GC法測定30種黔產(chǎn)中藥材中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留

摘要：建立了氣相色譜法測定中藥材飲片中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的方法。色譜柱為LD-OV-1701（30 m×0.32 mm× 0.32 μm），配備電子捕獲檢測器。結(jié)果表明，在0.02～0.30 μg/mL范圍線性關(guān)系良好（r>0.995），平均回收率為83.13%～112.18%，RSD為3.85%～11.57%。本方法檢出限高、準(zhǔn)確、快速，適用于30種黔產(chǎn)中藥材中11種有機(jī)氯農(nóng)藥的測定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜；有機(jī)氯農(nóng)藥殘留；黔產(chǎn)中藥材

中圖分類號：O657.7+1；R288 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）16-3966-03

有機(jī)氯農(nóng)藥是一種廣譜高毒殺菌殺蟲劑[1]，曾被廣泛使用，但由于毒性強(qiáng)、難分解，我國在20世紀(jì)80年代末宣布禁止使用DDT、六六六等有機(jī)氯農(nóng)藥[2，3]。目前，我國中藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥的檢出率較高[4-9]，不僅是中藥材質(zhì)量安全的重要隱患，也是制約我國中藥材走向國際市場的主要障礙[10]。2007年我國共有11批枸杞及其相關(guān)產(chǎn)品因農(nóng)殘超標(biāo)而被美國FDA拒絕入境[11]。貴州省是4個國家中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)基地建設(shè)省份之一，有中藥材資源4 290種，對貴州經(jīng)濟(jì)發(fā)展至關(guān)重要。目前，貴州中藥材GAP基地的26種中藥材和土壤中的9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留已有報道，但是黔產(chǎn)中藥材飲片中的有機(jī)氯農(nóng)殘報道較少。本試驗采用氣相色譜法測定了黔產(chǎn)30種中藥材飲片中11種有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留含量，旨在為中藥材飲片中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

30種中藥材：花椒、桔梗、吳茱萸、黃柏、天麻、金銀花、杜仲、薏苡、五倍子、苦蕎頭、白花前胡、何首烏、淫羊藿、茯苓、石斛、白芨、重樓、半夏、太子參、白術(shù)、厚樸、魚腥草、鉤藤、天冬、黃精、板藍(lán)根、玄參、瓜蔞、喜樹、毛慈菇（以上樣品均購于貴陽藥材市場）。

分析純丙酮、正己烷、二氯甲烷、石油醚（60～90 ℃），購于天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；無水硫酸鈉，研細(xì)450 ℃烘4 h，購于上海廣諾化學(xué)有限公司；濃硫酸（優(yōu)級純），購于國藥集團(tuán)；水為去離子水。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：六氯苯、α-六六六（α-BHC）、五氯硝基苯（PCNB）、γ-六六六（γ-BHC）、七氯、β-六六六（β-BHC）、δ-六六六（δ-BHC）、P，P′-DDE、O，P′-DDT、P，P′-DDD、P，P′-DDT，均購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所，濃度均為100 μg/mL。

1.2 儀器

Agilent 6890N型氣相色譜儀，配備電子捕獲檢測器 （μ-ECD），安捷倫GC工作站；LD-OV-1701毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.32 μm）；R210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 （瑞士BUCHI公司）；SHZ-III型循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠）；H66MC型超聲波發(fā)生器（無錫市超聲電子設(shè)備廠）；8000型離心機(jī)（金壇市大地自動化儀器公司）。

1.3 方法

1.3.1 色譜條件 進(jìn)樣口溫度280 ℃；升溫程序：柱溫200 ℃保持1 min，以7 ℃/min升到250 ℃保持4 min；檢測器320 ℃；載氣流速1.5 mL/min，不分流進(jìn)樣。保留時間定性，峰面積定量。

1.3.2 供試品制備 將藥材在50 ℃下干燥6 h，粉碎過40目篩。精確稱取篩后樣品2.0 g于100 mL錐形瓶中，加入20 mL水超聲30 min；再加入40 mL丙酮，超聲30 min，補(bǔ)足揮發(fā)量，再加6.0 g氯化鈉，二氯甲烷30 mL，超聲15 min，補(bǔ)足揮發(fā)量，振蕩后靜置分層。精確量取上層液體35 mL于40 ℃下減壓濃縮至盡干。再用5 mL石油醚洗滌殘渣，于40 ℃下減壓濃縮至盡干，重復(fù)操作2次，除凈溶液中的二氯甲烷。用石油醚洗滌蒸餾瓶，取洗滌液于10 mL刻度管中，定容2 mL。加濃硫酸0.2 mL，劇烈振蕩，以4 000 r/min離心15 min，取上層清液1 μL進(jìn)樣（每個樣品進(jìn)樣3次，取平均值）。

1.3.3 對照品溶液配制 分別將1 mL 100 μg/mL的六氯苯、α-BHC、PCNB、γ-BHC、七氯、β-BHC、δ-BHC、P，P′-DDE、O，P′-DDT、P，P′-DDD、P，P′-DDT標(biāo)準(zhǔn)品用正己烷定容至50 mL，配成4 μg/mL的單標(biāo)儲備液。再取0.25 mL各儲備液于10 mL容量瓶中用正己烷定容，配濃度為0.1 μg/mL混合溶液作為對照品溶液。取1 μL對照品溶液進(jìn)樣。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜結(jié)果

白芨樣品和混合標(biāo)準(zhǔn)品圖譜分別見圖1和圖2。

2.2 線性關(guān)系分析

取適量4 μg/mL的對照品儲備液，依次稀釋成各標(biāo)準(zhǔn)品，濃度分別為0.30、0.15、0.10、0.06 和0.02 μg/mL，取10 μL進(jìn)樣，各種有機(jī)氨農(nóng)藥峰面積與濃度的線性關(guān)系見表1。

2.3 回收率和精密度分析

準(zhǔn)確稱取2.0 g樣品，分別加入3個不同水平的有機(jī)氯混合標(biāo)準(zhǔn)液，每個添加水平平行測定5次，其回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）結(jié)果見表2。

2.4 30種黔產(chǎn)中藥材中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留

在30種黔產(chǎn)中藥材中，六氯苯均未檢出；2個樣品中檢出七氯，占6.67%；17個樣品中檢出BHC，占56.67%；8個樣品中檢出DDT，占26.67%；18個樣品中檢出BHC或DDT，檢出率為60.00%，具體結(jié)果見表3。

3 討論

黔產(chǎn)中藥材飲片中的主要有機(jī)氯農(nóng)藥污染是BHC和DDT，其原因可能是有機(jī)氯農(nóng)藥難以分解，其次可能是貴州省曾經(jīng)大量使用過BHC和DDT農(nóng)藥，導(dǎo)致相關(guān)農(nóng)藥殘留嚴(yán)重。30種黔產(chǎn)中藥材飲片中BHC殘留含量平均值為0.002 4 mg/kg，DDT為0.004 2 mg/kg，含量較低，這說明在飲片的加工處理過程中，有機(jī)氯農(nóng)藥有不同程度的減少，同時也表明自采用GAP基地生產(chǎn)中藥材以來，有機(jī)氯農(nóng)藥在黔產(chǎn)中藥材中的殘留得到了良好的控制。本試驗分析了方法檢出限、穩(wěn)定性、回收率等條件，結(jié)果均能滿足30種黔產(chǎn)中藥材飲片中11種有機(jī)氯農(nóng)藥的檢測，可為完善中藥材飲片中農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

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