趙春萍,曹 婷,施力光,張立嶺,侯冠彧*
(1.中國熱帶農業科學院 熱帶作物品種資源研究所,海南 儋州571737;2.海南大學 農學院,海南 ???70228)
RNA 干擾(RNA interterence,RNAi)具有高度保守的特點,普遍存在于動植物體內,是由雙鏈RNA引起的特異性沉默靶基因的免疫應答反應。RNAi技術能特異性抑制生物體內源功能基因的表達,進而通過表型或生理生化指標的變化來反映該基因的功能。隨著基因組測序工作的完成,我們也逐漸進入了后基因組時代,基因的功能分析已成為現在的科研重點。自發現RNA干擾現象普遍存在線蟲、果蠅、小鼠和植物等生物體內以來,RNAi已發展成為一種簡便、快速、高效的分析基因組功能的有力工具,也為由基因到功能的反向遺傳學途徑提供了功能研究的橋梁。
在哺乳動物中,研究基因組功能最為常用的方法是通過同源重組進行基因打靶(Gene target)達到基因敲除(Knock out)的目的,但是這種方法往往會造成細胞凋亡,而且也不適用于未建立胚胎干細胞的動物。同時,基因打靶也存在操作難、周期長等缺點。在線蟲、果蠅和植物中,RNAi成功應用的長雙鏈RNA(>29 bp)又不可避免干擾素效應導致的全面關閉蛋白合成的后果[1]。2001年,Caplen等[2]和Elbashir等[3]發現短至21~22 nt的小分子干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)能夠在哺乳動物細胞中誘導有效的RNAi,而不誘發干擾素反應。這一研究的發現全面開啟了RNAi技術在哺乳動物中應用的新篇章。本文主要針對近幾年RNAi在畜禽方面的研究進展做出總結與展望。
隨著RNAi生化和遺傳學知識、數據的積累,科學家們已證實RNAi是由dsRNA誘導的多步驟、多因素參與的過程,但其真正的機理暫時還不清楚?!?br>