巨噬細胞移動抑制因子在復發性宮頸癌中的表達及其對預后的影響*

翁梅英， 洪順家， 鄭澄宇

(中山大學孫逸仙紀念醫院婦產科，廣東 廣州 510120)

巨噬細胞移動抑制因子在復發性宮頸癌中的表達及其對預后的影響*

翁梅英， 洪順家△， 鄭澄宇

(中山大學孫逸仙紀念醫院婦產科，廣東 廣州 510120)

目的研究巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration-inhibitory factor, MIF)在復發性宮頸癌中的表達及其對預后的影響。方法2007年1月至2009年12月期間收集我院確診宮頸癌手術后復發患者87例，采用免疫組化方法檢測MIF的表達情況,并對患者進行至少36個月的隨訪。結果復發性宮頸癌患者MIF陽性率為75.7%(55/87)。MIF表達與宮頸癌分化程度和臨床分期相關，差異有統計學意義(P<0.01)；但是不同宮頸癌病理分型MIF表達差異無統計學意義(P>0.05)。復發性宮頸癌MIF陽性者近期治療有效率為47.3%(26/55)，MIF陰性者近期治療有效率為63.6%(21/32)，二者相比差異有統計學意義(P<0.05)。Kaplan-Meier 生存分析結果表明MIF表達陽性組平均生存時間為28.8個月，陰性組平均生存時間為38.4個月，log-rank檢驗P<0.05。結論MIF陽性可能是影響宮頸癌復發和預后的危險因素之一。

宮頸腫瘤； 復發； 預后； 巨噬細胞移動抑制因子

宮頸癌屬于婦科最常見的惡性腫瘤，為僅次于乳腺癌的第二大女性惡性腫瘤，一直以來嚴重危害著女性健康。一般認為組織學分級、盆腔淋巴結轉移、浸潤深度和淋巴血管間隙侵犯均是目前影響宮頸癌預后的重要因素[1]。巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration-inhibitory factor，MIF) 屬于T淋巴細胞分泌的細胞因子，研究發現其能夠促進惡性腫瘤發生，參與腫瘤發生發展的多個環節[2]。本研究旨在探討MIF在復發性宮頸癌中的表達狀況及其對預后的影響。

材 料 和 方 法

1研究對象

收集我院2007年1月至2009年12月期間確診宮頸癌收入院手術治療的患者，病例入選標準：按2007年國際婦產科聯盟(Federation of Gynecology and Obstetrics, FIGO)推薦的臨床-診斷分期標準，ⅠB1期42例，ⅡA期(<4 cm)45例，均行改良根治性子宮切除術和盆腔淋巴結切除術。手術后隨訪宮頸癌復發：發現宮頸殘端腫塊，可伴發腰骶部疼痛，腿部放射性疼痛，下肢浮腫等局部壓迫癥狀；三合診捫及盆腔結節型腫塊，位置固定；計算機斷層掃描 (computed tomography, CT)、磁共振成像 (magnetic resonance imaging, MRI)或者彩超提示盆腹腔占位性腫塊或腫大的淋巴結。

2治療干預方法

2組患者確診術后宮頸癌復發后給予同期放化療，均予體外照射及腔內近距離放射治療。同時給予順鉑化療5周期：順鉑每平方米體表面積30 mg，每周1次。

3MIF檢測方法

MIF在宮頸癌組織中的表達情況采用免疫組化方法進行檢測，收集所有入選患者第1次手術時保留的蠟塊組織，5 μm切片，采用S-P免疫組織化學二步法染色，鼠抗人MIF單克隆抗體免疫組織化學染色試劑盒及小鼠抗人耐藥基因單克隆Ⅰ抗抗體均由Introvigen生物技術有限公司生產。空白對照為PBS代替Ⅰ抗，陰性對照采用正常鼠血清代替Ⅰ抗，陽性對照為已知陽性的宮頸癌切片。嚴格按照試劑盒操作手冊進行染色，光鏡下進行基因蛋白表達強度分級。MIF表達強度評分標準采用陽性細胞比例評分和陽性強度評分兩項加權法：每高倍鏡視野陽性細胞<25%為1分，25%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；陽性細胞染色強度：淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分；將每一標本兩項得分相乘得出總分，0～3分記為陰性(-)，4～8分記為陽性(+)，9～12分記為強陽性(++)[3]。

4治療效果評價

患者接受治療1月后隨訪進行療效評估，近期療效采用WHO腫瘤治療標準判定療效予治療后1個月時進行評價[4]：完全緩解(complete response，CR)，腫瘤全部消失，超過1個月；部分緩解(partial response，PR)，腫瘤縮小50%以上，時間≥4周；穩定(no change，NC)，腫瘤體積增大<25%或縮小<50%；進展(progressive disease，PD)，腫瘤體積增大>25%或出現新病灶。治療有效為CR+PR。對所有患者進行的生存時間隨訪。患者治療出院后均進行為期至少36個月電話隨訪，記錄患者的生存時間，并進行整理分析。

5統計學處理

應用SPSS 17.0統計軟件分析，計量數據采用均數±標準差(mean±SD)表示。組間均數比較用t檢驗，計數資料采用2檢驗，MIF表達與預后之間的關系采用Kaplan-Meier生存分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1患者一般情況

共入選符合標準的復發性宮頸癌患者87例，初次發病時年齡31～70歲，平均(43.2±10.2)歲。ⅠB1期42例，ⅡA期(<4 cm)45例。術后宮頸癌復發時間6～30月，平均(12.5±6.2)月。

2MIF表達與復發性宮頸癌臨床病理特征之間的關系

第1次手術標本病理檢查結果鱗狀細胞癌77例，腺癌10例，低分化22例，高、中分化65例。免疫組織化學檢查結果表明復發性宮頸癌患者MIF陽性率75.7%(55/87)。宮頸腺癌和鱗癌組織MIF表達分別見圖1、2。MIF表達與宮頸癌分化程度和臨床分期相關，差異有統計學意義(P<0.01)；但是不同宮頸癌病理分型MIF表達差異無統計學意義(P>0.05),見表1。

Figure 1. Analysis of MIF protein expression by immunohistochemistry in cervical adenocarcinoma(×200). A: negative MIF staining; B: positive MIF staining.

圖1免疫組化法分析MIF蛋白在宮頸腺癌中的表達

Figure 2. Analysis of MIF protein expression by immunohistochemistry in cervical squmaous-cell carcinoma(×200). A: negative MIF staining; B: positive MIF staining.

圖2免疫組化法分析MIF蛋白在宮頸鱗癌中的表達

3MIF表達與復發性宮頸治療的近期效果比較

復發性宮頸癌MIF陽性者近期治療有效率47.3%(26/55)，MIF陰性者近期治療有效率63.6%(21/32)，二者相比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表1MIF表達與復發性宮頸癌臨床病理特征之間的關系

Table 1. Correlation between the expression of MIF and clinicopathological features.

CharacteristicsnMIF(+)PPathologicalpattern Squmaouscarcinoma7749(63.6%)>0.05 Adenocarcinoma106(60.0%)Differentiation Poor225(22.7%)<0.01 Well/moderate6550(76.9%)Clinicalstage ⅠB14217(40.5%)<0.01 ⅡA4538(84.4%)

表2MIF表達與復發性宮頸癌治療的近期效果比較

Table 2. Comparison of MIF expression and short-term therapeutic effects of recurrent cervical cancer.

MIFnCRPRNCPD(+)558(14.5%)18(32.7%)*16(29.1%)13(23.7%)*(-)327(21.9%)14(44.8%)7(21.9%)4(12.5%)

*P<0.05vsMIF(-).

4MIF表達與復發性宮頸癌預后之間的關系

Kaplan-Meier 生存分析結果表明MIF表達陽性組平均生存時間為28.8個月，陰性組平均生存時間為38.4個月，log-rank檢驗P<0.05，見圖3。

Figure 3. Kaplan-Meier analysis of the survival of recurrent cervical cancer patients with or without MIF expression.

圖3Kaplan-Meier法分析MIF表達與復發性宮頸癌患者生存期的關系

討 論

隨著我國宮頸癌預防知識的大力宣傳教育及早期篩查的開展普及，該病的早期診斷率升高，病死率已有明顯下降，同時宮頸癌診斷年齡也出現年輕化趨勢。婦女宮頸癌的預后影響因素眾多，目前確認的包括臨床分期、脈管累及/間質浸潤深度和組織學分級。近年來宮頸癌發生發展的分子生物學機制成為國內外研究熱點集中所在，研究發現來源于T淋巴細胞的細胞因子MIF可能抑制腫瘤免疫，促進血管生成，與多種腫瘤的侵襲、轉移等相關[5]。在MIF研究的初期其被描述為一個具有廣泛作用的前炎癥因子，能夠通過多種途徑激活炎癥反應，但是最新研究表明其在炎癥與腫瘤之間起到橋梁的作用，在腫瘤發病及轉移過程中發揮重要的作用[6]。研究發現MIF在肝癌、食管癌、肺癌、頭頸部鱗癌等多種腫瘤組織中呈現高表達狀態，與多種腫瘤的淋巴結轉移有密切關系[7]。有研究證實CD74為MIF的作用受體，其細胞外結合域結合MIF位點后，能夠激活前列腺素E2的合成，促使細胞復制[8]。

我們的研究表明MIF宮頸癌組織中高表達，主要位于細胞漿內，提示MIF與宮頸癌的發生、發展可能有關。同時復發性宮頸癌病例中MIF陽性率高于同期文獻報道宮頸癌者[9]，提示其可能為宮頸癌復發的危險因素。同時本研究還發現MIF的陽性表達與復發性宮頸癌組織分化程度及其臨床分期相關，低分化、臨床分期晚的病例其MIF陽性率越高，表明MIF能夠抑制機體針對腫瘤細胞的免疫控制，促進腫瘤細胞逃逸，而使惡性程度增高。我們的研究還發現復發性宮頸癌MIF陰性患者再次接受抗腫瘤治療，其短期效果優于MIF陽性病例；而且通過長達3年的隨訪結果也表明，MIF陰性的復發性宮頸癌患者預期壽命更長。

但是MIF影響宮頸癌預后的分子生物學具體機制尚未完全明確，有研究認為MIF可能在腫瘤早期階段通過誘導基質金屬蛋白酶2表達來促進腫瘤細胞的侵襲和轉移[10-11]。基質金屬蛋白酶被認為能夠通過降解細胞外基質，促進血管生成調節來促進腫瘤發生進展。

綜上所述，MIF陽性可能是影響宮頸癌復發和預后的危險因素之一，其具體機制及可能的藥物干預靶點還有待進一步研究。

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Expressionofmacrophagemigration-inhibitoryfactorinhumanrecurrentcervicalcancertissuesanditsprognosticsignificance

WENG Mei-ying, HONG Shun-jia, ZHENG Cheng-yu

(DepartmentofObstetricsandGynecology,SunYat-senMemorialHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou510120,China.E-mail:shunjiahong@126.com)

AIM: To investigate the expression of macrophage migration-inhibitory factor (MIF) in human recurrent cervical cancer tissues and its influence on prognosis.METHODSEight-seven cases of recurrent cervical cancer were collected from January 2007 to December 2009 and followed up for at least 36 months. The MIF expression in cervical cancer tissues was tested by immunochemistry.RESULTSThe positive rate of MIF expression in recurrent cervical cancer was 75.7% (55/87). Compared with the patients with negative MIF expression, the patients with positive MIF expression showed worse response to antitumor therapy [47.3% (26/55) vs 63.6% (21/32),P<0.05] and shorter survival time (28.8 months vs 38.4 months,P<0.05).CONCLUSIONPositive MIF expression could be a risk factor in recurrence and prognosis of cervical cancer.

Uterine cervical neoplasms; Recurrence; Prognosis; Macrophage migration-inhibitory factors

R737.33

A

1000- 4718(2013)09- 1641- 04

2013- 05- 02

2013- 07- 26

廣東省科技計劃(No.2010B031600201)

△通訊作者 Tel: 020-81332583; E-mail: shunjiahong@126.com

10.3969/j.issn.1000- 4718.2013.09.018