P53和Ki-67在水泡狀胎塊中的表達及意義

王亞萍 劉玲 于晶功 李廣慧 宋光耀 鄒娜

P53和Ki-67在水泡狀胎塊中的表達及意義

王亞萍 劉玲 于晶功 李廣慧 宋光耀 鄒娜

目的研究P53及Ki-67在水泡狀胎塊(完全性和部分性水泡狀胎塊，CHM和PHM)中的表達情況，探討其在水泡狀胎塊診斷及判斷預后中的作用。方法應用免疫組織化學方法檢測P53及Ki-67在12例胚亡流產絨毛、18例PHM和24例CHM中的表達。結果P53在三組中的陽性表達率分別為0.00%、33.33%和50.00%；Ki-67的陽性表達率分別為16.67%、44.44%和83.33%；P53的表達在各組間的差異沒有統計學意義(P>0.05)；Ki-67的表達在CHM組與正常組間差異有統計學意義(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM與PHM之間以及PHM與正常組之間差異不明顯(P>0.05)。結論檢測水泡狀胎塊中P53及Ki-67的表達有助于HM的診斷及預后評估。

水泡狀胎塊；P53；Ki-67

水泡狀胎塊(hydatidiform mole,HM)是常見的妊娠滋養細胞疾病，根據大體所見、顯微鏡下特點、染色體核型分析以及臨床表現不同而分為完全性水泡狀胎塊(complete hydatidiform mole,CHM)和部分性水泡狀胎塊(partial hydatidiform mole,PHM)。本文通過免疫組化方法檢測P53及Ki-67在不同類型的HM中的表達情況，來探討它們在HM診斷中的作用及預后價值的評估。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取大連市婦產醫院2011年10月至2012年8月期間門診患者首次刮宮標本，其中24例為CHM患者，年齡24～40歲，中位年齡為26.12歲；18例為PHM患者，年齡21～45歲，中位年齡為25.57歲。所有病例均由2名高年資病理醫師再次復核(診斷標準參照WHO2003乳腺及女性生殖器官病理學和遺傳學)。另選取2012年8至10月間12例胚亡流產絨毛組織作為對照組。

1.2主要試劑及方法 所用即用型鼠抗人P53及Ki-67單克隆抗體和S-P試劑盒均購自福州邁新生物技術開發公司。所有標本均由10%福爾馬林固定，石蠟包埋后4 μm連續切片。采用免疫組化S-P法染色操作。用已知陽性切片做陽性對照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗做陰性對照。

1.3結果判定 P53及Ki-67陽性表達定位于細胞核，均為淺黃色或棕黃褐色顆粒。陽性判斷為滋養細胞陽性數<5%為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%(++)，>50%為(+++)。

1.4統計學分析 采用 SPSS 13.0統計軟件進行χ2檢驗, 以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1P53表達狀況 CHM組中P53陽性率為50.00%(12/24)；PHM組陽性率為33.33%(6/18)；正常組陽性率為0.00%(0/12)。P53在正常組、PHM及CHM組中的表達呈上升趨勢，在CHM組中表達最強，但各組間表達的差異沒有統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2Ki-67表達狀況 CHM組中Ki-67陽性率為83.33%(20/24)；PHM組陽性率為44.44%(8/18)；正常組陽性率為16.67%(2/12)。Ki-67在正常組、PHM及CHM組中的表達逐漸升高，在CHM組中表達最強，CHM組與正常組之間有明顯差異(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM與PHM之間以及PHM與正常組之間差異不明顯。見表1。

3 討論

水泡狀胎塊，俗稱葡萄胎，是臨床工作中常見的妊娠滋養細胞疾病，主要以絨毛水腫及不同程度滋養細胞增生為特點。雖然大部分呈現良性病程，但也有某些病例具有潛在惡性經過，可能發展為侵襲性水泡狀胎塊、絨毛膜癌及其他妊娠滋養細胞腫瘤。有報道稱5%～15%的葡萄胎患者會發展為妊娠滋養細胞腫瘤而需要進一步化療，而當15%的患者發現發展為妊娠滋養細胞腫瘤時，僅有1%～5%的部分性葡萄胎患者由于持續性滋養細胞疾病(pGTD)而需要化療[1]。所以，完全性水泡狀胎塊較之部分性而言，其預后更需要關注，但在臨床工作中對于CHM和PHM的鑒別在一些病例上存在著一定的困難，而預測預后最重要的標準是部分性和完全性胎塊之間的鑒別[2]。

P53作為抑癌基因參與細胞周期調節而發揮功能。有研究表明P53在HM中的表達強于普通絨毛組織；也有報道P53在CHM中的陽性表達率為40%，在PHM中的陽性表達率為30%，非水泡組織為10%；還有作者發現在那些發展為pGTD的CHM中P53的表達更強[3]。但是也有研究表明在妊娠滋養細胞疾病中未檢測到P53突變[4]。Petignat P等[5]研究發現在81%的HM中可觀察到突變型P53，認為相比于正常胎盤而言，HM中突變型P53的增加可能是一種不同多肽鏈折疊或錨定蛋白形成，而不是真的基因突變，可能引起不同的生物活性。本實驗中P53在CHM中的表達率為50%，在PHM中的表達率為33.33%，CHM組比PHM組稍高，但沒有統計學意義，考慮可能是選取的樣本數偏小所致。

Ki-67是反映細胞增殖活性的生物學指標，已經廣泛應用于檢測腫瘤細胞的增生程度，在多種腫瘤中的表達顯著升高。本實驗結果顯示，Ki-67的表達從正常組到PHM組再到CHM組是逐漸增強的，而且在CHM組的表達顯著升高，CHM組及PHM組的表達明顯強于正常組，這與羅瑩等[6]的研究結果相似，而CHM組與PHM組之間的表達，CHM組要高于PHM組，前者陽性表達細胞數多>50%，后者通常在20-30%之間，但是表達率無明顯差異(P>0.05)。流產的病例中細胞滋養層細胞增殖速度變慢，增殖活性下降，因而本實驗中觀測到Ki-67在水腫絨毛滋養細胞中的陽性細胞數大多<5%。CHM組與正常組之間差異有統計學意義(P<0.05)，因而考慮Ki-67可以作為CHM診斷時的一個參考指標，Ki-67表達越強，越需要監測其預后，相對于Ki-67低表達的病例而言其發展為pGTD的可能性會大一些。

綜上所述，結合臨床所見、鏡下形態特點以及P53和Ki-67的表達，有助于水泡狀胎塊的診斷及預后的評估。

表1 水泡狀胎塊中P53及Ki-67的表達狀況

注：①CHM-PHM②PHM-正常組③CHM-正常組

[1] 陳樂真主編.婦產科診斷病理學.第2版.北京：人民軍醫出版社，2010:554.

[2] 劉伯寧，范嫏娣主譯.人類胎盤病理學手冊.天津：天津科技翻譯出版公司，2008:271.

[3] Neil J. Sebire, F.R.C.Path., Michael J. Seckl. Immunohistochemical staining for diagnosis and prognostic assessment of hydatidiform moles. The Journal of Reproductive Medicine, 2010,55:236-246.

[4] Sue Yazaki-Sun, Silvia Daher, Marcia Marcelino de Souza Ishigai, et al. Correlation of c-erbB-2 oncogene and p53 tumor suppressor gene with malignant transformation of hydatidiform.J. Obstet. Gynaecol. Res, 2006,32(3):265-272.

[5] Petignat P, Laurini R, Goffin F, et al. Expression of matrix metalloproteinase-2 and mutant p53 is increased in hydatidiform mole as compared with normal placenta. Int J Gynecol Cancer, 2006,16:1679-1684.

[6] 羅瑩，吳荔香，廖翏，等.水泡狀胎塊中p57、survivin、Ki-67的表達及意義.臨床與實驗病理學雜志,2012,28(2):202-204.

116033 大連市婦產醫院病理科