小魚眼草化學成分研究

胡美忠 何 騫

1.銅仁職業技術學院，貴州 銅仁 554300;2.貴州大學生命科學學院，貴州 貴陽 550025

小魚眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)為菊科魚眼草屬植物，一年生草本，分布于湖北，廣西，四川，貴州，云南等省區[1]，性苦、涼，具清熱解毒，祛風明目功能。主治肝炎、小兒消化不良、小兒感冒發燒、肺炎、痢疾、瘧疾、牙痛、夜盲癥等[2]。

小魚眼草在民間被廣泛地用于保肝、抗炎、抗菌、治療止血、鎮痛和外傷等方面的治療，療效較好，然而對小魚眼草化學成分研究目前尚少，為了更好深入研究小魚眼草的藥用價值，闡明其藥用成分及機理，筆者對小魚眼草粗提物浸膏的進行分離純化，得到7種化合物，鑒定出其中4種，分別為沒食子酸 (Ⅱ)，山奈酚 (Ⅵ)，鄰苯二甲酸二丁酯 (Ⅴ)，槲皮素(Ⅶ)，其中沒食子酸 (Ⅱ)，山奈酚 (Ⅵ)，槲皮素 (Ⅶ)均是首次從小魚眼草里分離純化出。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料 小魚眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)購自于貴州省貴陽市藥材農貿市場，洗凈曬干后粉碎成100目左右細粉備用。

1.1.2 儀器 顯微熔點測定儀 (X-4)，北京泰克儀器有限公司;超導脈沖付里葉變換核磁共振儀 (NOVA-400型)，美國瓦里安公司;Sephadex LH-20葡聚糖凝膠，瑞典Amersham公司產;氣質聯用儀，美國惠普公司 (Hcwlctt Packard)HP-6890/HP5973 GC-MS。

2 提取分離

干燥小魚眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)4.5千克粉粹，85%乙醇室溫浸提4～5次 (每次5天)，浸提液減壓濃縮回收溶劑，得浸膏，浸膏加適量水溶解，靜置于冰箱過夜后過濾，濾液分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮，得到石油醚部分，氯仿部分 (12g)，乙酸乙酯部分 (30g)和正丁醇 (130g)部分。

氯仿部分的分離 氯仿部分經硅膠拌樣上柱 (硅膠顆粒:100～200目，柱4.5cm×65 cm)，石油醚﹕乙酸乙酯(100∶1～0∶1)梯度洗脫，薄層板檢測，合并相同組分后濃縮再經硅膠柱層析，重復幾次，相同組分結晶和重結晶，最終從氯仿部分得到4個單體。Ⅰ (32mg)白色羽毛針狀晶體，mp281― 283℃;Ⅱ (15mg)為無色針狀晶體，mp232― 234℃;Ⅲ (40mg)為白色狀晶體，mp214―216℃;Ⅳ (5mg)為無色針狀晶體，mp236-238℃。

乙酸乙酯部分的分離純化乙酸乙酯部分經硅膠拌樣上柱(硅膠顆粒:100-200目，柱5.5cm×90cm)，氯仿﹕甲醇(100∶0―0∶1)梯度洗脫后，經AB―8大孔樹脂及LH―20凝膠反復層析，在乙酸乙酯部分得3個單體，Ⅴ (21mg)淺黃色油狀;Ⅵ (17mg)為黃色粉末狀晶體，mp276―278℃;Ⅶ(11mg)為黃色粉末狀晶體，mp308―310℃。

3 化合物結構鑒定

分離出7種化合物，經過理化方法及光譜分析鑒定了其中4個化合物。

化合物 (Ⅱ):無色針晶狀 (氯仿)，mp232―234℃，易溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇，MS，m/z:170，153，141，125，113，96，79，63，51，1H-NMR(CD3OD)，δ:7.03(2H，s);13C-NMR(CD3OD)，δ:169.10(C=O)，145.05(C-3，C-5)，138.22(C-4)，120.66(C-1)，108.96(C-2，C-6)。以上波譜數據和文獻報道沒食子酸基本一致[3-4]，因此，推測該化合物為3，4，5―三羥基苯甲酸，即沒食子酸 (Gallic acid)。

化合物 (Ⅵ):黃色粉末狀 (甲醇)，mp276―278℃，易溶于甲醇、乙醇，微溶于乙酸乙酯，難溶于氯仿，幾乎不溶于冷水，鹽酸-鎂粉反應顯淡紫紅色，三氯化鋁顯色后在紫外燈下觀察為黃綠色熒光，Molish反應呈陰性，1HNMR(CD3OD)，δH:8.03(2H，d，H-3 ＇、5 ＇)，6.89(2H，d，H-2＇，6＇)，δH:6.38(1H，d，H-8)，6.16(1H，d，H-6)，1H-NMR(CD3OD)，03(2H，dd，H-3＇，5＇)，6.89(2H，d，H-2＇，6＇)，6.38(1H，d，H-8)，6.16(1H，d，H-6)。EI-MS(M/e):286(M+)、285、257、229、194、143、121、101、81、55。13C-NMR(CD3OD)，δC:115.14，129.31，174.00，97.93，93.11，128.52，114.96，97.90，164.23，65.32，47.83 該化合物的理化性質與文獻報道的山奈酚的理化性質基本一致[5-6]，且EI-MS經微機檢索標準圖譜庫與山奈酚基本一致。故鑒定為山奈酚 (Kaempferol)。

化合物 (Ⅴ):淺黃色油狀物 (甲醇)，易溶于乙酸乙酯、乙醇、甲醇，微溶于氯仿、乙醚，1HNMR(CD3OD)，δ:7.69(2H，d，H-3，6)，7.51(2H，t，H-4，5)，4.28(2H，t，H-1＇)，1.42(2H，m，H-2＇)，0.98(2H，m，H-3＇)，0.88(3H，t，H-4＇)，13CNMR(CD3OD)δ:167.8(C=O)，132.3(1，2-C)，131.0(4，5-C)，128.9(3，6-C)，77.3(1＇-C)，30.65(2＇-C)，29.7(3＇-C)，13.8(4＇-C)。以上數據與文獻數據基本一致[1，7-8]，可以確定該化合物為鄰苯二甲酸二丁酯 (Dibutyl phthalate)。

化合物 (Ⅶ):黃色粉末 (甲醇)，mp308～310℃，溶于乙醇、甲醇和稀堿溶液，鹽酸-鎂粉反應顯紅色，三氯化鋁反應顯黃綠色熒光，NaOH水溶液顯深黃色，Molish反應呈陰性。1H-NMR，6.16(1H，d，J=2.0Hz)，6.37(1H，d，J=2.0Hz)，7.72(1H，d，J=2.0Hz)，7.62(1H，dd，J=1.6，2.0Hz)，13C-NMR，δC:147.5，136.7，176.7，157.7，99.0，164.8，94.3，161.8，104.2，123.5，115.6，145.6，148.1，121.4 圖譜數據與文獻的數據基本一致[9-10]。故鑒定為槲皮素 (Quercetin)。

[1]田新慧，丁剛，彭朝忠，et al.小魚眼草脂溶性成分研究[J].中國藥學雜志，2012，47(17):1366-9.

[2]謝宗萬.全國中草藥匯編[M].北京:人民衛生出版社，1975.

[3]楊小鳳，付宏征，雷海民，et al.欒樹的化學成分[J].藥學學報，1999，34(06):58-63.

[4]譚菁菁，趙慶春，楊琳，et al.白芍化學成分研究[J].中草藥，2010，36(08):1245-8.

[5]歐陽明安.女貞小蠟樹的木脂素及黃酮類配糖體成分研究[J].中草藥，2003，34(03):7-9.

[6]胡喜蘭，朱慧，劉存瑞，et al.鳳仙花的化學成分研究[J].中成藥，2003，25(10):59-60.

[7]劉冰晶，陳光英，簡藍，et al.斜脈暗羅莖化學成分研究[J].中草藥，2011，42(7):1264-6.

[8]宋鑫明，陳光英，宋小平，et al.青梅葉化學成分研究[J].林產化學與工業，2012，03(102-6.

[9]李文魁，李英和，楊峻山，et al.瓜子金化學成分的研究[J].天然產物研究與開發，1996，8(03):1-4.

[10]張忠立，左月明，徐璐，et al.三白草黃酮類化學成分的研究[J].中草藥，2011，42(8):1490-2.