飼糧能量水平對妊娠肉兔血清生化指標及生殖激素水平的影響

臨沂大學生命科學學院 井文倩 張寧波

山東農業大學動物科學技術學院 李福昌

本文主要研究能量水平對妊娠期新西蘭兔血清生化指標和生殖激素水平的影響，從內分泌機制上探討能量與母兔繁殖關系的可能機理，為母兔飼養的營養調控技術和營養與繁殖關系的基礎研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗日糧 依據NRC（1977）兔飼養標準配制能量含量分別為 9.44、10.47、12.02 MJ/kg的試驗日糧，日糧組成及營養水平見表1。試驗日糧全部加工成直徑4～6 mm的顆粒飼料。

1.2 試驗動物與飼養管理 采用單因素有重復試驗設計，選用體重接近、健康狀況良好、血緣相近、胎次和配種日期基本一致的經產新西蘭兔，發情期前15 d開始預飼，在發情期集中配種，淘汰空懷者，母兔按試驗要求隨機分為3組，每組20只，每個重復1只。

試驗前對兔舍、兔籠、料槽和水槽進行清洗、消毒。試驗期間人工喂料，不限量，自由飲水，自然光照，自然通風，3～5 d消毒兔舍一次。嚴格執行母兔妊娠期飼養管理要求，期間密切觀察母兔情況，做好試驗記錄。

表1 試驗日糧組成及營養水平

1.3 血清樣品的收集和保存 在妊娠末期每組隨機選取8只試驗兔，連續2 d早晨空腹耳靜脈采血10 mL，室溫避光靜置30 min后，3000 r/min離心10 min，分離所得血清并分裝于Eppendorf管中，-20℃冷凍保存待測。

1.4 指標測定

1.4.1 血清常規指標的測定 血清中胰島素（Ins）、膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）和極低密度脂蛋白（VLDLC）的測定采用日本和光提供的試劑盒，按說明書操作，在日立7020型全自動分析儀上進行測定。

1.4.2 生殖激素水平的測定 血清中胰島素（Ins）、膽固醇（CHO）和促黃體生成激素（LH）、孕酮（P）、雌二醇（E2）、泌乳素（PRL）、促卵泡生成激素（FSH）的測定采用放射免疫法（RIA），試劑盒均由天津九鼎醫藥生物工程有限公司提供。低溫保存的血清樣品室溫下解凍，按說明書進行前處理后測定，放射性強度計數使用γ計數器（DPM-96型）。

1.5 數據統計與分析 試驗結果用 “平均值±標準誤”表示，采用SAS（1985）GLM程序對各項數據進行方差分析，差異顯著時用Duncan’s法對各組間平均數進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 日糧能量水平對妊娠母兔血清胰島素水平和膽固醇含量的影響 由表2可知，處理Ⅰ組血清Ins水平顯著低于處理Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05），而CHO含量顯著高于處理Ⅱ、Ⅲ組（P＜0.05）。處理Ⅱ和Ⅲ組間血清Ins水平和CHO含量均無顯著差異（P＞0.05）。其中，處理Ⅱ組和處理Ⅲ組血清Ins水平較處理Ⅰ組提高45.98%和50.02%；而血清CHO含量較處理Ⅰ組降低34.88%和39.53%。

表2 日糧能量水平對妊娠母兔血清胰島素水平和膽固醇含量的影響

2.2 日糧能量水平對妊娠母兔血脂四項的影響由表3可知，日糧能量水平對妊娠期母兔血脂四項無顯著影響（P＞0.05）。

表3 日糧能量水平對妊娠母兔血脂四項的影響 mmol/L

2.3 日糧能量水平對妊娠母兔生殖激素水平的影響 由表4可知，日糧能量水平顯著影響妊娠期母兔血液P、E2和LH水平（P＜0.05），對血液PRL和FSH水平無顯著影響（P＞0.05）。其中，處理Ⅱ、Ⅲ組血清P水平較處理Ⅰ組降低14.69%和38.85%；而處理Ⅱ組和處理Ⅲ組血清E2和LH含量較處理Ⅰ組分別提高54.74%、149.86%和71.19%、115.54%。處理Ⅱ組和處理Ⅲ組間血清P、E2和LH水平均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 日糧能量水平對妊娠母兔生殖激素水平的影響

血液P水平與日糧能量水平呈負相關，以能量狀水平為自變量，激素水平為因變量，回歸方程為：Y=-11.33X+69.353（n=6，R2=0.9779）。血液E2和LH水平與日糧能量水平均呈正相關，回歸方 程 分 別 為 ：Y=626.53X+153.34 （n=6，R2=0.9764）；Y=2.045X+1.6533（n=6，R2=0.9823）。

3 討論

日糧營養是生殖細胞生長發育和合成生殖激素的物質基礎，因此營養供給是否充足直接影響生殖細胞的生長發育和激素的合成與分泌，從而影響動物的繁殖性能（唐臻欽，1993）。能量是制約大多數動物生產性能的首要營養因素，可通過作用于機體的代謝過程來影響母畜的繁殖效率。

胰島素是調節糖、脂肪和蛋白質代謝的重要激素，使血糖維持穩定狀態。胰島素濃度受能量狀況影響較大，是反映體內能量狀況的一種激素（張拴林等，2007）。本試驗中，妊娠肉兔血清胰島素含量隨日糧能量水平的升高而增加，但中、高能量組間無顯著差異（P＞0.05）。

膽固醇是構成細胞膜的重要成分，也是合成膽汁、維生素D和激素的原料，可在一定程度上反映體內脂肪代謝狀況。研究表明，家兔血清膽固醇含量易受飼糧營養水平的影響 （黃錫全等，2001）。本試驗結果表明，日糧能量水平顯著影響了妊娠肉兔血清膽固醇含量。這與麻名文等（2012）對妊娠獺兔的研究結果相一致。

血清甘油三酯也是反映機體脂代謝的一個指標。脂肪組織的發育和體脂的沉積主要取決于血漿甘油三酯水平。目前妊娠導致甘油三酯和脂蛋白變化的原因尚有爭議，多數研究認為妊娠后體內多種激素水平的改變，明顯影響著血脂及脂蛋白的代謝（周琴，2005）。但在本試驗中，血清脂肪代謝指標組間差異均不顯著。這與麻名文等（2012）在妊娠獺兔上的研究結果一致。周東勝（2009）在后備母豬的研究中也指出日糧能量水平對后備母豬血液中代謝產物無顯著影響，認為動物機體具有維持血液中代謝產物處于生理水平范圍的能力，當血液中能量代謝產物超出生理水平時便轉化為脂肪或糖原儲存。

血清 LH、P、E2、PRL和 FSH水平基本可以反映出動物體內的生殖激素情況，進而反映了其繁殖能力的高低。本試驗表明，日糧能量水平對妊娠肉兔血清P、E2和LH水平影響顯著，其中P水平與能量水平呈負相關，而E2和LH水平與能量水平呈正相關。日糧能量水平對妊娠肉兔血清PRL和FSH水平無顯著影響，這與麻名文等（2012）對妊娠獺兔的研究結果不同。

在關于多浪羊的研究中，提高日糧能量水平會使血清中E2含量降低，P含量與FSH水平提高，但是LH水平并未提升（景煒，2010）。王玉琴（2007）研究表明，妊娠綿羊E2水平與日糧能量水平呈負相關。張拴林等（2006）試驗結果表明，高能量水平下，綿羊血清P水平顯著高于中、低能量水平。周東勝等（2009）研究得出提高日糧能量水平可促進后備母豬血液中LH的分泌的結論。鄭家三等（2011）試驗證明奶牛血漿 LH、FSH、E2水平隨日糧能量攝入增加而升高。

上述結論不盡相同的可能原因有：一方面畜禽的血液激素含量會受到日糧營養物質水平和來源、動物狀況、試驗期、采樣時間等因素的影響；另一方面，針對能量和血清生殖激素含量關聯的復雜性，更需要深入開展相關研究。

4 結論

本試驗結果表明，日糧能量水平在9.44～12.07 MJ/kg，能量水平對妊娠母兔血清胰島素水平和膽固醇含量影響顯著；妊娠母兔血清P含量與日糧能量水平呈負相關，血清E2和LH水平與日糧能量水平均呈正相關。

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