李 蘭,雷曉冬
(河南科技學院 生物工程系,河南 新鄉 453003)
淀粉酶活性常量與微量測定方法比較
李 蘭,雷曉冬
(河南科技學院 生物工程系,河南 新鄉 453003)
以實驗室保存的淀粉酶產生菌枯草芽孢桿菌為出發菌株,經過平板分離、點種、碘熏蒸,篩選出產淀粉酶活力較高的菌株。本實驗重點采用常量測定法和微量測定法對酶活性進行測定,并對所得數據進行比較分析,結果顯示,兩種方法測定的酶活性差異不明顯,說明微量測定法是可以代替常量測定法的。
枯草芽孢桿菌;淀粉酶;DNS;常量測定;微量測定
淀粉酶是水解淀粉和糖原酶類的統稱,能夠水解淀粉分子,生成包括糊精在內的不同水解產物,并逐步生成由葡萄糖單位組成的聚合物。微生物的許多種類都能產生淀粉酶,枯草芽孢桿菌是其中主要生產菌種之一。淀粉酶是最早實現工業化生產,迄今為止用途最廣、產量最大的酶制劑品種。特別是20世紀60年代以來,由于酶法生產葡萄糖以及用葡萄糖生產異構糖漿的大規模工業化,淀粉酶的需要量越來越大,幾乎占到整個酶制劑總產量的50%。目前淀粉酶被廣泛應用于多個領域,因此,做好淀粉酶活性測定工作具有重要意義。
測定α-淀粉酶活性的方法有分光光度法、應交擴散法、3,5-二硝基水楊酸法、黏度計法和降落值法。目前,3,5-二硝基水楊酸法是最常用的方法。在大多數測定淀粉酶的實驗和標準中,都是采用常規的方法和步驟,試劑用量較大,且操作過程不夠簡便。……