楊梅種質(zhì)資源對凋萎病抗性評價

張振蘭，朱瀟婷，任海英，戚行江*，鄭錫良，梁森苗，顏麗菊

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所，浙江杭州 310021；2.臨海市特產(chǎn)技術(shù)推廣總站，浙江臨海 317000）

楊梅種質(zhì)資源對凋萎病抗性評價

張振蘭1，朱瀟婷2，任海英1，戚行江1*，鄭錫良1，梁森苗1，顏麗菊2

（1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所，浙江杭州 310021；2.臨海市特產(chǎn)技術(shù)推廣總站，浙江臨海 317000）

為了解部分楊梅種質(zhì)資源對凋萎病的抗性情況，利用2個不同種的凋萎病菌株，對32份楊梅種質(zhì)資源進行枝條離體接種鑒定。結(jié)果表明，接種后不同種質(zhì)資源的發(fā)病率和嚴重度均表現(xiàn)出豐富的多樣性。62.5%的紅梅類和28.57%的烏梅類種質(zhì)材料具有高抗病性。楊梅種質(zhì)材料對病菌越敏感，一般潛伏期越短，發(fā)病率越高。高感品種3～8 d就表現(xiàn)出嚴重病癥，高抗品種大多數(shù)超過10 d才有輕微癥狀出現(xiàn)。綜合評價臨海苗圃內(nèi)的種質(zhì)材料，高抗凋萎病的有紅梅類的深紅種、安海變種、桃紅、松山大野、松山水梅、大葉早、涌泉1號、涌泉3號等8個，烏梅類的硬絲安海變、黑瑞林等2個，上虞水晶楊梅以及1個開紅花的雄株。

楊梅種質(zhì)資源；凋萎??；抗性評價

楊梅凋萎病是浙江省楊梅果園近幾年大面積發(fā)生的病害，發(fā)病后2～3年就引起樹體死亡，對楊梅產(chǎn)業(yè)造成較大威脅［1］。鑒定結(jié)果表明，楊梅凋萎病的病原菌是異色擬盤多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和小孢擬盤多毛孢（P.microspora）［1］，該病菌對環(huán)境及營養(yǎng)元素的適應(yīng)性較廣［2-3］，雖然室內(nèi)篩選到的農(nóng)藥毒力效果較好，但果園內(nèi)應(yīng)用的防效卻并不理想［4］。目前浙江省主栽品種東魁較易感病，荸薺種則較抗病［5］，更有效的防治技術(shù)及果實品質(zhì)優(yōu)的抗病品種有待推廣。

抗病育種一直是果樹科學(xué)研究中的重要內(nèi)容［6-10］。蘋果［11-12］、梨［13］和葡萄［14］等的抗病性評價為抗病育種提供了指導(dǎo)。本研究就農(nóng)業(yè)部在浙江臨海楊梅種質(zhì)資源圃內(nèi)樹體較大的32個種質(zhì)資源進行了凋萎病的抗性評價，旨在對楊梅抗性育種提供指導(dǎo)。

1 材料和方法

接種用的楊梅凋萎病病原菌為強致病力菌株XJ27和YS26［1］。將分生孢子用滅菌清水配成2× 105個·m L-1的分生孢子懸浮液［4］。供試楊梅種質(zhì)資源共32份，來源于浙江臨海楊梅種質(zhì)資源圃。2013年4月末取上述種質(zhì)資源直徑為0.6～0.9 cm的1年生枝條，去掉基端后截成長度為30 cm的枝段。每份資源以1根枝段為1個處理，重復(fù)9次。每根枝段在離頂端5 cm處小心去除葉片1枚，在葉痕位置接種分生孢子懸浮液20μL，以滅菌的清水接種作為對照，棉花吸水保濕，保鮮膜輕輕纏繞。接種后的枝段放250 m L三角瓶內(nèi)用自來水培養(yǎng)，然后套塑料袋保濕48 h。置于25℃培養(yǎng)箱內(nèi)飽和濕度下恒溫培養(yǎng)。從接種當日起，每日調(diào)查枝段上葉片干枯或掉落占總?cè)~片的數(shù)量，調(diào)查15 d。

根據(jù)所記錄的發(fā)病日期和每日的病情級數(shù)，分別計算潛伏期（枝條接種病菌到病癥出現(xiàn)的天數(shù)）和病情指數(shù)。病情指數(shù)（DI）=∑（病級枝數(shù)×該級代表數(shù)值）×100/（調(diào)查總枝數(shù)×發(fā)病最高1級代表數(shù)值）。

楊梅種質(zhì)凋萎病抗病性分級標準。0級沒有葉片干枯或者掉落，1級枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)≤10%，3級枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞10%～25%，5級枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞25%～50%，7級枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞50%～75%，9級枝段上葉片干枯或者掉落占總?cè)~片數(shù)＞75%～100%。

病情級數(shù)調(diào)查按分級標準劃分等級。依據(jù)接種15 d后的病情指數(shù)評價不同種質(zhì)資源的抗性。高抗（HR），0≤DI≤15；抗?。≧），15＜DI≤35；中抗（MR），35＜DI≤55；感?。⊿），55＜DI≤75；高感（HS），75＜DI≤100。

2 結(jié)果與分析

2.1 果實顏色不同的種質(zhì)資源的抗病性差異

圖1 紅梅類和烏梅類楊梅種質(zhì)的抗性比例

圖1 顯示，綜合分析XJ27和YS26菌株的抗性情況，紅梅類的種質(zhì)材料為62.5%高抗；高感材料占12.5%；抗病、中抗和感病材料比例接近，為6%～10%。與紅梅類相比，烏梅類的種質(zhì)材料抗性分布較均勻，中抗材料最多，占39.29%，高抗和抗病材料分別占28.57%和21.43%，感病和高感材料占3.5%～7.5%。

2.2 不同種質(zhì)資源對不同菌株的抗病性差異

從圖2結(jié)果顯示，62.5%的紅梅類材料對2個菌株都是高抗病性，6.25%的紅梅類材料對2個菌株都是感病性。紅梅類種質(zhì)材料對XJ27的抗病和中抗的數(shù)量顯著少于對YS26的抗病和中抗材料，減少6.25個百分點，對XJ27的高感材料數(shù)量顯著多于對YS26的高感材料，增加12.5個百分點。28.57%烏梅類種質(zhì)材料對2個菌株表現(xiàn)高抗，21.43%的烏梅類種質(zhì)材料對2個菌株表現(xiàn)抗病。50%的烏梅類材料對XJ27表現(xiàn)中抗，但沒有感病和高感材料，28.57%的烏梅類材料對YS26表現(xiàn)中抗，感病和高感材料分別占7.14%和14.29%。

圖2 對2種凋萎病菌株抗性不同楊梅比例

從表1結(jié)果可以看出，16個紅梅類材料有12個材料對異色擬盤多毛孢菌株XJ27和小孢擬盤多毛孢菌株YS26的抗性表現(xiàn)完全一致，占總材料數(shù)的75%。14個烏梅類材料中，6個材料對2個菌株的抗性表現(xiàn)完全一致，占材料總數(shù)的42.9%。

2.3 不同抗性材料潛伏期差異

一般楊梅種質(zhì)材料對病菌越敏感，則潛伏期越短。表1表明，高感品種3～8 d就表現(xiàn)出嚴重病癥，敏感品種3～10 d表現(xiàn)出嚴重病癥，中抗品種4～10 d表現(xiàn)出較嚴重病癥，個別12 d才表現(xiàn)出較重病癥，抗性品種3～8 d表現(xiàn)出較輕的病癥，高抗品種多數(shù)都超過10 d才有輕微癥狀表現(xiàn)出來。上虞水晶在7 d時表現(xiàn)輕微癥狀。

2.4 不同抗性材料發(fā)病率差異

一般楊梅種質(zhì)材料對病菌越敏感，則發(fā)病率越高。表1表明，高感品種發(fā)病率均為100%，敏感品種發(fā)病率66.7%～100%，中抗品種發(fā)病率33.3%～66.7%，其中早大梅對YS26菌株是中抗，但發(fā)病率100%；抗性品種發(fā)病率25%～66.7%，高抗品種少數(shù)發(fā)病率在33.3%～66.7%，多數(shù)無病癥表現(xiàn)。其中三門桐子梅和上虞水晶雖是高抗材料，但發(fā)病率均為100%，說明這2個材料是高度抗病菌擴展材料。

2.5 抗病性綜合評價

表1顯示，綜合評價臨海苗圃內(nèi)種質(zhì)材料的抗性，紅梅類種質(zhì)高抗材料有深紅種、安海變種、桃紅、松山大野、松山水梅、大葉早、涌泉1號、涌泉3號等8個品種，抗病品種有蕭山早色種，中抗品種有蕭山遲色，高感材料有東魁，敏感品種有荔枝梅種。烏梅類的種質(zhì)高抗材料有硬絲安海變和黑瑞林2個品種，抗病品種有余杭金錢炭梅，中抗品種有荸薺種、晚稻楊梅、小葉細蒂等3個品種，沒有對2個菌株都敏感或高度敏感的品種。上虞水晶楊梅對2個菌株都表現(xiàn)高度抗性，1個開紅花的雄株對2個菌株也表現(xiàn)高抗。

表1 楊梅種質(zhì)資源凋萎病抗性綜合評價

3 小結(jié)和討論

試驗表明，紅梅類和烏梅類都有高抗品種，在未來育種工作中可考慮加以利用。高感而品質(zhì)優(yōu)良的品種可考慮與高抗品種搭配種植，利用生物多樣性進行病害預(yù)防。

浙江臨海苗圃的紅梅類和烏梅類楊梅種質(zhì)對2個病原菌菌株的抗性類型數(shù)量差異較大，紅梅類高抗和高感的比例大約是烏梅類的2倍，而烏梅類抗和中抗的材料較多。江蘇東山楊梅苗圃由于多數(shù)植株較小，且未提供足夠的鑒定材料，而福建提供的種質(zhì)沒有完善的保存苗圃，材料也有限，兩地種質(zhì)材料的鑒定結(jié)果不能保證足夠的重復(fù)性，所以本文予以省略。完善的楊梅種質(zhì)資源的記錄和保存工作有待加強，以后研究者將繼續(xù)收集和補充其他一些楊梅種質(zhì)的凋萎病抗性鑒定結(jié)果。

當前果樹抗性研究的熱點有篩選抗性基因［7］，利用與抗性基因緊密連鎖的分子標記進行分子育種的抗性材料快速篩選［9-10］，利用抗病基因同源序列分析種質(zhì)資源的抗病性［8］，轉(zhuǎn)化防衛(wèi)基因至植物內(nèi)提高其抗病性［6］。楊梅的抗病育種研究也有著廣闊的空間，在收集寶貴的抗性資源的基礎(chǔ)上，篩選和利用抗性基因，利用抗性基因連鎖的分子標記進行抗性材料的快速篩選都值得深入研究。

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S 667.6

：A

：0528-9017（2014）10-1567-03

文獻著錄格式：張振蘭，朱瀟婷，任海英，等.楊梅種質(zhì)資源對凋萎病抗性評價［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（10）：1567-1569，1571.

2014-05-07

浙江省重大科技專項重點農(nóng)業(yè)項目（2012C12009-5）；國家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項經(jīng)費項目（201203038）；院市（臺州）政府科技合作項目（TZ20140009）；院市（溫州）政府科技合作項目（WZ20130005）

張振蘭，女，寧夏固原人，助理研究員，本科，研究方向果樹學(xué)。E-mail：renhy@mail.zaas.ac.cn。

戚行江，男，研究員，主要從事果樹育種、栽培及病理學(xué)研究工作。E-mail：qixj@mail.zaas.ac.cn。

注：感謝福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所張澤煌副研究員和江蘇蘇州市園藝站徐春明研究員給予了無私的實驗材料的支持。

文獻著錄格式：葉春福，陳銀方.5種茶尺蠖誘芯的誘捕效果試驗［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（10）：1570-1571.