兩種豬口蹄疫O型疫苗應用效果對比試驗

黃志堅 福建省三明市動物疫病預防控制中心 365000

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）所致的偶蹄動物共患的急性、熱性、高度接觸性傳染病。臨床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮膚發生水皰和潰爛為主要特征。該病具有流行快、傳播廣、發病急、危害大等流行病學特點。世界動物衛生組織（OIE）將其列為A類家畜傳染病之首。自1514年FMD首次報道以來，世界各地均有暴發流行，對家畜養殖業的發展造成嚴重威脅［1-2］。在我國，防治豬O型FMD主要采用疫苗免疫與撲殺等綜合性防治措施相結合的方法，收到了較明顯的效果，但由于傳統的滅活疫苗質量參差不齊，干擾因素多，免疫效果不理想，對野毒與疫苗產生的抗體鑒別困難，且應激反應強烈，甚至造成死亡等情況，給廣大養殖戶帶來巨大損失，故使研究安全、高效的新型口蹄疫疫苗成為研究熱點。豬口蹄疫O型合成肽疫苗是采用固相多肽合成技術制作而成，具有良好的免疫原性和安全性，是近年來主要推廣的新型豬口蹄疫疫苗。

2012年，三明市引進豬口蹄疫O型合成肽疫苗并在全市范圍內推廣，為了解掌握其臨床應用效果，為制定科學的免疫程序提供可靠依據。應用豬口蹄疫O型合成肽疫苗、豬口蹄疫O型滅活疫苗進行免疫效果對比試驗。通過觀察免疫后臨床反應和檢測免疫后21 d、28 d后的抗體效價水平，對兩種疫苗臨床應用效果進行比較。現將試驗報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 從某規模養豬場選用品種、來源相同的50日齡左右的同一批體質健康仔豬200頭。

1.1.2 疫苗 豬口蹄疫O型滅活疫苗和豬口蹄疫O型合成肽疫苗均采購于同一家疫苗生產企業。

1.1.3 試劑盒 豬O型口蹄疫VPl抗體檢測試劑盒，上海優耐特生物醫藥有限公司生產，批號：201209019；口蹄疫O型正向間接血凝試驗診斷液，中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產，批號：121017。

1.2 方法

1.2.1 分組 200頭豬隨機分為2組（A組和B組），每組100頭。A組接種豬口蹄疫O型滅活疫苗；B組接種豬口蹄疫O型合成肽疫苗。

1.2.2 免疫劑量 按照說明書的免疫劑量對試驗豬只進行免疫接種。口蹄疫O型滅活疫苗，每頭仔豬2 mL；口蹄疫O型合成肽疫苗，每頭仔豬1mL。

1.2.3 樣品采集 疫苗免疫前采血檢測母源抗體；免疫后分別于21 d、28 d采血檢測。

1.2.4 檢測方法 母源抗體和滅活疫苗的抗體使用豬口蹄疫O型正向間接血凝試驗檢測；免疫合成肽疫苗的抗體使用VP1結構蛋白抗體ELISA試劑盒進行檢測。

1.2.5 判定標準 正向間接血凝試驗，抗體效價≥25判定為免疫合格；VP1結構蛋白抗體ELISA，抗體效價≥25判定為免疫合格。

2 結果

2.1 免疫應激反應觀察結果 對免疫接種的200頭生豬進行觀察和登記，第1 d每4 h觀察1次，第2 d每8 h觀察1次，第3 d每12 h觀察1次，結果A組中有5頭試驗豬出現輕度應激反應，主要表現為體溫升高0.5～1℃，減食1～2 d，個別豬只注射部位腫脹，觀察期內未發生死亡；B組未發現任何不良應激反應。

2.2 母源抗體正向間接血凝試驗檢測結果 在進行疫苗免疫前用正向間接血凝試驗對200頭試驗豬進行母源抗體檢測，其抗體效價均＜25。

2.3 免疫21 d后抗體檢測結果 由表1可見，免疫21 d后對A組和B組試驗豬進行抗體水平檢測，抗體效價合格的有133份，平均免疫合格率為66.5%。其中A組100份血清有45份的抗體效價≥25，免疫合格率為45%；B組100份血清有88份血清的抗體效價≥25，免疫合格率為88%。

表1 免疫21 d后試驗組抗體檢測結果

2.4 免疫28 d后抗體檢測結果 由表2可見，免疫28 d后對A組和B組試驗豬進行抗體水平檢測，抗體效價合格的有155份，平均免疫合格率為77.5%。其中A組100份血清有62份的抗體效價≥25，免疫合格率為62%；B組100份血清有93份血清的抗體效價≥25，免疫合格率為93%。

表2 免疫28 d后試驗組抗體檢測結果

3 討 論

1）從檢測結果來看，A組和B組的試驗結果存在較為明顯的差異。A組免疫21 d后抗體平均合格率僅為45%，免疫28 d后上升至62%，雖然抗體上升的幅度較大，但仍低于農業部規定的抗體合格率高于70%的要求，說明口蹄疫滅活疫苗在臨床上一次免疫效果偏差，達不到國家規定的標準范圍；B組免疫21 d后抗體平均合格率為88%，比A組高出43個百分點，免疫28 d后上升至93%，比A組高出31個百分點，說明合成肽疫苗一次免疫效果良好，且在免疫21 d后其抗體合格率就達到了峰值。由此可見，免疫接種疫苗21 d和28 d后，免疫口蹄疫合成肽疫苗的合格率都高于傳統的滅活疫苗的合格率，從而表現出口蹄疫合成肽疫苗良好的免疫原性。

2）從疫苗免疫后臨床應激反應的觀察來看，接種合成肽疫苗的豬只在觀察期內精神狀態良好，各項生理指標正常，未出現體溫升高、食欲下降、呼吸困難等不良反應，而接種滅活疫苗的豬只在觀察期24 h內，先后有5頭出現輕度應激反應，主要表現為焦躁不安、呼吸加快、肌肉震顫、口吐白沫等，在注射腎上腺素后逐漸恢復正常。臨床上出現應激反應主要是由于滅活疫苗中含有大量異體蛋白，對致敏因子引起變態反應，而合成肽疫苗采用人工多肽合成技術，是一種單一抗原，不存在異體蛋白，能有效避免異體蛋白引起不良應激反應。由該次試驗臨床觀察來看，口蹄疫合成肽疫苗具有良好的生物安全性，不易產生過敏反應。這與朱玉華等［3］關于合成肽疫苗安全、穩定及副反應小等特點的報道相一致。

3）由于某些原因，該次試驗未對兩種疫苗二次免疫的效果進行比較，但從該次試驗結果表明，豬口蹄疫O型合成肽疫苗比傳統的滅活疫苗更快誘導機體產生特異性抗體，且抗體維持時間也較長。這與周靜華等［4］應用合成肽苗首免后4周抗體合格率已達到80%以上的結果基本一致，說明該疫苗高效、安全、副反應小，是目前預防豬O型口蹄疫的理想疫苗。

［1］ 白文彬，于康震.動物傳染病診斷學［M］.北京：中國農業出版社，2002：543-549.

［2］ 李國平.規模豬場傳染病診斷與防治［M］.北京：中國農業科技出版社，2001：85-90.

［3］ 朱玉華，陳亮.生豬注射口蹄疫滅活苗引起免疫應激的防治［J］.安徽農學通報，2007，13（18）：223.

［4］ 周靜華，李巧根，張曉東，等.豬口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果實驗［J］.上海畜牧獸醫通訊，2009（2）：56.