濕性療法對創面表皮干細胞影響的研究

[摘要] 目的 研究分析濕性療法對臨床常見創面的促進愈合作用，并觀察表皮干細胞變化。 方法 選擇我院2010年2月～2012年3月收治的40例患者為研究對象，隨機分為兩組，對照組給予常規治療，試驗組患者均給予濕性療法，觀察創面愈合情況，計算愈合天數。取試驗開始時、試驗中期和結束時創面組織，制作HE染色切片，觀察創面發生的變化；檢測試驗開始時、試驗中期和結束時β1整合素的變化情況。 結果 試驗組患者愈合天數少，與對照組比較有顯著差異（P < 0.05）；試驗組β1整合素明顯高于對照組，組間比較有顯著差異（P < 0.05）。 結論 濕性療法對創面愈合具有促進作用，可以促進表皮干細胞的生長，值得應用。

[關鍵詞] 濕性療法；創面；表皮干細胞；愈合

[中圖分類號] R644 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）30-0028-02

創面愈合是一個復雜的過程，是多種細胞和細胞因子協調促進創面愈合的過程。從分子生物學角度，創面愈合是修復細胞進行增值、分化、遷移、凋亡并消失的過程，是不同類型細胞、結構蛋白、生長因子與蛋白激酶組成的網絡式交互作用的效果[1.2]。而如何有效地促進創面愈合是臨床研究的熱點。本文研究分析濕性療法對創面的促進愈合作用，分析濕性療法下表皮干細胞的變化，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇我院2010年2月～2012年3月收治的40例患者（80個創面）為本次試驗的研究對象。排除糖尿病、自身免疫病等患者。患者選擇同體雙側對照（雙側上肢或雙側下肢受傷過程一致深度）。其中男26例，女14例，年齡25～48歲，平均（35.25±7.55）歲；創傷類型：淺Ⅱ°燒傷26例，深Ⅱ°燒傷14例；創面面積10%～30%，平均（15.35±7.53）%，兩組患者性別、年齡和創面情況等差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究獲得我院倫理委員會批準和患者知情同意。

1.2方法

對照組采用常規臨床治療，為創面提供相對干性環境，在創面徹底清創后，將創口周圍擦拭干凈，使用磺胺嘧啶銀霜（新鄉市華信藥業有限公司，國藥準字H20094208）加油紗（新鄉市華西衛材有限公司，國食藥監楲（準）字2010第3640604）外層紗布包扎。每日換藥，持續7 d后根據創面滲出情況隔天換藥，直至創面完全愈合。試驗組采用濕性療法。首先對創面進行徹底的清創，將創口周圍擦拭后，應用法國力博瑞優格公司提供的系列濕性治療敷料產品安普貼[<國食藥監械（進）字2008第3642224號]覆蓋創面，進行創面床的準備（wound bed preparation）及治療。持續7 d每日換藥一次，之后根據患者的創面情況調整換藥次數，直到創面完全愈合。所有患者在治療過程中，未使用全身性抗生素治療，其他全身治療基本一致。

1.3觀察指標

觀察統計兩組患者的創面愈合時間并記錄。取試驗開始時、試驗中期（治療第7天）和結束時創面組織，制作HE染色切片，觀察創面發生的變化：上皮細胞、成纖維細胞。檢測試驗開始時、試驗中期和結束時β1整合素表達情況。β1整合素進行免疫組化特殊染色，其中細胞膜為棕黃色為陽性細胞，設定標準灰度，并選擇5張切片，計算平均灰度[2]。

1.4統計學處理

計量資料采用（x±s）表示，使用t檢驗進行組間對比。統計學軟件采用SPSS17.0軟件包。以α=0.05為檢驗水準，可信區間范圍為95%，P < 0.05為差異有統計學意義。

2結果

試驗組患者愈合天數少，與對照組比較差異有統計學意義（P < 0.05）；試驗組β1整合素灰度值在治療中期明顯高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。試驗前和試驗結束時兩組患者的β1整合素灰度差異無統計學意義（P > 0.05）。見表1。

表1 兩組患者的創面愈合時間和β1整合素陽性率比較（x±s）

3討論

現階段的臨床實驗研究資料證實：對于細胞，特別是表皮干細胞而言，其所對應的周期表現與生理性的再生、創傷修復之間關系極為密切[3]。通過臨床觀察的方式驗證：部分細胞長期停滯在G0、或者是G1周期當中，需要在滿足一定條件支持的情況下，此類表皮干細胞才能會出現相關的增生活動[4]。同時，對于部分細胞而言，也極有可能進行持續性的分裂反應活動，在分裂活動狀態下所生成的分子細胞能夠具備對一定功能執行的能力，即產生至少一種以上高度分化子代細胞潛能的細胞，這就是本文所研究的干細胞[5]。干細胞通常處于靜息狀態，分裂緩慢，在形態學上表現為細胞體積小，胞內細胞器稀少，細胞內RNA含量低，在組織結構中位置相對固定[6]。對于形成于人體皮膚表面基底層區域的干細胞而言，無法持續進行分裂活動。因此，在前期分裂過程當中所生產的相關細胞成分能夠逐步向上部區域發生移動反應，進而在深部區域內產生相應的二次、或者是三側分裂，最終導致細胞發生分裂反應的能力終止[7，8]。更加關鍵的一點在于：在患者表皮再生干細胞發生移動、以及分裂反應的情況下，這部分細胞仍然具有相應的移動能力，這可以說是成熟性表皮細胞當中所特有的典型角蛋白成分。正是由于表皮干細胞當中存在這部分相應的角蛋白成分，因此也使得濕性療法在治療創面傷過程中的優勢突出，能夠達到促進創面變頻干細胞激活反應以及增生反應的重要目的。

濕性療法是臨床對創面進行治療的一種方法，首先在1962年提出，并研制出創面敷料。以往臨床使用的干燥傷口，由于缺少膠原酶和促進膠原酶作用的微環境，不能促進表皮細胞的游動，不利于傷口愈合[9]。 濕性環境在傷口覆蓋了封閉或者半封閉的敷料，使傷口創面處于濕性環境中，其優勢在于：可以有效地促進纖維蛋白及壞死組織的溶解；能夠為傷口提供一個低氧環境，并促進毛細血管的有效生成；同時濕性環境還可以促進生長因子的釋放，并調節生長因子活性；患者在治療期間的疼痛感較為輕微，且減少了換藥過程中的再損傷。

從我院本次試驗結果我們也可以看出，試驗組患者治療后的創面愈合天數明顯短于對照組患者，組間比較有顯著差異（P < 0.05）。 同時，本次試驗還研究了濕性療法對表皮干細胞的影響。表皮干細胞是皮膚干細胞的棲息地，其對毛囊的生長、新陳代謝和改建均有關鍵的作用，可以促進表皮損傷后的修復。表皮干細胞有個顯著的特點是對基底膜的黏附，干細胞主要通過表達整合素（integrins）實現對基底膜各種成分的黏附[10]。我們通過β1整合素對表皮細胞進行分析。β1整合素是細胞黏附分子家族中一類比較重要的分子，是介導細胞和細胞外基質的相互作用的主要的受體，參與細胞信號傳導、細胞黏附、遷移，控制細胞分化、增殖等多個過程，β1整合素被認為是表皮干細胞的一種表面標志物，其在表皮干細胞和短暫擴充細胞具有高表達[11]。從本次試驗結果也可以看出，試驗組患者β1整合素明顯高于對照組患者，組間比較有顯著差異（P < 0.05）。說明濕性治療對創面表皮干細胞具有促進作用。正常情況下表皮干細胞通過增殖分化維持表皮細胞的種類及數量，在皮膚受到損傷時，表皮干細胞便成為創面修復的細胞源泉，通過先成為短暫擴充細胞后，再分化成各種不同的細胞以促進創面愈合[6]。

綜上所述，濕性療法對創面愈合具有促進作用，其可以促進表皮干細胞的生長，值得應用。

[參考文獻]

[1] 李永濤，王喜梅，喬曉俊，等. 糖尿病創面表皮干細胞增殖分化相關蛋白的研究[J]. 中國美容醫學，2010，19（8）：1171-1172.

[2] 柴琳琳，曹川，趙樹文，等. Rac1蛋白調控表皮干細胞遷移促進創面愈合的研究[J]. 中華燒傷雜志，2011，27（3）：205-209.

[3] 宋寧，富玲，辛暢泰，等. 皮膚全層缺損真皮修復不同階段對表皮再生的影響[J]. 中國組織工程研究與臨床康復，2010，14（41）：7631-7634.

[4] 毛慶龍，梁自乾. 深Ⅱ度燒傷創面磨痂治療后殘留皮膚組織中表皮干細胞標記物角化蛋白19的表達[J]. 中國組織工程研究與臨床康復，2009，13（27）：5301-5304.

[5] 鐘清玲. 羊膜負載表皮干細胞促進糖尿病大鼠創面的愈合[J]. 中國組織工程研究與臨床康復， 2010，25（32）：167-168

[6] 李建福，付小兵，盛志勇，等. 創面愈合過程中表皮干細胞的分布特征及意義[J]. 解放軍醫學雜志，2010，11（7）：223.

[7] 付小兵. 進一步重視體表慢性難愈合創面發生機制與防治研究[J]. 中華創傷雜志，2004，20（8）：449-451.

[8] 李建福，付小兵，盛志勇. 創面愈合過程中創緣表皮干細胞的異位[J]. 中國修復重建外科雜志，2006，20（3）：264-267.

[9] Oberleya C，Gourronca F，Hakimia S. Murine epidermal side population possesses unique angiogenic properties[J]. Experimental Cell Research，2008，314（4）：720-728.

[10] 田曉紅，柏樹令，田偉. 表皮干細胞在糖尿病創面愈合過程中的動態變化[J]. 中國修復重建外科雜志，2007，21（7）：693-697.

[11] 付小兵，李建福，盛志勇. 表皮干細胞：實現創面由解剖修復到功能修復飛躍的新策略[J]. 中華燒傷雜志，2003，19（1）：5-7.

（收稿日期：2013-07-03）