代謝綜合征患者脂聯素基因多態性與胰島素抵抗的相關性

薛 磊，李丹丹，龐嫵燕

(河南大學淮河醫院，河南開封475000)

代謝綜合征(MS)是胰島素抵抗引發機體多種代謝成分異常聚集的一種代謝紊亂癥候群，臨床表現為血脂紊亂、肥胖、高血壓、高血糖等［1］，其發病率近年呈明顯上升趨勢。研究發現，60%～80%的糖尿病患者表現為MS，由此導致的心血管、肥胖、糖尿病等疾病顯著增加［2］。MS的發生機制十分復雜，目前認為與遺傳、環境、胰島素抵抗、炎癥反應等多種因素有關，近年來脂聯素(APN)與胰島素抵抗的關系逐漸成為MS的研究熱點［3］。本研究探討了APN-11391位點基因多態性及胰島素抵抗與MS的關系，為闡明MS的發生機制提供依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年1～12月我院初診的MS患者264例，均符合文獻［4］制定的診斷標準，男122例、女142例，年齡23～76(48.42±14.36)歲。同期健康體檢者260例為對照組，其中男135例、女125例，年齡20～78(49.84±15.12)歲。兩組年齡、性別具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 采集受試者空腹靜脈血3 mL，離心取血清，ELISA法檢測APN水平，同時檢測空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、胰島素(FIN)等生化指標。采用穩態模型評估法(HOMA)計算胰島素抵抗指數(HOMAIR)=FIN × FPG/22.5。

1.2.2 基因型分型 采集空腹靜脈血2 mL，利用DNA抽提試劑盒提取外周血DNA，以DNA為模板在30 μL反應體系內進行APN-11391位點PCR擴增，上下游引物分別為5'-ACTAGTCTCACCAGCCGTGAC-3'，5'-TGGCCTTTGAGGTAGTCACAG-3';反應條件:95℃預變性8 min，95℃變性1 min、59.5℃退火1 min、72℃延伸1 min進行30個循環，72℃延伸10 min。DNA擴增產物進行限制性內切酶HhaⅠ酶切反應，分為純合野生型(GG基因型)、純合突變型(AA基因型)和雜合突變型(GA基因型)。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件，結果以±s表示，數據的比較采用t檢驗和χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床資料比較 觀察組血清 APN和HDL-C水平均低于對照組，HOMA-IR、FPG、FIN、TG和BMI均高于對照組(P均＜0.05)。見表1。

2.2 兩組APN-11391位點基因型與等位基因頻率比較 觀察組APN-11391位點A等位基因頻率明顯高于對照組(P＜0.05)，APN-11391位點突變基因型頻率明顯高于對照組(P＜0.05)。見表2。

2.3 觀察組APN-11391位點不同基因型的APN、HOMA-IR比較 觀察組按基因型分為GG型和GA+AA型(由于AA型病例較少，故將GA與AA型合并)，兩組血清 APN 分別為(3.72 ±1.33)、(2.96 ±1.53)ng/mL，HOMA-IR 分別為 4.54 ±1.56、6.23 ±2.31，組間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。

表1 兩組臨床資料比較(±s)

表1 兩組臨床資料比較(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05

組別 n APN(ng/mL) HOMA-IR FPG(mmol/L) FIN(mU/L) TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)BMI(kg/m2)對照組 260 3.87 ±1.26 2.49 ±0.73 4.93 ±1.13 11.32 ±5.36 1.56 ±0.53 1.23 ±0.32 22.97 ±6.14觀察組 264 2.08 ±0.72* 5.04 ±1.75* 8.36 ±2.04* 13.64 ±8.75* 2.48 ±0.86* 0.81 ±0.31* 28.33 ±8.73*

表2 兩組APN-11391位點等位基因及基因型頻率分布情況［例(%)］

2.4 觀察組血清APN與HOMA-IR的相關性 相關性分析顯示，觀察組血清APN水平與HOMA-IR呈負相關(r= －0.634，P ＜0.05)。

3 討論

MS發病機制復雜，胰島素抵抗是其基本病理生理基礎，APN在其發生發展過程中起重要作用。APN是脂肪細胞分泌的一種重要細胞因子，編碼基因位于染色體3q27區，全長16 kB，包括2個內含子和3個外顯子［5］。APN與相應受體結合后可誘導胰島素分泌、葡萄糖攝取、抑制巨噬細胞轉化和血管平滑肌細胞增殖等生物學效應，產生降低血糖、增加胰島素敏感性、調節血脂代謝以及抗炎等多種作用，其低表達與MS的發生密切相關［6，7］。APN基因存在多處易突變位點，但大多數不引起APN氨基酸改變，近年研究發現，APN－11391位點突變可影響APN的轉錄活性和功能表達，使血清APN水平大幅降低，進而增加MS的患病風險。本研究顯示，APN－11391位點存在基因多態性，且突變等位基因和突變基因型頻率均明顯高于對照組，與文獻報道相符。說明APN啟動子區－11391位點G→A突變，錯義編碼突變可導致APN轉錄和表達發生異常，引起機體生化指標發生一系列改變，增加MS發病的風險［8～10］。將觀察組按基因型進行分類，發現 GA+AA基因型血清APN水平明顯低于GG基因型，而HOMA-IR明顯高于GG基因型，提示APN－11391位點發生突變，導致血清APN水平降低，繼而機體抑制外周組織攝取和利用葡萄糖，減慢脂肪酸氧化，增高血糖濃度，并促進脂肪酸與膽固醇生成，使肝糖原的合成和輸出上升，誘導發生胰島素抵抗，從而促進 MS 的發生［11，12］。另外，本研究也發現，觀察組血清APN水平與HOMA-IR呈明顯負相關，進一步提示兩者相互作用，共同參與MS發生。

總之，APN－11391位點GA和AA突變基因型是MS的危險基因型，且影響血清APN水平及胰島素抵抗，兩者相互作用，與MS的發生密切相關。

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