產后抑郁癥與雌激素受體β基因的多態性

汪廣劍，瞿發林，仲愛芳，卜 瑩，閆同軍

抑郁癥是嚴重困擾人類的精神疾病，女性比男性更容易罹患抑郁癥［1］。在產后與圍絕經期這段時期里，卵巢功能減退導致各種激素的分泌減少，尤其是雌激素的減少，從而出現一系列諸如記憶減退、潮熱、失眠、抑郁、焦慮等方面的癥狀。女性對低激素水平或者激素水平起伏的敏感性高于男性，導致女性發病率高于男性［2］。雌激素受體［3］(estrogen receptor，ER)，可分為兩種亞型，即ERα和ERβ。人ERβ基因5號外顯子的配體結合區(1082號核苷酸)可發生G→A點突變。8號外顯子的3＇端非編碼區(1730號核苷酸)可發生A→G點突變。當這兩處點突變發生后則分別出現限制性內切酶Rsa-Ι和Alu-Ι的識別位點，因此酶切ERβ的酶切片段就能區分ERβ的不同基因型。ERβ的這種基因多態性可能會影響不同個體ERβ的表達水平和功能，進而影響體內雌激素生物學效應的發揮。本文以ERβ基因的兩個多態性位點作為研究對象，以探討我國漢族人群中ERβ基因多態性與女性產后抑郁癥的關系。

1 對象與方法

1.1 對象 觀察組:選取2000年1月－2010年12月在本院住院治療的常州本地漢族女性抑郁癥124例，年齡21～35歲，病程6周～6個月，均符合中國精神障礙分類與診斷標準中抑郁癥診斷標準(產后抑郁癥，產后6月內發生)。對照組:選取同期體檢健康的文化水平、年齡相匹配的女性144例。

1.2 實驗方法 DNA制備:抗凝管抽取靜脈血3 ml，采用德國QIAGEN公司的基因組DNA試劑盒提取DNA。用軍事醫學科學院生產的PCR儀擴增DNA。引物由大連寶生物有限公司合成。用于擴增Alu-Ι基因的上游引物是5＇-TTTTTGTCCCCATAGTAACA-3＇，下游引物是 5＇-AATGAGGGACCACAGCA-3＇用于擴增 RSA-Ι基因的上游引物是 5＇-TCTTGCTTTCCCCAGGCTTT-3＇下游引物是 5 ＇-ACCTGTCCAGAACAAGATCT-3＇，PCR擴增及酶切 PCR試劑盒由寶生物(大連)有限公司生產。反應條件為:94℃變性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸10 min，循環35次。分別取 PCR 擴增產物10 μl，用10 U Rsa-Ι、8 U Alu-Ι于37℃酶切3 h后電泳，用凝膠成像儀觀察電泳結果。ERβ基因型判定參照相關文獻［4］。

1.3 統計學處理 采用SPSS 13.0統計軟件分析，基因型和等位基因頻率采用基因直接計數計算，應用擬合優度檢驗計算基因型分布是否符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡;組間基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 基因分析結果 使用Alu-Ι酶切可區分出3種基因型:aa型(307 bp)、Aa 型(307、240、67 bp)、AA型(240、67 bp);使用Rsa-Ι酶切可區分出3種基因型:rr型(156 bp)、Rr型(156、125、31 bp)、RR型(125、31 bp)。

2.2 多態性分析結果 兩組Rsa-Ι多態性分析:觀察組和對照組均符合H-W平衡定律(P＞0.05);兩組基因型rr、Rr、RR分布的比較，差異無統計學意義(P＞0.05);兩組等位基因r和R頻率的比較，差異無統計學意義(P＞0.05，表1)。兩組Alu-Ι多態性分析:產后抑郁癥組和對照組均符合H-W平衡定律(P ＞0.05);兩組基因型 aa、Aa、AA 分布的比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，兩組等位基因a和A頻率比較，差異有統計學意義(P＜0.05，表2)。

表1 兩組ERβ Rsa-Ι基因型和等位基因頻率的分析［n(%)］

表2 兩組ERβ Alu-Ι基因型和等位基因頻率的分析［n(%)］

3 討論

抑郁癥是指育齡婦女在產后6周～6個月內出現抑郁癥狀，其發生率高于非妊娠期婦女，產后6～12周發生率為10% ～16%，產后6個月內發生率為22%。有研究表明雌二醇對中樞調節情緒和認知功能有多重影響，雌二醇可增強單胺類物質活性和突觸后5羥色胺能效應，增加5羥色胺能受體數量和神經遞質的轉運和吸收。妊娠后體內雌激素水平過快下降，使腦內多巴胺D2受體的超敏和多巴胺轉運蛋白的表達增加亦引起相應的抑郁情緒和行為改變。雌激素的最終效應不僅取決于雌激素本身的分泌與代謝，還與ER的表達及功能密切相關。研究ER的基因多態性與疾病間的關系有助于從基因水平闡明這些疾病的發病機制。

ERβ基因參與雌激素相關的基因效應近年來成為研究熱點。Bekku等［5］采用雙側卵巢切除的雌性大鼠，以其在強迫游泳實驗中出現抑郁樣行為(長時間的懸浮不動-絕望行為)作為絕經后抑郁的動物模型。并在此抑郁模型的基礎之上，對抑郁的大鼠分別給予15～30 mg/(kg·d)的雌二醇、丙咪嗪等藥物，發現雌二醇、丙咪嗪、米那普倫和氟西汀都能夠明顯減少大鼠懸浮的時間，而東莨菪堿和地西泮無此作用。證明雌激素的撤退理論是產后，絕經期抑郁的一個重要病因假說［4］。有文獻［6］報道ERβ存在基因多態性，其中 D14S1026、rs1256031、rs1256112、rs3020444和rs1152588與無卵癥和貪食癥存在關聯。說明ERβ基因參與了雌激素撤退引發的一系列基因效應，但對雌激素減少或撤退引發的抑郁癥狀的研究甚少。Takeo等［4］則發現D14S1026與更年期綜合征的抑郁癥存在關聯，51例更年期綜合征D14S1026存在14～25個高度重復CA序列，并可分成EL、SS、SL和LL4種基因型，其中SS型患者血管運動癥狀、精神癥狀和經前期癥狀與其他幾型相比風險系數明顯增高，達7～13倍。Yu等［7］則發現ERβ Rsa-Ι多態性與圍絕經期女性抑郁癥無相關性。

基因多態性存在種族、民族和地域的差異，本研究選取常州本地漢族婦女，發現ERβ Alu-Ι多態性可能與常州地區漢族女性產后抑郁癥的易感性相關，含等位基因A的基因型可能增加患抑郁癥的風險，但未發現含R等位基因的基因型與患產后抑郁癥的關系。不排除因科研設計不完善導致結果有所偏差，應全面考慮、進一步驗證ERβ基因與產后抑郁癥的關系。

［1］ 翟書濤.婦女精神衛生［M］.北京:人民衛生出版社，1999:192.

［2］ 張淞文.產后抑郁癥發病因素與治療進展［J］.中國婦幼保健，2002，17(8):764.

［3］ 黃海玲，韋葉生，解繼勝，等.雌激素受體β基因多態性與子宮內膜異位癥的相關研究［J］.中華婦產科雜志，2005，40(9):644-645.

［4］ Takeo C，Nnegishi E，Nakajima A，et al.Association of cytosine adenine repeat polymorphism of the estrogen receptor-beta gene with menopausal symptoms［J］.Gend Med，2005，2(2):96-105.

［5］ Bekku N，Yoshimttra H.Animal model of menpausal depressivelike state in female mice:Prolongation of immobility time in the forced swimming test following ovariectomy［J］.Psychopharmacology，2005，183(3):300-307.

［6］ Ichikawal S，Koller DL，Peacockl M，et al.Polymorphisms in the estrogen receptor beta(ESR2)gene are associated with bone mineral density in Caucasian men and women［J］.J Clin Endocrinal Metab，2001，86(1):135-139.

［7］ Yu XW，Ren YH，Li F，et al.Association between estrogen receptor beta gene Rsal polymorphism and depressive disorder in perimenopausal and menopausal women［J］.J Med Coll PLA，2005，20(2):102-105.