糯玉米基因組DNA提取方法的比較

摘 要：以糯玉米的胚為材料，采用SDS法、CTAB法和堿煮法提取糯玉米基因組DNA，樣品經紫外分光光譜吸收、瓊脂糖電泳、PCR擴增和酶切試驗檢測，表明SDS法所提DNA濃度較高，質量較好；CTAB法提取的DNA中氯仿等殘留量少，安全、經濟，具有較強的實用性；而堿煮法提取的DNA濃度較低，但提取過程簡單，使用的藥品少，快速，適合用于PCR快速檢測所需DNA。

關鍵詞：糯玉米；基因組DNA；種胚；提取

中圖分類號 S513 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）15-19-03

Comparison on Three Methods of Extracting Waxy Maize Genomic DNA

Zhao Qiancheng et al.

（College of Plant Science，Anhui Science and Technology University，Fengyang 233100，China）

Abstract：The genomic DNA was extracted from dry seed of waxy maize embryo as material while using the method of SDS，CTAB and NaOH buffer.After detected by UV spectrophotometer and agarose gel electrophoresis，the DNA extracted by the SDS method had high purity and integrity，and the DNA extraction of CTAB buffer had advantages of economy，safety with high practicality，which could completely meet the needs of RAPD-PCR and the digestion of the restriction endonuclease.But the extracted DNA using NaOH buffer were low concentration，which suitable for the required DNA of the rapid detection of PCR with advantages of simple，rapid process，and less drugs.

Key words：Waxy corn；Genomic DNA；Embryo；Extraction

糯玉米其質粘軟、營養豐富、風味獨特，深受廣大城鄉居民的喜愛，隨著消費市場日益擴大，巨大的市場需求潛力促進了糯玉米遺傳育種的改良，目前我國糯玉米遺傳育種正處于一個最佳的快速發展期[1]。

隨著分子生物學和基因組學的發展，分子育種技術逐漸滲透到糯玉米育種工作中，以DNA多態為基礎的分子標記在糯玉米種質資源遺傳多樣性分析、雜種優勢群劃分、品種純度鑒定及分子標記輔助選擇育種等方面得到廣泛應用[2]。快速提取高質量基因組DNA是進行分子標記等分子生物學下游實驗的基礎[3]。有關植物基因組DNA提取方法的研究報道很多，主要有CTAB法和SDS法[4]，且多采用植物的葉片提取基因組DNA的方法，季節性明顯。本研究以糯玉米種子的胚（浸泡后）為提取材料，采用SDS法、CTAB法和堿煮法提取糯玉米基因組DNA，并對其結果進行比較分析，以滿足糯玉米分子育種的需要。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 糯玉米雜交種鳳糯2146，由安徽科技學院玉米育種安徽省工程技術研究中心提供。……