癥的發(fā)展的一個重要因素，c-Met 主要通過與肝細胞生長因子結合導致自身受體磷酸化，從而激活酪氨酸，進一步導致多種生長因子底物蛋白質酪氨酸磷酸化，促進組織生長；而多種腫瘤組織中c-Met 與肝細胞生長因子均呈現(xiàn)高表達狀態(tài)，對多種生長因子形成正反饋促進作用，促進腫瘤組織生長和侵襲[6]。

表1 c-Met 蛋白在不同病理特征乳腺癌組織中的表達情況[n（%）]

大量研究顯示多種腫瘤組織細胞（如乳腺癌、甲狀腺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌等）的生長與c-Met 的高表達有密切聯(lián)系[7]；本文中乳腺癌患者c-Met 蛋白陽性表達率為43.6%，并且c-Met 蛋白陽性率與腫瘤大小及病理分級無明顯關系，但隨著淋巴轉移及腫瘤分期的增高，乳腺癌組織中c-Met 蛋白陽性率呈正向升高趨勢，證實在乳腺癌中c-Met 表達與腫瘤轉移及進展有關，與文獻報道相符。鑒于c-Met 在腫瘤發(fā)展中的作用，通過干預c-Met 表達來抑制腫瘤患者癌腫轉移、復發(fā)成為腫瘤研究的新方向。目前已近有學者研究證實通過miR-340 靶向抑制c-Met 可抑制乳腺癌細胞的遷移和侵犯[8]，但是其在改善患者生存率方面的效果還需要進一步研究

綜上所述，本研究提示，c-Met 蛋白的表達在乳腺癌的侵襲和轉移中有重要作用，提示臨床通過檢測或干預c-Met 蛋白表達來判斷乳腺的發(fā)生、發(fā)展和患者預后情況，也為乳腺癌治療提供了新的方向。

[1]劉濤,馮雪華,任志國,等.c-Met 在乳腺癌組織中的表達及其臨床價值[J].外科理論與實踐,2011,16(1)：42-44.

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[8]Wu ZS，Wu Q，Wang CQ，et al.miR-340 inhibition of breast cancer cell migration and invasion through targeting of oncoprotein c-Met[J].Cancer，2011，117：2842-2852.