肉桂醛對肺癌細胞A549具有體外抑制作用

宋曉兵

漯河市第三人民醫(yī)院病理科，河南 漯河 462300

肉桂醛對肺癌細胞A549具有體外抑制作用

宋曉兵

漯河市第三人民醫(yī)院病理科，河南 漯河 462300

目的探討肉桂醛對肺癌細胞株A549的生長抑制作用。

肉桂醛；A-549 細胞；抗腫瘤

肉桂作為重要的藥用和食用植物，長期以來一直為臨床廣泛應用。而其對腫瘤的獨特抑制效果使其在腫瘤治療方面“身價倍增”［1-2］。肉桂醛的臨床治療效果主要體現(xiàn)為：清熱解毒、抗菌抗病毒。同時其用于臨床治療反映出的低毒副作用也使其應用和推廣更是呼之欲出。

1 材料與方法

1.1 材料

從中國醫(yī)學科學院細胞中心買回人肺癌細胞系A-549細胞株。從美國Gibco公司買回RPMI 1640 培養(yǎng)基。胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司 ，北京同仁堂藥店買回肉桂，四甲基偶氮唑（MTT）（購自Sigma公司），其余試劑均為國產。

1.2 實驗儀器

HF 212 UV 二氧化碳培養(yǎng)箱（上海力申科學儀器有限公司） ，550 型微孔板酶標儀（美國BIO-RAD公司） ，Nikon Eclipse TS100 型倒置熒光顯微鏡（日本Nikon） ，超凈工作臺（北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司）。

1.2 方法

采用MTT 法檢測肉桂醛對肺癌細胞株A549增殖抑制作用取對數(shù)生長期的細胞，用TE消化液消化計數(shù)。吸取細胞懸液200 μl分別接種于96 孔板，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)16 小時。在表現(xiàn)出細胞貼壁以后，在事先準備好的96孔的細胞培養(yǎng)板里加進去分為不同濃度表現(xiàn)的肉桂醛。每種濃度的液體重復加入8個孔內。與此同時設立空白對照組和細胞對照組兩個對照組用于對照試驗。置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，連續(xù)觀察3 d，記錄細胞形態(tài)變化。培養(yǎng)結束前4 h，吸棄培養(yǎng)板中液體，PBS沖洗3 次，每孔加入MTT20 μl，于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，去上清后每孔加 DMSO 200 μl，用微量振蕩器振蕩5 min，酶標儀比色測吸光度值。實驗重復3 次。

1.3 統(tǒng)計處理

對此數(shù)據采用17.0軟件系統(tǒng)進行統(tǒng)計和分析，采用χ2檢驗，結果具有明顯差異，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2 結果

2.1 肉桂醛對A-549 細胞增殖抑制的形態(tài)學變化光鏡下觀察。在使用藥物之前的表現(xiàn)為：A-549 細胞的形態(tài)表現(xiàn)出規(guī)則的形體狀態(tài)，排布規(guī)則而整齊，胞漿清晰。使用肉桂醛作用48 小時以后的主要變現(xiàn)為：細胞形態(tài)開始變化，空泡、腫脹、脫落等。

2.2 肉桂醛對A-549 細胞增殖抑制作用肉桂醛能抑制人肺癌細胞系A-549細胞增殖，且呈劑量依賴性，IC50值為0.36 mg/ml。

3 討論

肉桂醛的抗腫瘤效果之顯著性目前已經得到了大量研究結果的證實。同時其對人體的較低毒副作用也成為其臨床應用的一大優(yōu)勢。根據相關臨床報道顯示，在體外肉桂醛可以誘導肝癌SMMC-7721細胞凋亡而發(fā)揮抗腫瘤作用，可以對人皮膚黑色素瘤、人白血病細胞、人宮頸癌細胞、人結腸癌等細胞的增殖均有良好的抑制作用。本研究在光鏡下及用MTT 法觀測肉桂醛對A-549 細胞生長抑制作用。在光鏡下觀察后發(fā)現(xiàn)，經過用藥以后細胞出現(xiàn)的明顯的形態(tài)改變，細胞開始出現(xiàn)空泡、腫脹、脫落等現(xiàn)象。本研究主要是針對肉桂醛在體外抗腫瘤細胞作用的研究，但由于肉桂醛進入機體后可能與血漿蛋白或組織蛋白結合，或經肝臟酶代謝等一系列復雜的藥代動力學過程，并發(fā)揮其生物學作用，因此，肉桂醛在動物體內抗癌的作用還需要進一步研究。

［1］Brackman G，Defoirdt T，Miyamoto C，et al． Cinnamaldehyde and cinnamaldehyde derivatives reduce virulence in Vibrio spp． by decreasing the DNA-binding activity of the quorum sensing response regulator LuxR［J］． BMC Microbiol． 2008，8：149．

［2］Juneja VK， Friedman M． Carvacrol and cinnamaldehyde facilitate thermal destruction of Escherichia coli O157：H7 in raw ground beef［J］． J Food Prot． 2008，71（8）： 1604-11．

Cinnamaldehyde to lung cancer cell line A549 has obvious antitumor activity in vitro

SONG Xiaobing The third people’s hospital of luohe， Hebei 462300， China

ObjectiveTo explore the inhibition of cinnamaldehyde to the growth of lung cancer cell lines A549.MethodsUsing thiazole blue colorimetry to detect the inhibition of cinnamaldehyde on the growth of human lung cancer cell line A - 549 cell lines in vitro, calculate the half inhibitory concentration.ResultsCinnamaldehyde inhibits the proliferation of human lung cancer cell line A - 549 cells, which is dose dependent，IC50 alue concentration is 0.36 mg/ml.ConclusionIn vitro, cinnamaldehyde has an obvious antitumor activity to lung cancer cell line A549.

Cinnamaldehyde；A549 cell；Antitumor

R734.2

B

1674-9316（2014）06-0030-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.06.017

方法采用噻唑藍比色法檢測肉桂醛對體外培養(yǎng)的人肺癌細胞系A-549 細胞株的生長抑制作用，計算半數(shù)抑制濃度。

結果肉桂醛能抑制人肺癌細胞系A-549 細胞增殖，且呈劑量依賴性，IC50值為0.36 mg/ml。

結論在體外，肉桂醛對肺癌細胞株A549具有明顯抗腫瘤活性。