pH敏感結腸寧靶向微丸的制備及體外釋藥性能評價

王英婷 ，韓 勇 ，王宏麗

（1．山東省濟寧市第一人民醫院，山東 濟寧 272000； 2．山東省濟寧市藥品檢驗所，山東 濟寧 272000）

潰瘍性結腸炎是指大腸黏膜層與黏膜下層的炎癥性病變，以潰瘍糜爛為主，主要累及直腸和乙狀結腸，亦可累及全部結腸。王翠云等[1]的研究證明，九芝堂結腸寧灌腸劑治療潰瘍性結腸炎臨床癥狀緩解率高，短期內有效率高于柳氮磺吡啶，且不良反應發生率低，但需灌腸用藥，增加了用藥難度，也影響了患者的遵醫行為[2]。口服結腸靶向給藥方式易于接受，能減輕患者的痛苦和醫護人員的負擔[3]。筆者應用靶向技術對結腸寧進行了制劑延伸性研究，制備了口服結腸寧靶向微丸。

1 儀器與試藥

Mini-250型實驗室型低溫擠出滾圓制丸機（篩孔 0．5 mm，深圳信宜特科技公司）；Mini-XYT型實驗型多功能流化床制粒包衣機（深圳信宜特科技公司）；ZRS-8G型智能溶出度儀（天津因賽科技發展公司）；Agilent 1200型高效液相色譜儀；FA2004A型分析天平（上海天平儀器技術有限公司）；FD-1型真空冷凍干燥機（北京博醫康實驗儀器有限公司）。Eudragit?S100（德固賽化工股份有限公司）；結腸寧灌腸劑（九芝堂股份有限公司，批號為121231）；微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉（安徽山河藥用輔料公司）；沒食子酸對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為 110831-201106，純度為 89．9% ）；純化水（自制），甲醇（色譜純，國藥集團），其他試劑均為藥用級。

2 方法與結果

2．1 色譜條件

色譜柱：Agilent TC-C18柱（250 mm × 4．6 mm，5 μm）；流動相：甲醇 -0．1% 磷酸溶液（5 ∶95）；柱溫：35 ℃ ；流速：0．5 mL ／min；波長：273 nm；進樣量：5 μL。

2．2 結腸寧藥粉制備

取結腸寧灌腸劑，用 1～1．5倍純化水稀釋，-20℃冰凍成塊，然后以真空冷凍機干燥，得結腸寧粉末。

2．3 微丸制備

取結腸寧粉末250 g、微晶纖維素550 g、交聯羧甲基纖維素鈉100 g和羧甲基淀粉鈉100 g，充分混合，以純化水為潤濕劑，制備軟材，經Mini-250型實驗室型低溫擠出滾圓制丸機制備微丸。工藝參數：擠出速度為 50 r／min，滾圓速度為 500 ～900 r／min，滾圓時間為8 min，進風溫度為65℃，物料溫度為45℃，干燥時間為45 min。

2．4 包衣

取290 g Eudragit?S100溶于500 mL異丙醇溶液中，得 A液。取58 g滑石粉，加入250 mL異丙醇中，攪拌至沸石粉被完全濕潤，加入檸檬酸三乙酯29 g，用勻質化器勻化10 min，得混懸液B液。將B液倒入A液，勻質化均化，得包衣液，包衣過程中持續攪拌。將干燥好的500 g微丸放到潔凈的Mini-XYT實驗型多功能流化床進行包衣，分別包衣增重10%，15%，18%。

工藝參數：進風、排風轉速均為2 000 r／min，物料溫度上限為65℃，下限為 36℃，滾圓轉速為 150 r／min，噴液速度為 300～400 mL ／L，霧化壓力為 0．26 MPa。

2．5 釋放度測定

酸中釋放度：以0．1 moL／L鹽酸溶液750 mL為溶出介質，注入每個溶出杯，實際量取的體積與規定體積的偏差不超過1%，待溶出介質溫度恒定于（37±0．5）℃，取 0．5 g微丸，分別投入溶出杯中，供試品表面不應有氣泡，啟動轉速為100 r／min，2 h后在槳葉頂端至液面的中點、距溶出杯內壁不小于6 mm處吸取溶液約 1 mL，0．45 μm 濾膜過濾，自取樣至濾過應在 30 s內完成，檢測液體中沒食子酸的含量，計算微丸在酸中的釋放度。

緩沖液中釋放度：將上述酸液中加入溫度為（37±0．5）℃0．2mol／L磷酸鈉溶液250 mL，繼續運轉 45 min，在槳葉頂端至液面的中點、距溶出杯內壁不小于6 mm處吸取溶液約1 mL，0．45 μm濾膜過濾，自取樣至濾過應在30 s內完成，測定溶液中沒食子酸的含量，計算微丸在緩沖液中的釋放度。

依據2010年版《中國藥典(二部)》附錄中釋放度測定法，Q取85%。包衣增重10%，15%，18%對藥物的釋放有明顯的影響，藥物在人工胃液中（pH＝1）的釋放度隨著包衣膜的增厚而減少，包衣增重為15%時已達2010年版《中國藥典(二部)》中釋放度小于10%的要求，包衣增重18%的控釋效果更佳。結果見表1。

3 討論

丙烯酸樹脂是由丙烯酸和甲基丙烯酸及其酯，以一定比例共聚而成的一類高分子聚合物，為《美國藥典／國家處方集》收載品種，具有安全、穩定、惰性、無刺激、成膜性能優良、各型號間相容性好等優點，國外已廣泛應用于薄膜包衣、骨架制劑、微球及透皮等給藥系統[4]。以檸檬酸三乙酯為增塑劑時，膜的機械性能和成膜性較好[5]。本試驗使用的主要包衣材料為Eudragit?S100，增塑劑為檸檬酸三乙酯，滑石粉為抗黏劑，比例分別為76．9%，15．4%，7．7%，包衣增重達到15%和18%時，在鹽酸緩沖液和磷酸鹽緩沖液中的釋放度均已滿足《中國藥典》結腸靶向的標準要求，配比合理。

結腸靶向給藥的生理學基礎之一是胃腸道逐漸遞增的pH梯度，從胃到直腸pH不斷增大，結腸約為7．4，小腸相對穩定的轉運時間一般為(224±55)min。pH依賴釋藥系統主要通過用pH敏感材料進行包衣的方法來實現。作為理想的結腸靶向包衣材料，能耐受胃酸而不溶解，在回腸末端中性或弱堿性條件下溶解或蝕解[6]。本研究中制備的包衣增重15%和18%的靶向結腸寧顆粒，在 pH＝1的環境下 2 h，釋放度僅為 9．67%和 6．50%，說明該包衣顆粒不易受胃酸和胃運動的影響。液體環境由pH＝1轉為pH＝6．8后45 min，包衣增重15%和18%藥物顆粒的累積釋放量迅速達到98．80%和98．87%，差異不顯著。達到《中國藥典》釋放度不低于 Q值（85%）的要求，說明該藥物在磷酸鹽緩沖液中得到充分的釋放，能實現在結腸的靶向釋放。

以Eudragit?S100、滑石粉和檸檬酸三乙酯為包衣材料，包衣增重15%以上，能制備出比較理想的結腸寧靶向微丸，且采用擠出滾圓再包衣技術，生產工藝過程簡單，易于推廣。

[1]王翠云，陳繼紅，夏 斌，等．結腸寧保留灌腸治療潰瘍性結腸炎的療效評價[J]．現代中西醫結合雜志，2011，20（16）：1 962-1 963．

[2]方建青．影響潰瘍性結腸炎藥物治療遵醫行為相關因素病例對照研究[J]．中國藥業，2012，21（1）：62-63．

[3]陳 重．口服結腸靶向給藥系統的研究現狀[J]．中國藥業，2002，11（2）：76-77．

[4]張立超，胡晉紅，連佳芳，等．丙烯酸樹脂在薄膜包衣中的應用[J]．中國醫院藥學雜志，2001，21（5）：301-302．

[5]張國松，封傳華，江 魏，等．增塑劑及膜材比例對 Eudragit L100／S100游離膜機械性能和透濕性的影響[J]．藥學學報，2011，46（9）：1 144-1 149．

[6]鄧子華，鄧虹珠．中藥口服結腸靶向給藥系統的研究進展[J]．現代中西藥結合雜志，2007，16（8）：1 150-1 152．