3000例兒童泌尿道感染細菌培養及藥敏試驗結果分析

[摘要] 目的 探討兒童泌尿道感染的病原菌分布和耐藥特征，指導臨床合理使用抗生素。 方法 收集我院3000例門診和住院兒童泌尿道感染和患者清潔中段尿，用平板接種法進行細菌培養，全自動細菌鑒定分析儀進行細菌鑒定，并用K-B紙片擴散法進行藥敏試驗。 結果 3000份尿液中分離出細菌528株（17.6%），其中病原菌主要為大腸埃希菌（G-）、葡萄球菌（G+）、糞腸球菌（G+）以及真菌；藥敏試驗結果顯示三種主要致病菌對多種抗生素耐藥性高。 結論 明確泌尿道感染的病原菌分布及這些病原菌對抗生素的敏感性和耐藥性，對臨床上兒童合理使用抗生素有重要意義。

[關鍵詞] 泌尿道感染；細菌鑒定；K-B紙片擴散法；抗生素

[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）14-113-03

Analysis of 3000 cases of children with urinary tract infection， bacterial culture and drug sensitivity test results

LU Shaohua ZHANG Min CAI Hengyang

Central Hospital of Donggang City，Donggang 118300，China

[Abstract] Objective To investigate the distribution and drug resistance characteristic of pathogens from urinary tract infection （UTI） in children，and guide the rational use of antibiotics in clinic. Methods The clean urine of 3000 patients with UTI were collected in our hospital， bacteria were cultured in plates， identified with automated bacterial identification analyzer，and the drug sensitivity test was performed with K-B disk diffusion method. Results 528 strains were isolated from 3000 urine （17.6%）， including Escherichia coli（G-），Staphylococcus aureus（G+），Enterococcus faecalis（G+），fungi，et al.The K-B disk diffusion method showed pathogens had high resistance to many antibiotics. Conclusion Our study confirmed the distribution and drug resistance characteristic of pathogens from urinary tract infection in children，which provides basis for rational use of antibiotics for children in clinic.

[Key words] Urinary tract infection；Bacterial identification；K-B disk diffusion method；Antibiotics

泌尿道感染（urinary tract infections，UTI）是指病原菌侵入尿路，在尿液中生長繁殖，導致尿路黏膜或組織受損，引起腎盂炎、尿道炎以及膀胱炎，嚴重影響人們的生活質量，特別是少兒時期[1]。為避免泌尿道感染中細菌的迅速繁殖和傳播，引起更嚴重的疾病，UTI一般需用抗生素進行治療[2-3]；但兒童對抗生素的使用較為敏感，因此明確UTI中病原菌的分布及其耐藥特征，可為兒童合理使用抗生素提供依據，恢復兒童的健康，減少家長的擔心。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月～2012年12月我院3000例門診和住院兒童泌尿道感染患者清潔中段尿5 mL，收集時，需消毒尿道口，尿液置于無菌試管中，整個過程注意無菌操作，采集的尿液標本應及時送檢。

1.2 細菌分離和培養

取10μL尿液均勻接種到血瓊脂平板上，35℃孵箱中培養24 h，觀察菌落形態并計數，用革蘭染色區分革蘭氏陽性球菌（G+）和革蘭氏陰性桿菌（G-），當G+≥104 CFU/mL，G-≥105 CFU/mL，真菌≥103 CFU/mL，且每個標本重復3次結果相同，判斷標本為陽性，送往鑒定。具體操作參照《全國臨床檢驗操作規程》[4]。

1.3 細菌鑒定

細菌鑒定采用VITEK-AMS細菌鑒定系統（BioMerieux，France），所需試劑為儀器配套試劑，鑒定完后用儀器自帶軟件分析細菌種屬及分布，并結合《全國臨床檢驗操作規程》進行確認。

1.4 藥敏試驗

藥敏試驗采用K-B紙片擴散法，培養基為M-H培養基，厚4 mm，pH 7.4；紙片購買自英國OXOID公司，厚1 mm，直徑6～6.35 mm，pH 7，每片紙片包含1μg苯唑青霉素、30 g頭孢曲松、30μg頭孢哌酮、30μg頭孢他啶、10μg克拉維酸、1μg環丙沙星、10μg慶大霉素、10μg亞胺培南、100μg派拉西林、30μg阿米卡星、30μg萬古霉素、30μg復方磺胺、30μg多黏菌素、30μg氨芐西林。

1.5 質量控制

用衛生部臨床檢驗中心提供的大腸埃希菌（ATCC 25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC 25923）、銅綠假單胞菌（ATCC 27853）和糞腸球菌（ATCC 29212）作質控標準參考菌株。

2 結果

2.1 病原菌分布

在3000例兒童泌尿道感染的尿液標本中，共分離出528株菌株，標本陽性率為17.6%。其中革蘭氏陽性菌215株（40.7%），主要包括金黃色葡萄球菌、糞腸球菌和表皮葡萄球菌等菌株；革蘭氏陰性菌259株（49.1%），主要包括大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和變形桿菌等細菌；真菌54株，占總菌株的10.2%。病原菌種類及構成比見表1。

2.2 藥敏試驗

我們對3種主要的病原菌，即大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和糞腸球菌，進行了K-B紙片擴散法藥敏試驗。結果發現大腸埃希菌對頭孢哌酮、亞胺培南和阿米卡星敏感率非常高，分別為100.0%、100.0%和98.2%；金黃色葡萄球菌對萬古霉素、慶大霉素和克拉維酸敏感率較高，分別為100.0%、99.4%和97.2%；糞腸球菌對萬古霉素和氨芐西林敏感率較高，分別為100.0%和97.3%。見表2。

3 討論

UTI分為上尿路感染和下尿路感染，上尿路感染又稱腎盂炎，下尿路感染包括膀胱炎和尿道炎，小兒時期UTI可占兒童泌尿襲擊病的20%左右，且女性發病率高于男性[5]。當兒童機體免疫力下降時，會引起泌尿系統異常，尿液滯留，從而導致膀胱防御細菌的能力下降，使病原菌入侵引發泌尿道感染[6]。

在本研究中，我們分離培養的病原菌主要為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌以及大量真菌，其中革蘭氏陰性菌主要是大腸埃希菌，革蘭氏陽性菌主要包括金黃色葡萄球菌和糞腸球菌，除此之外，表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌和變形桿菌等菌株也占有一定的數量，真菌所占比例高達10%，表明真菌感染有增加的趨勢，這與長期使用抗菌藥物有關，也可能和泌尿系統插管和導尿等操作相關。在之前的研究中，齊寶宏[7]采集住院患者清潔中段尿液進行細菌培養、鑒定和藥敏試驗，發現致病菌主要是大腸埃希菌，且耐藥性高；蘭宇等[8]同樣收集247例尿路感染患者尿液標本進行病原菌培養、鑒定和藥敏實驗，結果發現主要致病菌為大腸埃希菌和腸球菌。這些實驗結果和我們的研究大致相同，但他們的實驗中真菌并不多，且患者為成人，沒有專門針對兒童泌尿道感染致病菌進行鑒定。我們的研究病例多，且分離菌株陽性率高，為兒童泌尿道感染致病菌的分布有了詳細的說明，為治療兒童泌尿道感染提供了依據。通常情況下，UTI是以革蘭氏陰性革為主，但是近年來由于免疫抑制劑和頭胞菌素類抗生素的大量使用，導致腸球菌屬這種條件致病菌大量感染泌尿道[9]，呈上升趨勢；我們的結果也表明革蘭氏陽性菌的感染增加了，金黃色葡萄球菌和糞腸球菌分別占總菌株的第2位和第3位。

近年來，由于抗生素的大量使用甚至濫用，細菌的敏感譜不斷變化，耐藥性逐漸增加，并且出現了多重耐藥現象[10]；因此，抗生素的使用越來越混亂。如何合理選用抗生素已成為臨床醫生們越來越關注的問題。本研究用K-B紙片擴散法對最主要的3種致病菌進行了藥敏試驗，結果發現大腸埃希菌對頭孢哌酮、亞胺培南和阿米卡星敏感率非常高，而金黃色葡萄球菌對萬古霉素、慶大霉素和克拉維酸敏感率較高，糞腸球菌對萬古霉素和氨芐西林敏感率較高；而大腸埃希菌對環丙沙星、復方磺胺和多粘菌素的耐藥性較高，而金黃色葡萄球菌和糞腸球菌對頭孢哌酮、頭孢曲松和阿米卡星顯示出較高的耐藥性。這些結果和之前的研究有相似的地方，也有非常不同的結果[7-8]，這可能與近年來抗生素的大量使用密切相關。

我們的實驗結果表明不同的菌株其耐藥性有明顯的不同，常用的抗生素已不能滿足抗感染治療的需求，因此，臨床醫生應重視感染細菌的培養、鑒定和藥敏試驗，從而合理的使用抗生素，而不能按照經驗亂用，濫用抗生素。本研究可為兒童合理使用抗生素提供依據，恢復兒童的健康，減少家長的擔心。

[參考文獻]

[1] Buonsenso D，Cataldi L.Urinary tract infections in children：a review[J].Minerva Pediatr，2012，64（2）：145-157.

[2] Foon R，Toozs-Hobson P，Latthe P.Prophylactic antibiotics to reduce the risk of urinary tract infections after urodynamic studies[J].Cochrane Database Syst Rev，2012，17（10）：CD008224.

[3] Fitzgerald A，Mori R，Lakhanpaul M，et al.Antibiotics for treating lower urinary tract infection in children [J].Cochrane Database Syst Rev，2012，15（8）：CD006857.

[4] 葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].第2版.南京：東南大學出版社，1997：472.

[5] Zhou J，Zhao Y，Guo W，et al.The clinical evaluation of piperacillin and sulbactam sodium in treatment of respiratory， urinary tracts and other infections in 579 patients[J].Zhonghua Nei Ke Za Zhi， 2011，50（7）：601-603.

[6] Alter SJ，Vidwan NK，Sobande PO，et al.Common childhood bacterial infections[J].Curr Probl Pediatr Adolesc Health Care，2011，41（10）：256-283.

[7] 齊寶宏.泌尿道感染細菌培養及藥敏試驗結果分析[J].西南軍醫，2009，11（4）：690-691.

[8] 蘭宇，劉姣，賽海芳.尿路感染病原茵分布及藥敏分析[J].中國臨床實用醫學，2010，4（1）：172-173.

[9] Guiton PS，Hannan TJ，Ford B，et al.Enterococcus faecalis overcomes foreign body-mediated inflammation to establish urinary tract infections[J].Infect Immun，2013，81（1）：329-339.

[10] Cohen-Nahum K，Saidel-Odes L，Riesenberg K，et al.Urinary tract infections caused by multi-drug resistant Proteus mirabilis： Risk factors and clinical outcomes[J].Infection，2010，38（1）：41-46.

（收稿日期：2013-05-10）