淺談臨床PCR實驗室的建立和管理

楊永蘭 林 云

云南省中醫學院第一附屬醫院檢驗科，云南 昆明 650021

淺談臨床PCR實驗室的建立和管理

楊永蘭 林 云

云南省中醫學院第一附屬醫院檢驗科，云南 昆明 650021

目的為了PCR實驗室順利建立和開展工作，少走彎路，確保PCR實驗結果的準確可靠，得到簡便有序的工作程序，總結出一些實驗室建立和管理的經驗，以便提供參考。

臨床PCR實驗；管理

聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）是由美國Kary Mullis于1983年發明的［1］。它是一種體外核酸擴增技術，該技術主要通過高溫變性，低溫退火以及中溫延生等過程把樣本中靶DNA在體外擴增數百萬倍，從而獲得極高的檢測敏感性。隨著PCR技術不斷發展完善，它在醫學中的應用越來越廣泛，越來越受重視，越來越多的醫療機構陸續建立起PCR臨床實驗室，即以臨床檢驗為目的的基因擴增實驗室，并陸續開展關于PCR檢驗的新業務。筆者所在醫院PCR相關業務也因需在近幾年得到開展，筆者從實驗室的建立到現在日常運行，一直參與其中，對于臨床PCR實驗室的管理和運行積累了一些經驗和看法，現就這些經驗總結如下，和廣大同行一起淺談一下臨床PCR實驗室的管理。

1 PCR實驗室的建立

一個正規的PCR實驗室要求是很嚴格的，不管是從實驗室的環境要求到儀器設備和試劑耗材，還是從人員素質要求再到質量控制管理，每一個環節都是很重要的，國家也對臨床PCR實驗室的建立和運行也有著專門的要求，因此要順利開展起實驗室我們必須要有的放矢，理清思路，循序漸進的，有條不紊的一步一步來。

1.1 PCR實驗室申辦前準備

首先了解實驗室必需具備哪些條件，然后針對每一個條件進行完善，最終完全滿足這些條件的要求。

1.1.1 給出標準的實驗室設計方案 設計上，建立單流向、一體化的臨床定量PCR實驗室是安全準確進行基因擴增檢驗和保障生物安全的重要措施［2］。具體的是合理分區問題（通常分為試劑準備區、標本制備區、擴增區三個區）以及標準風向等環境條件。

1.1.2 配備專業技術人員 挑選業務水平較好的有資質的人員［3］，均經過衛生部臨檢中心或區臨檢中心理論和操作培訓并通過考試取得合格證［4］。

1.1.3 儀器設備以及試劑材料的準備 根據開展的項目，調研已經開展良好的實驗室，并認真對比市場各類產品，嚴格的選取所需設備和試劑。

1.1.4 標準操作規程的制定以及質量管理文件等的編寫。

根據自身實驗室開展的具體項目要求，結合自身使用的設備試劑進行編寫。

1.2 PCR實驗室申辦程序

進行實驗室申辦程序具體如下：首先填寫調查表，由省臨檢中心審核；然后正式填寫申請表，上報衛生部臨檢中心；評審由衛生部、省專家參加，并報省衛生廳備案；最后合格單位名單由衛生行政部門在媒體公示［3］。

1.3 持續性改進

針對評審專家指出的不足之處及合理性建議，進行持續性的改進。

2 PCR實驗室日常工作的管理

污染問題是PCR實驗室最常遇見的也是最重要的問題，它與我們檢驗結果的準確性密切相關。而污染可以出現在實驗室的任何一個環節，因此日常工作的每一個環節都很重要。

2.1 儀器的管理

主要的儀器是擴增儀和離心機，每天日常工作我們都要對其擦拭清潔，仔細認真檢查儀器工作狀態是否良好，離心力是否合格，擴增儀孔間差是否有問題。

2.2 試劑的管理

試劑管理十分重要，直接影響著檢驗結果，我們盡量選取高質量的PCR試劑。排除試劑的選取問題，試劑的分類和儲存也很重要，試劑儲存嚴格按照儲存條件，存放位置也要科學合理善于管理，以防止試劑大規模污染為原則，以先用效期短的試劑后用效期長的為原則，以不浪費不使用過期試劑為原則，以不同批號試劑不混放為原則，以不同項目試劑區別存放為原則，以新舊試劑不混放為原則。

2.3 環境的管理

單向氣流，單向物品傳送，生物安全，從這些環境要求可以看出實驗室環境問題對于PCR實驗室的重要性，因此確保環境參數也是保證實驗準確的基礎，我們應該每天對工作臺面進行擦拭消毒，工作結束紫外燈進行照射，經常檢查換氣扇的工作狀態是否正常，注意實驗室的通風等。

2.4 人員的管理

人員是核心，他掌控著實驗室的一切，一舉一動都可能影響著不同的環節，因此對人員就有相當高的要求，對人員我們不僅要求工作認真仔細，以防止少加漏加等低級錯誤造成結果的錯誤，更要求靈活敏銳，善于發現問題總結問題，實驗結果出現問題時能最快最好的解決，實驗中要求嚴格按照操作規程進行。

3 PCR實驗室質量控制管理

3.1 室內質量控制的管理

室內質量控制是為了控制實驗室內某個檢驗項目日常工作中的精密度，保證實驗室工作前后的一致性，進而保證檢驗結果的質量，PCR實驗過程很多，包括標本采集，核酸提取等，每個環節都需要相應質控措施，因此PCR室內質量控制就需要我們嚴格按照室內質控要求長期堅持，并認真的做好記錄，便于我們總結問題。

3.2 室間質評的管理

室間質評是檢驗質量體系中重要的環節，它確保了我們實驗室檢驗結果的準確性。因此保證得到可靠的結果我們不但要堅持室內質量控制，更要積極參加室間質評，對我們檢查結果做到胸中有數。對于不滿意的結果及時分析原因進行改進，從而不斷提高我們的檢驗水平。

4 結語

PCR技術的迅猛發展，PCR技術的迅猛發展，與其實用性密不可分。在不久的將來，PCR技術將有更高的突破，PCR臨床實驗室在醫療中也將發揮更大的作用。因為PCR技術的特殊性，對實驗室各環節的高要求，這就要我們必須嚴格按照PCR實驗室的要求進行每一步工作，只要確保對實驗室進行標準的建立、標準的管理，就會獲得可靠的研究結果，為臨床提供最有價值的數據。

［1］朱忠勇．實用醫學檢驗學［M］．2版．北京：人民軍醫出版社，1997：1041．

［2］江其生，金濟民，李峰生，等．單流向一體化臨床定量PCR實驗室的優化設計與設備配置［J］．醫療衛生裝備，2006，27（9）：34-36．

［3］宋秀軍， 江其生．淺談臨床定量PCR實驗室管理［J］．醫療衛生裝備，2010，31（2）：84-87．

［4］梁志東．PCR實驗室污染的排除［J］．實用醫技雜志，2006，13（7）：1141-1142．

R446.1

A

1674-9316（2014）06-0119-02

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.06.068

方法筆者根據自身實驗的建立到日常的運行，歸納總結出關于PCR實驗室建立和管理的一些經驗和看法。

結論PCR技術迅猛發展，跟他的實用性分不開，我們可以預見不久的將來，PCR技術將有更高的突破，PCR臨床實驗室在醫療中也將發揮更大的作用。我們嚴格按照實驗室的要求做好實驗室的建立和管理工作，我們必將少走彎路，少出錯誤。得到最為準確可靠的結果，從而更好的為臨床服務。