王斌仙
(寧波市鄞州區首南街道經濟發展科,浙江寧波315194)
豬瘟(CSF)以出血和發熱為主要特征,呈急性或慢性經過,是一種高度接觸性傳染病,被世界動物衛生組織(OIE)列為A 類動物傳染病。我國列為一類動物疫病,主要通過疫苗接種控制該病。我國生產的豬瘟兔化弱毒疫苗性能穩定、安全、免疫效果良好,且無殘留,是國際公認安全有效的弱毒疫苗。
目前我國生產的豬瘟疫苗主要有4 種,即豬瘟兔化弱毒脾淋苗、豬瘟兔化弱毒組織苗、豬瘟細胞苗(牛睪丸原代細胞疫苗、豬瘟傳代細胞苗)和豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯苗。
1.1 豬瘟兔化弱毒脾淋苗 系兔化弱毒株接種于成年兔,采用無菌法收獲含毒濃度高的淋巴結、脾臟,通過減毒制備而成的疫苗。特點是免疫原性強、效果好,免疫后抗體產生快、持續時間長。
脾淋苗生產工藝過程中因含有大量免疫相關轉移因子,所以能起到免疫增強作用。臨床上多用于緊急免疫接種,效果優于細胞苗。因采用活體動物生產,兔脾臟和淋巴結數量較少,生產量小,所以成本較高。加之用于制苗的兔子缺乏標準(特別是外源病原檢測標準),且生產工藝復雜,所以有不法企業在脾淋苗中摻入細胞苗,甚至將染有牛粘膜病毒的疫苗銷售給用戶,可能造成豬瘟免疫失敗,疫情長年不斷。2009年中國獸藥監察所采用ELISA 方法檢查22 批豬瘟脾淋苗,發現有5 批疫苗中摻入了細胞苗。脾淋苗生產過程控制困難,特別是部分廠家由于設備簡陋,外源病毒污染機會較大,造成兔體實質器官載毒量偏低,導致單位頭份疫苗內所含抗原量偏低,且可能所含異源組織量偏高,故臨床使用時需加大劑量,易引起過敏反應。
1.2 豬瘟兔化弱毒組織苗 系豬瘟兔化弱毒株接種于乳兔,經無菌采集肌肉及實質臟器制備的疫苗。
該苗的特點是免疫原性較強,免疫效果較好,免疫后抗體產生較快,抗體滴度持續時間較長。
1.3 豬瘟細胞苗
1.3.1 豬瘟牛睪丸原代細胞苗 系利用牛睪丸原代細胞制造的疫苗,優點是可大批量生產,生產過程容易監控,價格低廉,缺點是效價不穩定。由于每次制造疫苗的細胞來源于不同牛體,批間差異較大,另外由于感染病毒性腹瀉病毒(BVDV)的牛群比例較高,利用牛睪丸細胞生產疫苗易受BVDV 污染。BVDV 與CSFV 同屬黃病毒科、瘟病毒屬,由于競爭抑制原因,豬瘟病毒在細胞中的增殖會明顯受到影響,導致豬瘟牛睪丸原代細胞苗病毒滴度較低,同時由于培養細胞用的牛血清往往含有BVDV 抗體,用這種苗免疫不但可能干擾豬瘟疫苗抗體的產生,引起免疫失敗,還易使豬體感染BVDV,引起母豬繁殖障礙。病毒還可通過胎盤傳給仔豬,甚至引起仔豬發病。2009年中國獸藥監察所采用PCR 方法對23批次豬瘟牛睪丸細胞苗進行檢測,結果發現有5 批次疫苗污染有BVDV,污染率為21.74%。許多豬場免疫接種豬瘟疫苗后,仍然發生豬瘟,多數可能是由于接種了被BVDV 污染的豬瘟牛睪丸細胞疫苗后誘發的,該問題應引起高度重視。
1.3.2 豬瘟傳代細胞苗 系采用國際認證的同源傳代ST 細胞進行培養,具有批間差異極小,穩定性好,病毒培養液中病毒含量高,可大批量生產,且生產過程容易監控,可有效避免BVDV 病毒污染的威脅。中國獸醫藥品監察所等選擇了一種對豬等動物安全、適宜于豬瘟病毒增殖的傳代細胞系——ST 細胞系,將ST 細胞系接種于裸鼠,觀察近100 d,未見致瘤現象及組織病理變化,將該細胞連傳20 多代,也未見染色體變化,證明該細胞系十分安全。豬瘟兔化弱毒病毒在該細胞中能高滴度增殖,通常情況下,每mL 細胞疫苗毒液的毒價能穩定在50 到100萬個兔體感染量,如采用生物反應器則可達到300萬倍左右,是原代牛睪丸細胞豬瘟疫苗毒價的10~50 倍。因該苗良好的安全性,應用于豬體十分安全。免疫效果檢驗顯示,將該疫苗作5000 倍稀釋免疫豬,仍能100%抵抗強毒攻擊,高出牛睪丸原代細胞生產的疫苗近20 倍。實驗室免疫接種一次免疫期可達1年以上,推廣應用效果良好。
1.4 豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯苗 主要成分為豬瘟兔化弱毒株(C 株)接種易感細胞,收獲細胞培養病毒液,以適當比例與豬丹毒桿菌弱毒菌液、豬源多殺性巴氏桿菌弱毒菌液混合,加適宜穩定劑,經冷凍真空干燥制成。
該疫苗多用于預防豬瘟、豬丹毒和豬肺疫。一般不用于首免,多用于60日齡后的肥育豬。
豬瘟疫苗的生產廠家很多,疫苗生產渠道十分復雜,所以應選擇生產設備,技術力量,生產工藝等相對較優的廠家。
RID 是衡量豬瘟疫苗病毒含量高低的一個重要指標。隨著疫病防控難度的加大,每頭份豬瘟細胞苗抗原含量國家標準已經升為750RID,脾淋苗抗原含量國家標準為150RID。實際生產中,大部分疫苗企業的內控標準均高于國家標準(大多數企業宣傳其豬瘟疫苗抗原含量≥7500RID,部分高效苗抗原含量則高達1.2 萬RID)。但RID 并非越高越好,應根據臨床情況選擇適當疫苗進行免疫接種。
疫苗接種后應及時進行抗體檢測,一定的抗體水平是保證防控豬瘟的基礎,但過高的抗體水平可能與豬瘟野毒感染有關。抗體水平不佳時需考慮豬群日齡、免疫時機、檢測時間、非豬瘟苗免疫干擾和臨床表現等多種因素。
3.1 疫苗的儲存和運輸 豬瘟疫苗對運輸和貯藏條件要求較高,凍干苗應在-15℃下貯藏,加耐熱保護劑的疫苗應在2~8℃儲存,在8℃以下冷藏運輸。疫苗稀釋后,如氣溫在15℃以下,應在6 h 內用完,如氣溫在15℃~27℃,應在3 h 內用完。試驗證明,如在夏季早晨剛稀釋的疫苗到傍晚檢測,效價可損失90%左右。
3.2 制定科學的免疫程序 免疫程序包括疫苗選擇、首免日齡、接種次數和接種間隔時間等。制定免疫程序時應考慮當地的疫情和疫病狀況、豬只健康狀況、飼養管理條件和母源抗體水平等因素。如免疫程序不合理、首免提前或推遲、免疫間隔時間不當、接種次數過多或過少等,均會影響疫苗的免疫效果,導致免疫失敗。對仔豬來說,首免日齡的選擇應充分考慮母源抗體的影響,過早則會受到母源抗體干擾,導致母源抗體快速下降和免疫失敗,過晚則存在免疫空白期。生產實踐中只有接種健康豬只,才能產生良好的免疫應答。
3.3 規模豬場推薦免疫程序
3.3.1 豬瘟脾淋組織苗(兔源)
仔豬:超前免疫:出生當天哺喂初乳前,每頭肌注0.5 頭份;35日齡二免,肌注1 頭份;65日齡三免,肌注2 頭份。常規免疫:仔豬23~25日齡首免,每頭肌注1 頭份;65~70日齡二免,肌注2 頭份。飼養育肥豬期間不再接種豬瘟疫苗;培育后備種豬,應于第1 次發情配種前15 d 加強免疫1 次,每頭肌注2 頭份。
生產母豬:每次母豬產仔后15 d 免疫1 次,每頭肌注2 頭份。妊娠期間不接種豬瘟疫苗。
種公豬:每年4月份與9月份各免疫1 次,每次每頭肌注2 頭份。
3.3.2 ST 豬瘟傳代細胞疫苗
仔豬:超前免疫:1日齡每頭肌注0.5 頭份,35日齡肌注1 頭份,70日齡肌注2 頭份。常規免疫:25~30日齡,每頭肌注1 頭份,60~65日齡,肌注2頭份。經上述免疫后,飼養育肥豬期間不再接種豬瘟疫苗;培育后備種豬,應于發情配種前20 d,加強免疫接種1 次,每頭肌注2 頭份。
生產母豬:產仔后10 d 免疫接種1 次,每頭肌注2 頭份。
種公豬:每年4月份與9月份免疫接種1 次,每次每頭肌注2 頭份。
3.4 稀釋液的使用 豬瘟苗生產廠家一般均配備稀釋液,但三聯稀釋液的選用應區別對待。20%氫氧化鋁生理鹽水可減緩注苗后的應激反應,延長免疫保護期,有利于豬丹毒和豬肺疫的免疫效果,但可加速豬瘟弱毒的降解。滅菌生理鹽水則可減少牛睪丸細胞的影響,減緩豬瘟弱毒的降解,有利于豬瘟疫苗的免疫效果。
3.5 其他免疫抑制病的防控 免疫抑制性疾病及各種免疫抑制因素等都可能對豬瘟免疫產生一定干擾,影響豬瘟的免疫效果。因此,在搞好豬瘟免疫的同時,還要預防多種免疫抑制性疾病,如藍耳病、圓環病毒病、偽狂犬病、細小病毒病、豬流感及喘氣病等,確保豬瘟的免疫效果。