產β—甘露聚糖酶菌株育種及培養基優化

摘要：利用實驗室篩選保藏最高酶活為10.7 U/mL的白腐真菌作為出發菌株，進行紫外誘變育種及培養基優化，以期提高菌株產β-甘露聚糖酶能力。結果表明，紫外誘變條件為孢子懸液濃度106～107個/mL，誘變時間10 min，此條件下的孢子致死率達78%，獲得了13株正向突變株，經6代遺傳穩定性試驗證明UV-2突變株酶活最高，遺傳穩定性最強，比出發菌株酶活提高了2.075倍。通過單因素試驗確定了該突變株的最佳碳源、氮源分別為魔芋粉和硝酸銨，對酶活影響較大的無機鹽為磷酸二氫鉀。通過正交試驗，確定了最佳產酶培養基為魔芋粉4.0 g/L、NH4NO3 5.0 g/L、KH2PO4 5.0 g/L、NaCl 1.0 g/L、MgSO4·7H2O 1.0 g/L，在此條件下測得甘露聚糖酶最大酶活為46.17 U/mL，比優化前提高了40.3%。

關鍵詞：β-甘露聚糖酶；白腐真菌；誘變；正交試驗；培養基優化

中圖分類號：Q933；Q93-335 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）16-3820-04

在世界能源日益短缺的形勢下，植物纖維作為可再生有機資源越來越受到重視，其主要成分為纖維素、木質素和半纖維素。半纖維素約占植物干重的35%，含量是僅次于纖維素的雜聚物生物資源，其中最具代表性的兩種半纖維素是木聚糖和甘露聚糖[1]。β-甘露聚糖酶（EC 3.2.1.78）可降解甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖和半乳葡萄甘露聚糖的β-1，4-D-吡喃甘露糖主鏈[2]。微生物來源的β-甘露聚糖酶具有活力高、成本低、來源穩定、提取方便等明顯優點[3]，近年來隨著人們對自然界中半纖維素資源的開發和對甘露低聚糖保健價值的發現，微生物甘露聚糖酶再次成為研究熱點[4-6]。不同來源的β-甘露聚糖酶對不同底物的作用程度及其水解產物是不相同的[7-9]。……