蓽澄茄不同極性提取物的抗炎鎮(zhèn)痛利膽作用Δ

張小麗，姜姍姍，陳瑞明，張亞紅，李 芳，柴 焱，張 天（.陜西省中醫(yī)藥研究院中藥研究所，西安 70003；.中國藥科大學藥學院，南京 98）

蓽澄茄不同極性提取物的抗炎鎮(zhèn)痛利膽作用Δ

張小麗1＊，姜姍姍1，陳瑞明1，張亞紅1，李 芳1，柴 焱1，張 天2（1.陜西省中醫(yī)藥研究院中藥研究所，西安 710003；2.中國藥科大學藥學院，南京 211198）

目的：研究蓽澄茄不同極性提取物的抗炎鎮(zhèn)痛利膽作用。方法：通過小鼠甩尾實驗測定甩尾潛伏期以觀察蓽澄茄不同極性提取物的鎮(zhèn)痛作用；通過小鼠耳廓腫脹實驗測定耳廓腫脹度以觀察蓽澄茄不同極性提取物的抗炎作用；通過大鼠、小鼠利膽實驗測定膽汁量以觀察蓽澄茄不同極性提取物的利膽作用。結果：1.6、0.8 g/kg蓽澄茄醚提物，2.4、1.2 g/kg蓽澄茄醇提物，4.0、2.0 g/ kg蓽澄茄水提物，3.6、1.8 g/kg蓽澄茄混合物能明顯延長小鼠甩尾潛伏期；1.6、0.8 g/kg蓽澄茄醚提物，2.4 g/kg蓽澄茄醇提物，1.8 g/kg蓽澄茄混合物能明顯減少小鼠耳廓腫脹度；1.20 g/kg蓽澄茄醚提物、1.70 g/kg蓽澄茄醇提物、2.80 g/kg蓽澄茄水提物、2.55 g/ kg蓽澄茄混合物能明顯增加大鼠1、3 h膽汁分泌量；1.20 g/kg蓽澄茄醚提物、1.70 g/kg蓽澄茄醇提物、2.55 g/kg蓽澄茄混合物能明顯增加大鼠2 h膽汁分泌量；1.20 g/kg蓽澄茄醚提物、1.70 g/kg蓽澄茄醇提物能明顯增加大鼠5 h膽汁分泌量；1.20 g/kg蓽澄茄醚提物能明顯增加大鼠4、6 h膽汁分泌量。1.6 g/kg蓽澄茄醚提物、2.4 g/kg蓽澄茄醇提物、4.0 g/kg蓽澄茄水提物、3.6 g/kg蓽澄茄混合物能明顯增加小鼠膽汁分泌量。結論：蓽澄茄不同極性提取物具有抗炎鎮(zhèn)痛利膽作用，有助于消除膽道炎癥和癥狀，其中蓽澄茄醚提物作用較強。

蓽澄茄提取物；抗炎；鎮(zhèn)痛；利膽；實驗研究

蓽澄茄（Listsea cubeba）又名山雞椒、山蒼子，系樟科木姜子屬植物山雞椒Litsea cubeba（Lour.）Pers.的成熟果實。筆者前期實驗發(fā)現(xiàn)蓽澄茄有利膽、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗?jié)兒涂垢篂a作用，為了明確蓽澄茄抗炎、鎮(zhèn)痛、利膽作用及其有效部位，筆者又進行了蓽澄茄不同極性提取物的抗炎、鎮(zhèn)痛及利膽作用的系統(tǒng)研究。

1 材料

1.1 儀器

TBA-40FR型全自動生化分析儀（日本東芝公司）；AL104型電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；YLS-12A型鼠尾光照測痛儀（山東省醫(yī)學科學院設備站）。

1.2 藥材

蓽澄茄購于西安市藥材公司，產地是四川省，由陜西省中醫(yī)藥研究院化學研究室李芳副研究員鑒定為真品并提供提取物（1 g醚提取物相當于原藥材12.0 g，1 g醇提取物相當于原藥材8.2 g，1 g水提取物相當于原藥材5.1 g，混合物按提取比例混合）。

1.3 藥品與試劑

熊去氧膽酸片（成都市湔江制藥廠，批號：1021463，規(guī)格：50mg）；總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）測試盒由北京九強生物技術有限公司提供；其余藥品、試劑均由寧波美康生物科技有限公司提供。

1.4 動物

ICR小鼠，體質量18～22 g；SD大鼠，180～220 g，♀♂兼半，由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供[實驗動物使用許可證號：SCXK（陜）2007-001]。實驗室溫度：18～23℃，相對濕度：45～65%，食固體專用飼料，輔以青飼料，自由飲水。每天打掃鼠籠1次。

2 方法

2.1 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠甩尾潛伏期的影響

用鼠尾光照測痛儀篩選，痛閾＜3 s或＞10 s者剔除，選出120只合格ICR小鼠隨機均分為10組，即模型（等容生理鹽水）組，蓽澄茄水提物高、低劑量（4.0、2.0 g/kg）組，蓽澄茄醇提物高、低劑量（2.4、1.2 g/kg）組，蓽澄茄醚提物高、低劑量（1.6、0.8 g/kg）組，蓽澄茄混合物高、低劑量（3.6、1.8 g/kg）組，嗎啡（200 mg/kg）組，除嗎啡組在實驗當天ip給藥0.02 g/kg外，其余各組ig給藥，每天1次，連續(xù)7 d。末次給藥45、90m in后，將小鼠尾部放入鼠尾光照測痛儀中，分別記錄小鼠尾自放入儀器至甩尾的時間，作為小鼠的甩尾潛伏期。

2.2 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠耳廓腫脹度的影響

120只ICR小鼠隨機均分為10組，即模型（等容生理鹽水）組，蓽澄茄水提物高、低劑量（4.0、2.0 g/kg）組，蓽澄茄醇提物高、低劑量（2.4、1.2 g/kg）組，蓽澄茄醚提物高、低劑量（1.6、0.8 g/kg）組，蓽澄茄混合物高、低劑量（3.6、1.8 g/kg）組，阿司匹林（0.3 g/kg）組。除阿司匹林組在實驗當天ig給藥0.3 g/kg外，其余各組ig給藥，每天1次，連續(xù)7 d。末次給藥后45m in，右耳滴二甲苯20μl，20m in后處死小鼠，用7mm打孔器在左右耳相同位置打耳片稱質量，兩耳片質量之差為耳廓腫脹度。

2.3 蓽澄茄不同極性提取物對大鼠膽汁排泄量的影響

60只SD大鼠隨機均分為6組，即正常對照（等容生理鹽水）組、蓽澄茄水提物（2.80 g/kg）組、蓽澄茄醇提物（1.70 g/kg）組、蓽澄茄醚提物（1.20 g/kg）組、蓽澄茄混合物（2.55 g/kg）組、熊去氧膽酸（56mg/kg）組。ig給藥，每天2次，連續(xù)14 d。末次給藥1 h后，10%的烏拉坦麻醉，膽總管插管，記錄大鼠1～6 h的膽汁量。

2.4 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠膽汁排泄量的影響

90只ICR小鼠隨機均分為6組，即正常對照（等容生理鹽水）組、蓽澄茄水提物（4.0 g/kg）組、蓽澄茄醇提物（2.4 g/kg）組、蓽澄茄醚提物（1.6 g/kg）組、蓽澄茄混合物（3.6 g/kg）組、熊去氧膽酸（80mg/kg）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)14 d。末次給藥1 h后，立即處死小鼠，迅速剝離膽囊，并測膽汁量。

3 結果

3.1 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠甩尾潛伏期的影響

與模型組比較，蓽澄茄水提物高、低劑量組，蓽澄茄醇提物高、低劑量組，蓽澄茄醚提物高、低劑量組，蓽澄茄混合物高、低劑量組小鼠甩尾潛伏期延長，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。蓽澄茄不同極性提取物對小鼠甩尾潛伏期的影響見表1。

表1 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠甩尾潛伏期的影響（±s）Tab 1 Effectsof various polar extractsof L.cubeba on sw inging tail incubation ofm ic（e±s）

表1 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠甩尾潛伏期的影響（±s）Tab 1 Effectsof various polar extractsof L.cubeba on sw inging tail incubation ofm ic（e±s）

與模型組比較：＊P＜0.01vs.modelgroup：＊P＜0.01

n組別模型組蓽澄茄醚提物高劑量組蓽澄茄醚提物低劑量組蓽澄茄醇提物高劑量組蓽澄茄醇提物低劑量組蓽澄茄水提物高劑量組蓽澄茄水提物低劑量組蓽澄茄混合物高劑量組蓽澄茄混合物低劑量組嗎啡組90min 4.84±1.89 11.26±3.88＊13.85±4.00＊13.9±3.42＊10.69±3.13＊14.15±2.28＊12.73±2.92＊14.53±2.33＊11.00±3.86＊15.19±3.67＊劑量，g/kg 1.6 0.8 2.4 1.2 4.0 2.0 3.6 1.8 200mg/kg 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12潛伏期，s 45min 4.38±1.82 12.4±4.45＊13.01±5.22＊11.86±3.78＊12.94±3.78＊12.92±3.46＊11.79±3.70＊13.66±2.98＊12.96±3.26＊15.92±2.73＊

3.2 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠耳廓腫脹的影響

與模型組比較，蓽澄茄醇提物高劑量組，蓽澄茄醚提物高、低劑量組，蓽澄茄混合物低劑量組小鼠耳廓腫脹度減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或品＜0.05）。蓽澄茄不同極性提取物對小鼠耳廓腫脹的影響見表2。

表2 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠耳廓腫脹度的影響（±s）Tab 2 Effects of various polar extracts of L.cubeba on ear swelling ofm ic（e±s）

表2 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠耳廓腫脹度的影響（±s）Tab 2 Effects of various polar extracts of L.cubeba on ear swelling ofm ic（e±s）

與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.modelgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別模型組蓽澄茄醚提物高劑量組蓽澄茄醚提物低劑量組蓽澄茄醇提物高劑量組蓽澄茄醇提物低劑量組蓽澄茄水提物高劑量組蓽澄茄水提物低劑量組蓽澄茄混合物高劑量組蓽澄茄混合物低劑量組阿司匹林組劑量，g/kg n 抑制率，% 46.12 50.40 28.70 34.95 16.16 17.60 39.20 62.20 62.20 1.6 0.8 2.4 1.2 4.0 2.0 3.6 1.8 0.3 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12耳廓腫脹度，mg 23.2±11.7 11.5±4.4＊＊14.1±5.2＊11.5±8.8＊16.5±11.8 15.1±11.7 19.5±7.2 19.1±10.6 14.8±5.7＊8.8±4.8＊＊

3.3 蓽澄茄不同極性提取物對大鼠膽汁量的影響

與正常對照組比較，蓽澄茄醚提物組、蓽澄茄醇提物組、蓽澄茄水提物組、蓽澄茄混合物組在1、3 h時大鼠膽汁量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或P＜0.05）；蓽澄茄醚提物組、蓽澄茄醇提物組、蓽澄茄混合物組在2 h時大鼠膽汁量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或P＜0.05）；蓽澄茄醚提物組在4、6 h時大鼠膽汁量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；蓽澄茄醚提物組、蓽澄茄醇提物組在5 h時大鼠膽汁量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。蓽澄茄不同極性提取物對大鼠膽汁量的影響見表3。

表3 蓽澄茄不同極性提取物對大鼠膽汁量的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effectsof various polar extractsof L.cubeba on the amountof bile secretion in rat（±s，n＝10）

表3 蓽澄茄不同極性提取物對大鼠膽汁量的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effectsof various polar extractsof L.cubeba on the amountof bile secretion in rat（±s，n＝10）

與正常對照組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.normal controlgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別正常對照組蓽澄茄醚提物組蓽澄茄醇提物組蓽澄茄水提物組蓽澄茄混合物組熊去氧膽酸組劑量，g/kg膽汁量，μl 1.20 1.70 2.80 2.55 56mg/kg 1h 129.3±30.7 345.5±170.2＊＊427.8±170.5＊＊335.7±229.6＊345.5±170.0＊＊364.4±203.0＊＊2h 156.3±64.1 258.4±71.9＊277.9±65.5＊＊274.0±144.1 258.4±71.8＊324.6±165.8＊3h 13.4±37.9 212.7±54.3＊＊252.7±65.9＊＊276.9±143.1＊212.7±54.3＊＊227.78±115.4＊4h 117.7±59.2 241.9±78.3＊＊200.2±82.9 172.11±38.6 172.1±38.6 217.8±111.3 5h 81.1±50.1 169.5±70.2＊192.6±83.6＊137.0±56.8 137.0±56.8 174.5±97.0＊6h 57.6±30.2 130.4±52.2＊＊92.7±40.3 132.8±60.0 132.8±60.0 167.6±60.6＊＊

3.4 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠膽汁量的影響

與正常對照組比較，蓽澄茄醚提物組、蓽澄茄醇提物組、蓽澄茄水提物組、蓽澄茄混合物組小鼠膽汁量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或P＜0.05）。蓽澄茄不同極性提取物對小鼠膽汁量的影響見表4。

表4 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠膽汁量的影響（±s）Tab 4 Effects of various polar extracts of L.cubeba on the amountof bile secretion inm ic（e±s）

表4 蓽澄茄不同極性提取物對小鼠膽汁量的影響（±s）Tab 4 Effects of various polar extracts of L.cubeba on the amountof bile secretion inm ic（e±s）

與正常對照組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.normal controlgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別正常對照組蓽澄茄醚提物組蓽澄茄醇提物組蓽澄茄水提物組蓽澄茄混合物組熊去氧膽酸組劑量，g/kg n 增加率，% 156 117 107 107 110 1.6 2.4 4.0 3.6 80mg/kg 15 15 15 15 15 15膽汁量，μl 19.3±20.9 49.5±18.6＊＊42.0±20.9＊40.0±23.8＊40.0±17.9＊40.5±23.8＊

4 討論

蓽澄茄為中醫(yī)較常用的溫里藥，能溫中散寒、行氣、止痛，用于胃寒嘔逆、脘腹冷痛、寒疝、腹痛、寒濕、小便渾濁。蓽澄茄有多方面的藥理作用，其揮發(fā)油又叫山蒼子油，主要組分為檸檬醛檸檬醛和檸檬烯[1]，作為增香劑被廣泛應用于食品和化妝品等日用化工之中[2]；其還具有廣譜抗細菌和抗真菌作用，也能抗念珠菌，亦可用作消毒防腐劑[3-4]。20世紀70～80年代發(fā)現(xiàn)其具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用后，遂用于慢性支氣管炎的治療；發(fā)現(xiàn)其具有抗心律失常、抗心肌缺血、抗缺氧、降壓及抗血栓形成作用后，曾用于冠心病和腦血栓形成的治療[5]。1977年11月，浙江省衛(wèi)生局在杭州主持會議，鑒定通過了杭州第一中藥廠研制的山蒼子油膠丸（即蓽澄茄揮發(fā)油膠丸）為平喘、祛痰、鎮(zhèn)咳藥，用于慢性支氣管炎、支氣管哮喘等。蓽澄茄可明顯地抗過敏、鎮(zhèn)靜、利膽、鎮(zhèn)痛抗炎、抗?jié)兒涂垢篂a[6-7]。

隨著人們物質生活水平的提高，肝膽疾病發(fā)病率不斷升高。臨床上，現(xiàn)代醫(yī)學在治療膽囊炎、膽結石、消化不良等疾病時均需要利膽、抗炎、鎮(zhèn)痛、溶石，主要用去氧膽酸、消炎利膽片、熊脫氧膽酸等，但用藥時間長，大量應用有可能損害肝臟，停藥后結石有復發(fā)可能性，中醫(yī)將此類疾病歸于肝郁氣滯的濕熱證，多采用清熱利濕的藥物治療，應用較多的如茵陳、大黃、金錢草、梔子、威靈仙等，中藥復方有茵陳蒿湯、清開靈、舒肝利膽排石口服液等。但是，該類疾病也涉及有些病人是因虛寒而致病，臨床上忽視了這方面的對證治療。本課題組在國家自然基金項目“溫里藥溫里藥理研究”中研究了其對消化系統(tǒng)的作用，結果表明，蓽澄茄醚提物及水提物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗?jié)儭⒖垢篂a、利膽等作用，它尤其表現(xiàn)出很強的利膽作用。因此，筆者進行了蓽澄茄不同極性提取物抗炎、鎮(zhèn)痛和利膽的實驗研究。前期研究表明，蓽澄茄不同極性提取物有抑制模型豚鼠膽結石形成的作用，增加膽結石模型豚鼠膽汁量，降低膽汁中的總膽紅素和膽固醇含量。其中，蓽澄茄醚提物作用較強，醇提物其次。本研究結果顯示，蓽澄茄不同極性提取物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、利膽的作用。其中，蓽澄茄醚提物的作用最強，蓽澄茄醇提物次之。因此，膽囊炎、膽管炎和膽石癥的患者有望采用蓽澄茄制劑進行治療，而其鎮(zhèn)痛抗炎及其抗菌作用將有助于消除膽道炎癥和癥狀。

[1] 何金明，肖艷輝，楊麗緞，等.韶關山蒼子果實揮發(fā)油含量與組分分析[J].廣東農業(yè)科學，2011，38（22）：114.

[2] 鄧業(yè)成，寧蕾.4種植物精油的抑菌活性及應用[J].廣西師范大學學報，2012，30（3）：288.

[3] 張明發(fā)，沈雅琴.蓽澄茄及其有效成分檸檬醛的抗病原體作用[J].上海醫(yī)藥，2011，32（10）：495.

[4] 方芳，呂昭萍，王正文，等.山蒼子油抗念珠菌的敏感性及作用機理的電鏡研究[J].中華皮膚科雜志，2002，35（5）：349.

[5] 沈雅琴，陳光娟，張明發(fā)，等.中藥蓽澄茄“溫中止痛”藥理研究[J].中藥藥理與臨床，1991，7（2）：18.

[6] 張明發(fā)，沈雅琴.蓽澄茄的利膽溶石和鎮(zhèn)痛抗炎作用的實驗研究[J].抗感染藥學，2013，10（2）：102.

[7] 王姿媛，何澤民，姜笑寒.蓽澄茄超臨界萃取物工藝篩選及藥效學研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19（7）：1 722.

Cholagogic，Analgesic and Anti-inflammatory Effectsof Various Polar ExtractsofListsea cubeba

ZHANG Xiao-li1，JIANG Shan-shan1，CHEN Rui-m ing1，ZHANG Ya-hong1，LI Fang1，CHAIYan1，ZHAGN Tian2（1.Institute for TCM Research，Shaanxi Provincial Academy of TCM，Xi’an 710003，2.College of Pharmacy，China Pharmaceutical University，Nanjing 211198，China）

OBJECTIVE：To observe the cholagogic，analgesic and anti-inflammatory effects of various polar extracts of Listsea cubeba.METHODS：The sw inging tail test and ear swelling test were adopted to observe the analgesic and anti-inflammatory of various polar extracts ofL.cubebaon mice，respectively.The cholagogic testwas used to determined the amount of bile secretion in rats and mice so as to observe cholagogic effect of various polar extracts ofL.cubeba.RESULTS：1.6，0.8 g/kg ether extracts ofL.cubeba，2.4，1.2 g/kg ethanol extracts ofL.cubeba，4.0，2.0 g/kg water extracts ofL.cubebaand 3.6，1.8 g/kgL.cubebam ixture could prolong incubation of sw inging tail；1.6，0.8 g/kg ether extracts ofL.cubeba，2.4 g/kg ethanol extracts ofL.cubeba，1.8 g/kg L.cubebamixture could reduce ear swelling；1.2 g/kg ether extracts ofL.cubeba，1.7 g/kg ethanol extracts ofL.cubeba，2.8 water extracts ofL.cubebaand 2.55 g/kgL.cubebamixture could increase the bile secretion of ratsw ithin 1 and 3 h and that ofmice significantly.1.2 g/kg ether extracts ofL.cubeba，1.7 g/kg ethanol extracts ofL.cubebaand 2.55 g/kgL.cubebamixture could increase the bile secretion of rats w ithin 2 h.1.2 g/kg ether extracts ofL.cubeba，1.7 g/kg ethanol extracts ofL.cubebacould increase the bile secretion of rats w ithin 5 h.1.2 g/kg ether extracts ofL.cubebacould increase the bile secretion of ratsw ithin 4 and 6 h.1.6 g/kg ether extracts ofL.cubeba，2.4 g/kg ethanol extracts ofL.cubeba，4.0 water extracts ofL.cubebaand 3.6 g/ kgL.cubebamixture could increase the bile secretion ofmice.CONCLUSIONS：Various polar extracts ofL.cubebahave cholagogic，analgesic and anti-inflammatory effects，which help to elim inate the inflammation of biliary passage and the symptoms.The effects of ether extracts ofL.cubebaare comparatively stronger.

Listsea cubebaextracts；Anti-inflammatory；Analgesic；Cholagogic；Experimental study

R285

A

1001-0408（2014）19-1744-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2014.19.05

陜西省中醫(yī)藥管理局科研項目（No.2007-63）

＊研究員。研究方向：藥理學。E-mail：zhangxiaoli8788@163. com

2013-09-03

2013-10-10）