心肝胃同治方對心肌梗死大鼠血清中血管內皮生長因子的影響

王友明 賈云芳 侯仙明

(河北工程大學附屬醫院神經內科，河北 邯鄲 056002)

冠心病屬于中醫學胸痹、心痛范疇，一般認為其病位在心，當從心治乃為正法，但從歸經角度仔細分析其治療方藥，發現治心實則重在調理肝胃，可見冠心病不但治心又要治療肝胃。本研究創治了心肝胃同治方，應用于臨床療效顯著。血管內皮生長因子(VEGF)是血管新生中最重要的促進因子〔1〕，在血管新生中發揮著巨大作用，本實驗重點探討心肝胃同治法對大鼠血清中VEGF的影響。

1 材料與方法

1.1動物藥物及試劑 健康雌性Wistar大鼠，體重220～260 g，由河北省實驗動物中心提供。心肝胃同治方所用中藥丹參、檀香、延胡索、乳香、沒藥、龍眼肉、人參、瓜蔞、薤白、半夏購自石家莊樂仁堂藥店。常規煎煮，離心去雜，濃縮為2 g/ml的水煎液，密封分裝，4℃冷藏備用。硝酸異山梨酯片(消心痛)：天津太平洋制藥有限公司產品，規格：5 mg/片。VEGF購于北京中杉生物公司。

1.2主要儀器設備 Rm6240C型生理實驗系統成都儀器廠；DW-2B小動物人工呼吸機，河北醫科大學儀器廠；TGL-16G臺式離心機上海安亭科學儀器廠；JY1201型藥物電子天平上海民橋精密科學儀器有限公司。

1.3方法

1.3.1模型制作與分組 動物適應性飼養1 w后，大鼠稱量體重，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，仰臥位固定，直視下經口行氣管插管，連接動物人工呼吸機，給予正壓人工呼吸，潮氣量3 ml/100 g，呼吸頻率60～70次/min。記錄肢體Ⅱ聯心電圖。胸部備皮，常規消毒、鋪巾，自胸骨左緣旁開0.5～1 cm 縱向切口約2 cm，鈍性分離胸大肌、前鋸肌、肋間肌，于4～5肋間開胸暴露心臟，眼科開瞼器撐開肋骨，撕開心包，輕壓擠出心臟，迅速于肺動脈圓錐與左心耳之間，距主動脈根部2～3 mm處，用5-0眼科無創縫合線結扎冠脈左前降支，回納心臟，逐層關胸，關閉胸腔前10 ml無菌注射器抽吸恢復胸腔負壓。待大鼠出現自主呼吸后，拔除氣管插管。術畢肌肉注射青霉素40萬U，連續3 d，以預防感染。以心電圖ST段明顯抬高持續30 min以上，結扎線以下心肌顏色變蒼白、搏動減弱為造模成功標志。

1.3.2實驗分組 選取造模成功大鼠32只，按隨機數字表法隨機分為模型組、消心痛組、心肝胃同治低劑量組、心肝胃同治高劑量組四組，其中每組8只；另設假手術組大鼠8只，手術過程相同，但只穿線不結扎冠脈。

1.3.3動物喂養與給藥 實驗期間，大鼠自由飲水、攝食，普通飼料專人喂養。于術后24 h灌胃給藥，按人鼠體表面積比率折算等效劑量，心肝胃同治低劑量組灌服劑量為6.75 g·kg-1·d-1，心肝胃同治高劑量組灌服劑量為13.5 g·kg-1·d-1，消心痛組灌服劑量為2.7 mg·kg-1·d-1，1次/d；模型組和假手術組大鼠灌胃等量蒸餾水。連續用藥2 w。

1.3.4指標檢測 用藥2 w后，處死大鼠，離心分離血清。依據試劑盒操作說明檢測血清中VEGF。

2 結 果

2.1大鼠造模及一般情況觀察 大鼠進行心肌梗死模型復制，造模后前3 d，大鼠飲食、活動均減少。實驗過程中，模型組大鼠飲食、活動較少，皮毛欠光澤，增重較緩慢，甚至無增重；其余各藥物干預組，大鼠精神狀態漸好轉，不同程度增重，以心肝胃同治大劑量組最明顯。實驗過程中各組大鼠無脫失。

2.2血清中VEGF含量 心肝胃同治高、低劑量組及消心痛組〔(53.63±3.81)、(45.45±3.57)、(47.20±2.56)pg/ml〕明顯高于模型組〔(36.06±2.76)pg/ml〕(P<0.05)，心肝胃同治低劑量組與消心痛組無差別(P>0.05)，心肝胃同治高劑量組優于其他處理組〔假手術組(29.46±5.79)pg/ml〕(P<0.05)。

3 討 論

冠心病患者不同程度地表現有血瘀證候，活血化瘀類藥物是冠心病治療的主要手段。對中藥學七版教材中活血化瘀類藥物初步統計發現：33味藥中有31味歸肝經，13味歸心經(包括心包經)，尤其破血消癥藥為治血之峻藥，全部歸肝經，其中無一味歸心經，甚至水蛭、虻蟲只歸肝經。可以看出中醫治血重在調肝，而治心必要治血，故欲治心必先調肝。而調肝之法，除了直接應用活血化瘀藥物外，亦應注意調和肝氣，正如《血證論》所說“肝屬木，木氣沖和條達，不致遏郁，則血脈得暢”。 周學海的《讀醫隨筆》更加明確的指出:“肝者，貫陰陽，統氣血，握升降之樞也”。因此肝在整個人體氣血運行中具有舉足輕重的作用，也為從肝治心提供了保障，說明心肝關系密切。

冠心病除與心肝關系密切外，亦與胃緊密相關。在具體分析兩者關系之前，須要先確定胃的內涵和外延。內涵即胃腑本身，外延應涵蓋脾、大腸、小腸。就消化功能而言脾胃必須協同才能完成，所以二者在功能上具有統一性。從經絡角度而言足太陰經和足陽明經更是將脾胃密切相連，故二者在結構上具有整體性。大腸、小腸皆屬于胃，是足陽明也。可見，對于胃概念的外延，應包括大、小腸在內。《靈樞·經別》：“足陽明之正，上至髀，入于腹里，屬胃，散之脾。”指出胃之經別將胃脾腸聯系起來，而且胃經與大腸經直接相連，故脾胃腸三者密切相關而胃為紐帶，故將脾胃腸合為一體以胃代之。

通過研究分析張仲景治療胸痹心痛的方藥歸經發現：《金匱要略》治本病所立10方，其中6方使用了栝蔞、薤白、枳實、厚樸、橘皮，甚至巴豆等下氣導滯除痰之品，其目的在于疏通腸胃氣機，保持腑氣通暢。10方涉藥23味，歸經較明確的21味，除桂枝以外20味歸脾、胃、大腸經，歸心經的有7味。由上述統計數據可看出心痛雖病位在心，但張仲景更注重從胃入手解決痰、氣問題來治心病。

根據上述歸經理論可見與冠心病密切相關的臟器當屬心肝胃，病理因素當為氣滯血瘀痰濁，因此對本病的治療當心肝胃并治，氣血痰并調。在此思想的指導下我們提出了心肝胃并治法。結合歷代醫家的經驗和我們的臨床經驗，以丹參飲合瓜蔞薤白半夏湯加減創制了心肝胃同治方。內經對方劑中藥物的配伍講求君臣佐使，根據治病之輕重又分大小之制，即《素問·至真要大論》：“主病之謂君，佐君之謂臣，應臣之謂使。”“君一臣二，制之小也。君二臣三佐五，制之中也。君一臣三佐九，制之大也。”冠心病致病因素復雜，病變所涉臟器較多，非一般小方所能治之，故順內經之理制中方以治，全盤兼顧，以求良效。心肝胃同治方由丹參、檀香、延胡索、乳香、沒藥、龍眼肉、人參、瓜蔞、薤白、半夏組成。其中丹參，檀香為君：丹參歸心、肝經，祛瘀止痛，活血通經，兼補血之能；檀香歸心、胃經，行氣止痛。延胡索，乳香，沒藥為臣：三藥均入心、肝、脾，均有活血，行氣，止痛之功。龍眼肉，人參，瓜蔞，薤白，半夏為佐：人參與龍眼肉重在歸心經以益氣養血，瓜蔞、薤白、半夏歸胃經行氣祛痰。

VEGF可以特異性的促進血管內皮細胞進行有絲分裂，具有誘導新生血管生成的作用，是目前發現的最重要的血管生長因子之一〔2〕。正常心臟中VEGF的表達很少，而在局部組織缺血、缺氧時VEGF的表達則明顯增加。當VEGF與受體膜外成分部分結合后，激活磷酸激酶C和刺激第二信使的形成，直接促進血管內皮細胞的有絲分裂；或在核酸和蛋白水平誘導纖維蛋白溶解酶原激活物的表達，參與細胞外蛋白水解和基膜的降解，有利于血管內皮細胞的遷移和增生〔3〕。在缺血的心肌梗死區給予外源性VEGF，可增加梗死區域內VEGF的濃度，有明顯促進血管再生的作用，從而改善側支循環血流和內皮細胞功能〔4〕。但內源性的VEGF升高為時短暫，不足以建立充分的側支循環，無法滿足缺血心肌的供血。因此在缺血性心臟病的治療中需通過人為方式促進VEGF的升高。

本實驗結果表明心肝胃同治方能明顯提高心肌梗死大鼠血清中VEGF含量，因此可推斷，心肝胃同治法治療機制可能與促進了大鼠心梗區血管新生，改善了缺血心肌的供血有關。

4 參考文獻

1侯仙明，王亞利，劉彥卿，等.“和血生絡法”對心梗大鼠血清中 VEGF 的影響〔J〕.中國中醫基礎醫學雜志，2012；18(9)：971-2.

2張冬梅，吳愛明，婁利霞，等.活血益氣方對心梗后大鼠缺血心肌血管新生及 VEGF 表達的影響〔J〕.遼寧中醫雜志，2010；37(8)：1602-5.

3田兆華，劉柏炎.血管新生與腦缺血損傷〔J〕.中國腦血管病雜志，2008；5(3)：132-4.

4王 冰，李晶華.VEGF對冠心病血管新生的影響〔J〕.心臟雜志，2009；521(3)：410-3.