全血、去白細胞全血和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率的比較

張亦弛 張高麗 鄭文君 趙連升

全血、去白細胞全血和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率的比較

張亦弛 張高麗 鄭文君 趙連升

目的比較全血、去白全血和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率。方法選擇60袋400 ml全血，隨機分為A、B﹑C三組，每組各20袋，A組為全血，B組為去白全血，C組為去白細胞懸浮紅細胞。輕輕混勻通過無菌結(jié)合機，分別取樣本﹙4±2﹚℃保存至儲存期末，檢測存期末的總血紅蛋白濃度，血細胞比容和上清游離血紅蛋白的濃度，計算儲存期末溶血率。結(jié)果儲存期末溶血率，C組高于A﹑B兩組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；A、B兩組比較，差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)論血液在制備過程中，過濾和離心使紅細胞的脆性增加和去除血漿后內(nèi)環(huán)境的改變，在一定程度上都會影響紅細胞儲存期末溶血率。

全血；去白細胞全血；去白細胞懸浮紅細胞；儲存期末溶血率

1 材料與方法

1.1材料 采血用由山東威高集團醫(yī)用高分子有限公司提供的采血袋與白細胞過濾器一體的四聯(lián)袋(血液保存液為CPD-A；紅細胞保存液為MAP,含腺嘌呤、甘露醇﹑氯化鈉﹑枸櫞酸﹑枸櫞酸鈉、葡萄糖和磷酸二氫鈉),大容量低溫離心機(德國賀力士),低溫操作臺,分漿夾,熱合機,無菌結(jié)合機，冰箱(4℃±2℃,日本SANYO公司)。

1.2方法 2012年8～12月取60袋400 ml全血，隨機分為A、B、C三組，每組各20袋，A組為全血組；B組為去白全血組；C組為去白細胞懸浮紅細胞組。分別采集三組樣本(A組全血濾除白細胞前采集；B組全血，濾除白細胞后采集；C組全血濾除白細胞后，經(jīng)離心后分離制備成去白細胞懸浮紅細胞后采集)，并儲存在(4±2) ℃冰箱內(nèi)至儲存期末，并測定三組去白細胞懸浮紅細胞總血紅蛋白的濃度，血細胞比容和上清游離血紅蛋白濃度，計算儲存末期溶血率。溶血率計算公式如下：

溶血率(%) =﹛[﹙1-血細胞比容﹚×上清游離血紅蛋白濃度] ÷ 總血紅蛋白濃度﹜×100%

1.3統(tǒng)計學方法 采用t檢驗，P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

三組不同血液制品儲存期末溶血率比較C組與A、B兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而A、B兩組比較差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具體見表1。

表1 三組不同血液制品儲存期末溶血率的比較

注：三組不同血液制品儲存期末溶血率C組與A、B兩組比較P<0.05，A、B兩組比較P>0.05

3 討論

由表Ⅰ可以看出，三種不同血液制品儲存期末溶血率均低于0.8%，符合《全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)》，但也發(fā)現(xiàn)儲存期末溶血率C組與A﹑B兩組比較差異都具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，分析其原因可能為：①在濾除白細胞過程中，過濾前混勻時對血袋的搖晃或震蕩會導致部分紅細胞的脆性增加以及衰老紅細胞的溶解[2]。②血液通過白細胞過濾器時，一些變形能力較差，剛能通過濾器，但其表面的膜成分會受到損傷，主要是膜骨架蛋白的減少，使紅細胞的穩(wěn)定性和變形性降低，使保存期的紅細胞壽命縮短[3]。③去除白細胞﹑離心后的紅細胞脆性明顯增大，且離心對紅細胞的影響明顯大于過濾白細胞,因為在較高離心力作用下會使紅細胞過度壓縮、變形，脆性明顯增大[4]。④血漿是紅細胞行使功能的基質(zhì)，血漿中不僅含有維持紅細胞滲透壓的血漿蛋白，還有各種營養(yǎng)分子、電解質(zhì)、血氣、調(diào)節(jié)物質(zhì)以及代謝底物[5]，去白細胞懸浮紅細胞在制備過程中去除了血漿，加入紅細胞保存液，而全血和去白全血保留了血漿。因此紅細胞變形能力下降、細胞膜的缺陷以及保存基質(zhì)的改變都可能增加紅細胞保存期末溶血率。

本結(jié)果也顯示，三種不同血液制品儲存期末溶血率A、B兩組比較差異無統(tǒng)計學意義，提示雖然過濾前混勻及過濾使部分紅細胞的穩(wěn)定性和變形能力降低，增加了儲存期末溶血的風險，但在一定程度上彌補了白細胞在保存期間破損導致的紅細胞溶血，因為未過濾血液中存在的白細胞可能導致增加保存期間的溶血，由于在保存期間，白細胞破損并釋放出一些化學物質(zhì)和酶如過氧化氫和蛋白酶等，已有報道指出，保存期白細胞釋放的蛋白酶可造成紅細胞溶血，破壞紅細胞的代謝和活性。

本研究對三種不同血液制品儲存期末溶血率進行分析，其檢測樣本均符合《全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)》，但由于樣本數(shù)量有限，不能以偏概全，因為血液離體后雖然有保養(yǎng)液保存，但血液在制備和保存過程中發(fā)生了物理和生物化學的變化，細胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生一系列變化，紅細胞膜的結(jié)構(gòu)及其變形性是影響紅細胞變形性能及血液流動，特別是通過微循環(huán)的重要因素之一[6]。因此為了提高輸血安全，保證血液質(zhì)量，血液在采集、制備和保存過程中必須注意以下幾個問題：①全血必須完全抗凝，避免采血量不足或過多，未經(jīng)充分抗凝的血袋中有可見凝塊，切勿使用。②嚴格按按廠家說明使用白細胞濾器，成分制備人員必須經(jīng)過必要的培訓，并定期檢測以保證設備使用按廠家說明進行。③保存超過1 d的全血，在制備過程中必須特別小心，避免將裝有血液的血袋反復振搖﹑擠壓，白細胞過濾前可以用2次顛倒血袋方法來進行血液混勻，濾器的初始化應采用自然重力，避免將血液強行通過濾器，過濾過程中避免氣泡進入過濾系統(tǒng)。④全血制備去白細胞懸浮紅細胞過程中應避免高速離心，防止紅細胞過度壓縮，紅細胞用保養(yǎng)液懸浮時要小心，避免紅細胞被破壞。⑤全血或去白細胞懸浮紅細胞必須在合適的容器中運輸，此容器必須保持血液制品在規(guī)定的溫度內(nèi)，不要將血液儲存在冷庫的通風口，此處溫度有可能低于規(guī)定的2～6℃。

[1] Nightingale MJ, Norfolk DR, Pinchon DJ. Current uses of transfusion sets： a cause for concern. Transfus Med,2010,20：291-302.

[2] 陳冬梅，任芙蓉，龔曉燕，等.全血、懸浮紅細胞和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率調(diào)查.北京醫(yī)學，2012,34(8)：773-775.

[3] 王云英，李興錄，張莉萍，等.血液經(jīng)白細胞過濾后紅細胞膜的損傷.重慶醫(yī)科大學學報，2008,33(2)：210-212.

[4] 陸瑤，張嘉卿，周晨，等.白細胞濾除、離心對紅細胞的損傷分析.臨床輸血與檢驗，2006,23(4)：212-213.

[5] 邱艷，楊海萍，查祎,等.人血漿對紅細胞保存的影響.中國實驗血液學雜志，2005,13(4)：692-697

[6] 田兆嵩.臨床輸血學.人民衛(wèi)生出版社，2002：21-22.

466000 河南省周口市中心血站

溶血是紅細胞膜的完整性受到破損或裂解釋放血紅蛋白引起血漿顏色改變，儲存期末紅細胞制品的溶血程度是評價保存紅細胞質(zhì)量的重要參數(shù)，常用溶血率來表示。雖然已有多種措施能提高紅細胞在血液制備、保存和運輸過程中的穩(wěn)定性，但紅細胞離體后仍將增加溶血的危險，其溶血率并隨保存期的延長而明顯升高。紅細胞制品中游離血紅蛋白含量過高，對于接受輸血治療的患者具有潛在的安全隱患[1]。《全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)》中增加了紅細胞儲存期末溶血率標準，作者于2012年8～12月對全血﹑去白全血和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率進行比較。現(xiàn)報告如下。