我院2011年新生兒血源性感染凝固酶陰性葡萄球菌菌種分布及耐藥性分析

張海瓊，俞小珍（柳州市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545001）

新生兒血源性感染是目前新生兒的常見疾病，其病原菌種類和耐藥性隨時(shí)間推移已發(fā)生較大變化。凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）導(dǎo)致的血源性感染增多，耐藥性也逐漸增大，給臨床治療帶來(lái)了很大困難。為了解CNS感染的耐藥性，筆者對(duì)我院2011年新生兒血培養(yǎng)分離到的149株CNS的菌種分布及耐藥情況進(jìn)行了回顧性分析。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

149株CNS為2011年從我院新生兒科送檢的患兒血培養(yǎng)標(biāo)本檢出（剔除同一患兒重復(fù)分離菌株）。

1.2 血培養(yǎng)與菌株鑒定

無(wú)菌采集靜脈血3～5 ml，注入安圖雙相血培養(yǎng)瓶，每天觀察血培養(yǎng)情況；將陽(yáng)性瓶取出，轉(zhuǎn)種血平板置于35℃孵育箱培養(yǎng)后分離致病菌。鑒定及藥物敏感試驗(yàn)均采用MicroScan WalkAway 40SI儀器及配套試劑進(jìn)行，質(zhì)控菌株為ATCC 29212、ATCC 29213。

1.3 耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢測(cè)方法

采用頭孢西丁紙片法。依據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）2007年版的規(guī)定判斷，抑菌圈≤24mm即判定為MRCNS。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用WHONET 5.4軟件進(jìn)行藥物敏感結(jié)果分析，顯著性差異采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 149株CNS菌種分布及MRCNS的檢出率

149株CNS中，分離到9種葡萄球菌，以表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌居多；共檢出MRCNS 125株，檢出率為83.9%，見表1。

表1 149株CNS菌種分布及MRCNS的檢出率Tab 1 Distribution of 149strains of CNS and percentages of MRCNS isolated from blood culture

2.2 CNS對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率

CNS對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星的耐藥率較低，對(duì)其他抗菌藥物均有不同程度的耐藥，見表2。

表2 CNS對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率統(tǒng)計(jì)Tab 2 Drug resistance of CNS to commonly used antibiotics

2.3 MRCNS與甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（MSCNS）的耐藥率比較

除萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星外，MRCNS的耐藥率均高于MSCNS，見表3（注：“-”表示耐藥率無(wú)差別）。

表3 MRCNS與MSCNS對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率統(tǒng)計(jì)Tab 3 Drug resistance of MRCNS and MSCNS to commonly used antibiotics

3 討論

小兒血源性感染的主要致病菌在我國(guó)以往主要為金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌，近年來(lái)隨著CNS的感染率逐年上升，已躍居小兒血培養(yǎng)菌的首位[1]。張曉潔等[2]報(bào)道，新生兒血培養(yǎng)病原菌中，革蘭陽(yáng)性菌明顯多于革蘭陰性菌，CNS居首位。2011年我院新生兒血培養(yǎng)共分離出149株CNS，其中表皮葡萄球菌86株，占57.7%，與彭敬紅等[3]的報(bào)道一致，提示新生兒血流感染不可忽視表皮葡萄球菌的感染。但表皮葡萄球菌是人體正常菌群，在臨床新生兒采血過程中，由于操作時(shí)間過長(zhǎng)或消毒不充分及使用各種侵入性醫(yī)療器械都會(huì)造成感染。應(yīng)強(qiáng)調(diào)醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行檢查和醫(yī)療操作前認(rèn)真洗手的重要性，嚴(yán)格執(zhí)行各種消毒制度，以減少醫(yī)院感染的機(jī)會(huì)。

本次研究的149株CNS中，共分離出9種葡萄球菌，主要為表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌，菌種分布與國(guó)內(nèi)報(bào)道一致[4]。由表1可見，MRCNS的檢出率為83.9%，稍高于國(guó)內(nèi)相關(guān)研究。由于臨床對(duì)抗感染藥的使用情況不同，及抗菌藥物選擇性壓力導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥性變異與菌株來(lái)源、醫(yī)院類別等因素，不同地區(qū)、不同醫(yī)院MRCNS的分離率的報(bào)道有一定差別，但檢出率呈上升趨勢(shì)[4]，臨床應(yīng)引起高度重視。

由表2可見，CNS對(duì)青霉素的耐藥率為94.0%，對(duì)苯唑西林的耐藥率為83.9%，這與臨床廣泛應(yīng)用第3代頭孢菌素有關(guān)。第3代頭孢菌素對(duì)革蘭陰性桿菌的作用強(qiáng)大，但對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌的抗菌活性較差，使其成為患者體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群，長(zhǎng)期預(yù)防用藥易篩選出耐甲氧西林的葡萄球菌。由表2可見，CNS對(duì)阿莫西林/克拉維酸、頭孢唑林、紅霉素、青霉素、苯唑西林的耐藥率較高，對(duì)左氧氟沙星、利福平的耐藥率較低。由于左氧氟沙星會(huì)對(duì)人體骨骼發(fā)育產(chǎn)生不良影響，因此應(yīng)避免用于18歲以下的未成年人；利福平的不良反應(yīng)較多，新生兒不宜應(yīng)用。本組數(shù)據(jù)表明，CNS對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺高度敏感，未見有耐藥現(xiàn)象。但近年來(lái)國(guó)內(nèi)已有報(bào)道對(duì)萬(wàn)古霉素敏感性下降的耐甲氧西林溶血葡萄球菌[4]，提示糖肽類耐藥菌株有可能出現(xiàn)和蔓延，建議臨床醫(yī)師對(duì)萬(wàn)古霉素進(jìn)行保護(hù)性應(yīng)用，嚴(yán)格掌握適應(yīng)證。利奈唑胺是一種新型抗菌藥物，已被批準(zhǔn)用于新生兒和兒童，此類藥對(duì)各類耐藥的革蘭陽(yáng)性球菌具有抗菌活性，為蛋白合成抑制劑，與其他抑制合成的抗菌藥物很少見交叉耐藥，且體外不易誘導(dǎo)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，不失為治療MRCNS的首選用藥。

由表3可知，MRCNS和MSCNS對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星的耐藥率均較低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；MRCNS對(duì)氯霉素、環(huán)丙沙星、復(fù)方磺胺甲唑、四環(huán)素的耐藥率高于MSCNS（P＜0.05）；MRCNS對(duì)阿莫西林/克拉維酸、克林霉素、頭孢唑林、紅霉素、慶大霉素、苯唑西林、青霉素的耐藥率明顯高于MSCNS（P＜0.01）。MRCNS對(duì)β-內(nèi)酰胺類耐藥主要是因?yàn)楂@得mecA基因，mecA編碼的青霉素結(jié)合蛋白使細(xì)胞對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥親和力降低以致對(duì)甲氧西林、苯唑西林及所有頭孢菌素、碳青霉烯類、青霉素+酶抑制劑復(fù)合抗菌藥物均耐藥。MRCNS對(duì)紅霉素耐藥是獲得erm基因表達(dá)紅霉素核糖體甲基化酶，使細(xì)菌核糖體紅霉素作用靶位點(diǎn)發(fā)生甲基化，從而使大環(huán)內(nèi)酯類藥與細(xì)菌核糖體的結(jié)合減弱而產(chǎn)生耐藥性。MRCNS對(duì)四環(huán)素耐藥主要是獲得tetM基因，tetM基因編碼細(xì)菌核糖體保護(hù)蛋白，能阻止四環(huán)素與核糖體結(jié)合從而使四環(huán)素失去抑菌作用。MRCNS對(duì)慶大霉素的耐藥率高于MSCNS，是因?yàn)楫a(chǎn)生氨基糖苷類修飾酶和氨基糖苷類藥作用靶位16 SrRNA基因突變所致。位于細(xì)菌染色體上的耐藥基因是決定細(xì)菌耐藥的基礎(chǔ)，并且耐藥基因可在同種和不同種細(xì)菌之間傳播，造成耐藥菌株不斷增多。對(duì)于我院分離的125株MRCNS攜帶的相關(guān)耐藥基因，還有待進(jìn)一步研究。藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果顯示，MRCNS對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類、氟喹諾酮類及氨基糖苷類有較高的耐藥性，是一種多重耐藥菌。因此區(qū)分MRCNS與MSCNS對(duì)指導(dǎo)臨床用藥非常重要。

目前，對(duì)于新生兒感染用藥，臨床醫(yī)師大多選用“高檔次”的抗菌藥物聯(lián)用以快速控制感染，由此給整個(gè)微生態(tài)環(huán)境制造出了更多的耐藥菌株，給臨床治療帶來(lái)了很大難度。因此，必須根據(jù)本地區(qū)病原菌的流行分布和抗菌藥物的耐藥情況合理用藥，以減少耐藥菌的產(chǎn)生，從而更有效地預(yù)防和控制感染。

[1]李天嬌，鐘海英，郭紅荔，等.新生兒血培養(yǎng)出凝固酶陰性葡萄球菌的分析[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2010，14（9）：1451.

[2]張曉潔，邱勝豐，葛高霞，等.南京地區(qū)新生兒血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析[J].中國(guó)藥房，2012，23（10）：893.

[3]彭敬紅，呂軍，吳均竹，等.凝固酶陰性葡萄球菌致新生兒敗血癥的耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（5）：1034.

[4]段純，朱巖，龍峰.新生兒血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌菌種分布及耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華疾病控制雜志，2010，14（6）：1090.