微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體的分析

馮 宇

（長春市中醫院，吉林 長春 130022）

微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體的分析

馮 宇

（長春市中醫院，吉林 長春 130022）

目的探討為主凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體的效果，初步建立并優化這種檢測血小板抗體的方法。方法選取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作為觀察組；另選取2012年5月至2013年6月來我院進行健康體檢的健康體檢者75名，作為對照組。分別采用微柱凝膠免疫分析技術進行血小板抗體檢測。結果在75例血液病患者中，共檢出血小板抗體19例；其中輸注超過30個治療量血小板的患者12例，血小板抗體陽性者7例（58.33%）；輸注20～29個治療量的患者21例，血小板抗體陽性者9例（42.86%）；輸注10～19個治療量的患者27例，血小板抗體陽性者10例（37.04%）；輸注3～9個治療量的患者9例，血小板抗體陽性者2例（22.22%）；輸注少于3個治療量血小板的患者6例，均未檢出血小板抗體。健康體檢者均未檢出血小板抗體。結論結果表明血小板抗體的產生與輸注血小板的頻率和量相關。微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體準確可靠、簡單快速，比傳統的定性檢測法與定量檢測法效果好，具有臨床推廣價值。

微柱凝膠免疫；分析技術；檢測；血小板抗體；分析

為了探明多次輸注血小板與血小板抗體陽性率的關系，我院決定引入微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體，這種方法檢測結果準確可靠，簡單快速，值得在臨床推廣。通過分析檢測結果，我們得出多次輸注血小板后，患者體內的血小板陽性檢出率升高的結論[1]?，F對微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作為觀察組；另選取2012年5月至2013年6月來我院進行健康體檢的健康體檢者75名，作為對照組。分別采用微柱凝膠免疫分析技術進行血小板抗體檢測。75例血液病患者中，特發性血小板減少性紫癜患者39例，再生障礙性貧血患者15例，白血病21例；患者與健康體檢者的年齡均在17～67歲，平均（34.2±10.3）歲；患者與健康體檢者中，男性73例，女性77例；兩組患者在年齡、性別方面的差異無顯著性，可以進行對比。

1.2 檢查方法

①檢驗所需材料。交聯試劑：為O型血供者多人份混合血小板，含抗人IgG抗體，但與指示細胞表面的抗人IgG 抗體為非同源。指示紅細胞：表面包被有抗人IgG 抗體。器材：6孔微柱凝膠板。②檢測步驟：a.檢測原理：指示紅細胞表面包被有抗人IgG抗體，該抗體通過其分子上的Fc段與指示紅細胞結合。若受檢者的血液樣品中存在抗血小板抗體，抗血小板抗體將與紅細胞表面的抗人IgG 抗體的Fab段結合，形成指示紅細胞（抗人IgG抗體）-（血小板抗體）-血小板復合物。在加入交聯試劑的條件下，交聯劑與復合物形成網狀結構，將此加入微柱凝膠上，在一定的離心力作用下和凝膠的分子篩作用下，網狀復合物浮在凝膠表層，和游離指示紅細胞分離。這就出現了可疑（±）依次至陽性（++++）凝集。若檢測標本中無抗血小板抗體，則無法形成該網狀結構，指示紅細胞經上述處理后仍沉聚在凝膠底部，呈現陰性結果。b.取凝膠管一支，對其進行標本標記。依次向其中加入受試者血清、指示紅細胞（0.5%～0.8%）各一滴（大約為50 μL）。置于37 ℃孵箱中孵育10 min。孵育后，滴加1滴O型血供者混合血小板（3人以上）入反應腔，離心3 min，轉速1000 r/min。以上各步驟完成后，立即觀察結果。

1.3 統計學處理

對結果進行卡方統計，采用SPSS20.0統計軟件進行分析，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

在75例血液病患者中，共檢出血小板抗體19例；其中輸注超過30個治療量血小板的患者12例，血小板抗體陽性者7例（58.33%）；輸注20～29個治療量的患者21例，血小板抗體陽性者9例（42.86%）；輸注10～19個治療量的患者27例，血小板抗體陽性者10例（37.04%）；輸注3～9個治療量的患者9例，血小板抗體陽性者2例（22.22%）；輸注少于3個治療量血小板的患者6例，均未檢出血小板抗體。健康體檢者均未檢出血小板抗體。

3 討 論

對于患有血液疾病的患者，常需要輸入血小板進行治療，對于多次輸血的血小板減少患者，發生血小板輸血紫癜、血小板輸注無效的患者較多，其概率可達30%～70%。這就導致患者在輸注治療量血小板之后，血小板計數不升反降，這樣不僅會導致血小板臨床輸注無效，還可能對患者的生命安全造成威脅[2]。血小板是人體內的重要物質，與凝血等功能密切相關。血小板表面有很多血型抗原，如HLA抗原、血小板特異抗原、ABH抗原物質等，它們可刺激機體免疫系統，產生相應的血小板抗體，常易引起輸注血小板的患者產生抗血小板抗體，導致發生不良反應，或輸注血小板無效，血小板值變得更低。我院的研究表明，采用微柱凝膠免疫分析技術檢測血液中的血小板抗體，操作簡便，可快速出結果，結果可靠，是一個實用的有臨床推廣意義的檢測方法[3，4]。這個方法對于需要輸注血小板進行治療的血液病患者有重要意義，因為其檢測結果可用于指導醫護人員選擇合適性的血小板輸注，該方法并不需要大型儀器，肉眼觀察即可判斷結果，一般的檢驗實驗室也可采用。

[1] 李嵐,董洪強,張瓊麗.微柱凝膠免疫分析技術檢測血小板抗體[J].山西醫藥雜志,2010, 38(7):16-18.

[2] 徐長根,賀春金,張遠鵬,等.微柱凝膠法檢測血小板抗體[J].臨床檢驗雜志,2010,20(5):272-274.

[3] 程洪波,李國良,熊麗紅,等.微柱凝膠技術檢測血小板抗體[J].現代診斷與治療,2010,18(2):72-74.

[4] 許德義,董國飛,張哲,等.微柱凝膠免疫分析技術在血小板抗體篩選中的應用[J].中國實驗血液學雜志,2010,15(4):888-890.

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1671-8194（2014）27-0079-01