復方醋酸氯己定凝膠的制備和質量控制

張玉葉 劉光斌 劉燕珺 劉效栓

（1 嘉峪關市酒鋼醫院，甘肅 嘉峪關735100；2 嘉峪關市食品藥品檢驗所；3 甘肅省中醫院，甘肅 蘭州730000）

復方氯己定凝膠是我院自行研制的治療燒傷的外用制劑，主要由醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧、薄荷腦、曲安奈德等用高分子材料甲基纖維素4500制成的凝膠劑。該凝膠劑具有抗感染、止痛、清涼、預防瘢痕形成的作用。臨床上用于燒傷、燙傷的治療效果滿意。 現將其制備工藝和質量控制方法報道如下。

1 材料

1.1 儀器

LC-2010AHT 型高效液相色譜儀（日本島津）、島津LC solution 工作站；AUY220 電子分析天平（日本島津）；756 紫外可見分光光度計（上海奧譜勒儀器有限公司）；PHS-3C 型酸度計（上海雷磁儀器廠）；GQ-105 型管式高速離心機（上海市離心機廠研究所）。

1.2 藥品與試劑

1.2.1 標準品 醋酸氯己定（原中國藥品生物制品檢定所，批號100183-201003，含量為96.2%）；鹽酸達克羅寧對照品（原中國藥品生物制品檢定所，批號100423-201102，含量為99.8%）。

1.2.2 藥品 醋酸氯己定（錦州制藥一廠，批號111005），鹽酸達克羅寧（上海輕工實驗廠，批號20110306），曲安奈德（上海第十二制藥廠，批號090618），薄荷腦（黃山天目薄荷藥業有限公司，批號111104）。

1.2.3 化學試劑 甲醇、乙腈為色譜純，甘油、甲基纖維素4500、乙醇、聚山梨酯80 均為藥用規格，其他試劑為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方

鹽酸達克羅寧10 g，醋酸氯己定5 g，薄荷腦6 g，曲安奈德0.5 g，甲基纖維素4500 20 g，甘油100 g，聚山梨酯80 30 g，乙醇適量，水適量。

2.2 制備

取鹽酸達克羅寧和聚山梨酯80，加入適量水攪拌并微熱，使鹽酸達克羅寧溶解，將甲基纖維素4500 撒于上述溶液表面，靜置24 h，使完全溶脹為均勻凝膠劑。 將醋酸氯己定溶于適量水和甘油的混合溶液中加入上述凝膠中，薄荷腦溶于乙醇中，少量緩慢加入上述凝膠中，邊加邊攪拌使混合均勻，最后加入曲安奈德，攪拌使混合均勻，加水至足量即得。

3 質量控制

3.1 性狀

本品為微黃色半透明、質地均勻細膩的半固體凝膠制劑，稠度適宜，有薄荷香氣，涂展性好。

3.2 鑒別

3.2.1 醋酸氯己定 取本品5 g，加水5 mL 攪拌均勻，加硫酸銅試液2 滴，加熱，即產生淡紫色糊狀物。

3.2.2 鹽酸達克羅寧 取本品適量（約含鹽酸達克羅寧50 mg），加95%乙醇，超聲溶解，加2，4-二硝基苯肼試液5 mL，振搖，顯橙色。

3.2.3 薄荷腦 取本品5 g，加冰醋酸1 mL 使溶解，加硫酸6 滴和硝酸1 滴的冷混合液，僅顯淡黃色。

3.3 檢查

3.3.1 酸堿度 取本品5 g 置燒杯中， 加水25 mL，超聲溶解，測得pH 值為5.0 ～7.0 之間[1]。

3.3.2 衛生學檢查 按文獻[2]方法檢驗,霉菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、雜菌等均符合藥品衛生標準。

3.3.3 其他 應符合《中國藥典》（2010 年版）二部“凝膠劑”附錄項下有關的各項規定[1]。

3.4 含量測定

3.4.1 色譜條件 色譜柱Inertsil ODS-SP（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相0.5%三乙胺（用冰醋酸調pH 至3.8）-乙腈（68∶32）；流速1.0 mL/min；檢測波長270 nm；柱溫30 ℃；進樣量10 μL。

3.4.2 溶液的制備

3.4.2.1 對照品溶液的制備 取醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL 含醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧25.5，51.0 μg的溶液，即得。

3.4.2.2 供試品溶液的制備 取供試品2.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加適量甲醇溶解，轉移至容量瓶中，加甲醇至100 mL。 搖勻，濾過。 取續濾液2 mL，精密加流動相至10 mL，高速離心（13 000 r/min）5 min，即得。

3.4.2.3 陰性對照溶液的制備 取空白2 g （與供試品同一批次：20120330），精密稱定，同3.4.2.2方法制得。

3.4.3 系統適用性試驗 分別取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液注入液相色譜儀，在上述色譜條件下，醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧的保留時間分別為4.3，10.2 min， 吸收峰與相鄰雜質峰的分離度均大于1.5，陰性對照對供試品測定無干擾。 理論板數按醋酸氯己定和鹽酸達克羅寧峰計算均應不低于3 000。 對照品、供試品、陰性對照的色譜圖見圖1。

圖1 復方氯己定凝膠HPLC 圖

3.4.4 線性關系考察 精密稱取醋酸氯己定對照品10.19 mg 和鹽酸達克羅寧對照品20.45 mg，置50 mL 量瓶中，加甲醇適量溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。 精密量取對照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL，分別置25 mL 量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。 按上述色譜條件測定峰面積，以進樣濃度C（mg/mL）對峰面積A作線性回歸，得到2 種成分的線性關系如表1。結果表明， 醋酸氯己定在0.081 52 ～0.407 60 μg范圍內呈良好的線性關系；鹽酸達克羅寧在0.163 6 ～0.818 0 μg 范圍內呈良好的線性關系。

3.4.5 加樣回收率試驗 取已知含量的供試品（批號20120330）9 份，精密加入低、中、高質量的醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧對照品，按3.4.2.2 項下操作，制備供試品溶液并按其測定方法測定，結果見表2。

表1 復方醋酸氯已定凝膠中2 種成分的線性關系（n = 5）

3.4.6 精密度試驗 取每mL 含醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧25.5，51.0 μg 的對照品溶液，按上述方法連續進樣5 次，結果顯示：醋酸氯己定峰面積平均值為444 388，RSD 為0.82 %；鹽酸達克羅寧峰面積平均值為1 126 053，RSD 為0.98 %。 結果表明該方法精密度良好。

3.4.7 重復性試驗 取同一批次（20120330）的供試品5 份，每份2.0 g，精密稱定，按3.4.2.2 方法制備，按上述色譜條件測定，以外標法計算含量，醋酸氯己定、鹽酸達克羅寧平均含量分別為4.912 mg/g（RSD=0.88%），9.865 mg/g（RSD = 0.76%）。 結果表明重復性良好。

3.4.8 穩定性試驗 取同一批次（20120330）供試品2.0 g，精密稱定，按3.4.2.2 方法制備，按上述色 譜 條 件 測 定, 分 別 在0，2，4，6，8，10 h 進 樣 分析，測得醋酸氯己定峰面積的RSD 為1.22%；鹽酸達克羅寧峰面積的RSD 為1.10%，結果表明，供試品溶液在10 h 內穩定。

表2 回收率測定結果（n = 9）

3.4.9 樣品測定 取3 個批次（20120229、20120302、20120330）的供試品（每批號3 份），精密稱定，按3.4.2.2 方法制備，按上述色譜條件測定，用外標法分別計算供試品中鹽酸達克羅寧和醋酸氯己定的含量，結果見表3。

表3 復方氯己定凝膠含量測定結果（n = 3）

3.5 制劑穩定性試驗

3.5.1 離心試驗 取3 批供試品各10 g，裝入帶刻度的離心管中，以3 500 r/min 的轉速離心30 min，凝膠無分層現象。

3.5.2 方法 另取3 批供試品均勻裝入包裝盒內，分別置（48±1）℃恒溫箱恒溫6 h 和置（－15±2）℃冰箱內24 h 后取出，放至室溫后觀察，皆未發生分離、沉淀、變色現象。

3.5.3 常溫貯存試驗 取3 批供試品裝入密閉的包裝管內留樣逐月觀察12 個月，因乙醇揮發稠度略有改變，但無霉變等其他變化。含量測定結果符合標準規定，證明本品在1 年內質量穩定。

4 討論

醋酸氯己定作為消毒防腐劑，對革蘭陽性、陰性細菌有很強的抑菌殺菌能力，常用于器械、皮膚和黏膜的消毒，在治療燒、燙傷時常用其水溶液清洗創面，但由于水溶液附著力低，抗菌效果不能保證。 鹽酸達克羅寧為局部麻醉藥，對皮膚有止痛、止癢及殺菌作用，對皮膚黏膜穿透力強，作用迅速，局部作用較為持久。 薄荷腦芳香、清涼，有良好的止癢消炎和促滲透作用，并可明顯增加外用皮質激素類藥物的局部生物利用度。 曲安奈德是人工合成的含氟的長效腎上腺糖皮質激素，具有減輕急性炎癥癥狀和抑制炎癥后組織損傷的修復，預防瘢痕形成的作用。在藥物組分中由于各成分相輔相成，起到了協同作用，用高分子材料甲基纖維素4500 做凝膠基質，將這幾種藥物制備成親水性凝膠劑，不僅使藥物易于分散，而且增大了黏度，延長了藥物與患部接觸時間，并對燒傷創面有保濕、保護作用，能取得較好的療效。 為了提高產品質量，確保制劑的有效性，在完善制備工藝的同時，建立了藥品的質量控制方法。

鹽酸達克羅寧與醋酸氯己定在水中都不易溶解，為了提高藥物在制劑中的分散度，在制備凝膠劑時加入聚山梨酯80 并加熱使鹽酸達克羅寧溶解，用水與甘油混合溶劑使醋酸氯己定溶解。薄荷腦不溶于水，用適量乙醇溶解后緩慢加入凝膠劑中。

復方氯己定凝膠是復方制劑，輔料較多，試驗中分別采用了甲醇-磷酸鹽緩沖液[3-4]、甲醇-水[5]、乙腈-水-冰醋酸-三乙胺[6]等不同種類、比例的流動相。 結果表明：采用0.5%三乙胺（用冰醋酸調pH 至3.8）-乙腈（68 ∶32）為流動相，色譜峰分離度高，兩種成分的保留時間比較合適。 文獻[3-4]顯示，同時測定醋酸氯己定與鹽酸達克羅寧含量的檢測波長分別為259 nm 和270 nm。 經過試驗結果比較，在270 nm 和259 nm 處醋酸氯己定吸收峰無差別，而鹽酸達克羅寧峰在270 nm 處吸收更強、峰形更好。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010 年版）二部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄19.

[2] 中華人民共和國衛生部.藥品衛生檢驗方法[M].北京：人民衛生出版社，1990：17，34，41.

[3] 羅東，冉光炳，戴青，等.復方洗必泰漱口液質量分析方法的建立及抑菌作用[J].第三軍醫大學學報，2007，29（3）：264-266.

[4] 張秉華，郭歡迎，王發，等.復方氯己定地塞米松膜含量測定方法研究[J].西北藥學雜志，2011，26（6）：429-431.

[5] 王海英.HPLC 測定醋酸氯己定酊的含量[J].華西藥學雜志，2001，16（4）：321.

[6] 楊躍龍.RP-HPLC 法測定復方達克羅寧軟膏中主藥的含量[J].中國藥房，2008，19（4）：294-295.