心腦寧片對大鼠血栓形成的影響

張中華，呂宏迪，郝少君，張正臣

中風是發病率高、病死率高、致殘率高、復發率高的疾病，是世界范圍內人口病死的第三位病因和成人殘疾的首要原因。近10年來，我國中風的發病率隨著人口老齡化以及受行為、社會環境因素的影響，仍有不斷上升的趨勢，每年新發中風患者約130～150萬。我國中風發病率居世界第2位，僅次于前蘇聯西伯利亞地區。世界衛生組織最近的統計數據表明中風每年要奪去五百多萬人生命，因中風致殘者超過1500萬人。預計到2020年左右，全球每年死于中風的人數將上升至七百多萬。缺血性中風占所有類型中風的85%左右。流行病學調查發現，我國近年來出血性中風的發病率明顯下降，缺血性中風則明顯上升[1]。治療這一疾病的藥物很多，但效果均不很理想，筆者根據多年的臨床經驗篩選出由人參、當歸、川芎、黃芪等組成的中藥片劑，具有活血化瘀，益氣安神，用于腦血栓形成，冠心病等，亦可用于記憶力減退，抗衰老等的治療。為探究其療效原理筆者進行了心腦寧片對大鼠血栓形成影響的實驗研究。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品 心腦寧片由解放軍第371醫院制劑室提供，批號20110606；阿司匹林腸溶片，石藥集團歐意藥業有限公司，批號018110810；腦心通膠囊，咸陽步長制藥有限公司，批號 111106；凝血酶原（PT）ELISA檢測試劑盒，上海長怡生物技術有限公司，批號20111201B；羧甲基纖維素鈉，天津恒興化學試劑制造有限公司，批號20090723；生理鹽水，河南華利制藥股份有限公司生產，批號11041806。

1.2 實驗動物 大鼠，清潔級，Wistar，河北省實驗動物中心提供，合格證號1112027。

1.3 實驗儀器 精密天平（AR1140/C），奧豪斯儀器（上海）有限公司生產；離心機（Anke TDL-40B），上海安亭科學儀器廠生產；酶標儀 （680），Bio-Rad生產；可調式移液器（ZX31689），熱電（上海）儀器有限公司。

1.4 實驗方法 取清潔級體重260～280 g大鼠72只，SD，雄性，隨機均勻分為6組，分別灌服大、中、小劑量心腦寧片混懸液 （1.5、0.75、0.375 g/kg， 用 0.5%CMC 配成 75、37.5、18.8 mg/ml，2 ml/100 g），阿司匹林混懸液（0.05 g/kg，用 0.5%CMC 配成 2.5 mg/ml，2 ml/100 g）， 腦心通混懸液 （8 g/kg，用0.5%CMC配成0.4 g/ml，2 ml/100 g）和同體積的0.5%CMC，連續給藥7 d，1次/d。末次給藥30 min，大鼠用20%烏拉坦（1 g/kg）腹腔注射麻醉后，仰臥固定于鼠板上，解剖頸部、分離氣管，插入塑料套管[2]。分離右頸總動脈和左頸外靜脈，置入絲線后備用；將絲線游離端聚乙烯管插入左頸外靜脈并結扎絲線，用肝素生理鹽水（5 U/ml）充盈三段相連的聚乙烯管中（取長約80 mm外徑1.6 mm聚乙烯管1根，另取長約60 mm外徑1.3 mm聚乙烯管2根，取7-0絲線長約50 mm（干燥至恒重，并稱重）置外徑1.6 mm聚乙烯管中，用外徑1.3 mm聚乙烯管固定，另一外徑1.3 mm聚乙烯管插入外徑1.6 mm聚乙烯管的另一端，用含肝素5 U/ml的氯化鈉注射液充滿聚乙烯管備用），將該管一端插入左頸外靜脈，再經此管另一端插入右頸總動脈中，立即放開動脈夾，準確記錄血流，15 min后終止血流，迅速取出絲線稱重，計算血栓濕重[3]。血栓重量（mg）=血栓絲線重量（mg）-絲線重量（mg）。大鼠取血，測凝血時間；離心，取血清，測定大鼠凝血酶原（PT）濃度[4]。

1.5 統計學方法 數據分析用SPSS 13.0 for windows統計軟件包進行數據資料的統計學處理，計量資料用平均數±標準差（s）表示，組間比較用方差分析（LSD 法）。

2 結 果

心腦寧對大鼠血栓濕重、凝血時間、凝血酶原濃度的影響見表1。

表 1 心腦寧對大鼠血栓形成的影響±s，n=12）

表 1 心腦寧對大鼠血栓形成的影響±s，n=12）

注：與空白對照組比，*P<0.05；與空白對照組比，#P<0.01

凝血酶原濃度空白對照組 0.036±0.006 105.8±43.6 0.097±0.118阿司匹林組 0.05 0.020±0.003#162.6±37.5#0.424±0.436#腦心通膠囊組 0.8 0.020±0.004#145.6±14.2#0.183±0.142大劑量心腦寧片組 1.5 0.022±0.004#146.9±39.3*0.248±0.143#中劑量心腦寧片組 0.75 0.024±0.004#141.4±31.1*0.180±0.233小劑量心腦寧片組 0.375 0.022±0.006#143.9±47.3 0.196±0.169組別 劑量（g/kg）血栓濕重（g）凝血時間（s）

從表1可看出，大、中、小劑量心腦寧片組、腦心通膠囊組和阿司匹林組與空白對照組比血栓濕重均顯著減輕 （P<0.01）；大、中劑量心腦寧片組凝血時間顯著延長（P<0.05），腦心通膠囊組和阿司匹林組可顯著延長（P<0.01）；大劑量心腦寧片組和阿司匹林組凝血酶原濃度顯著提高（P<0.01）。

3 討 論

心腦寧片是根據中醫理論和現代藥理研究成果擬定的院內協定處方。該制劑由人參、川芎、當歸、黃芪組成。方中以人參為君藥，《名醫別錄》：調中，止消渴，通血脈，破堅疾，令人不忘，以其主補五臟，安精神，定魂魄；黃芪，補中益氣，為臣藥。當歸，活血養血；川芎，其性善降結氣，以走肝經，氣中之血藥，通行十二經，具有理氣、活血化瘀的作用為佐藥。四藥合用，集活血化瘀、抗血栓、益氣之功于一體，既重視疏通脈管，以改善臟器供血，又注意改善人體整體功能及代謝，達到扶正祛邪之目的[5]。該制劑適用于氣虛血瘀癥之缺血性腦血管疾病的治療。為進一步探討該藥藥理作用，本實驗進行了心腦寧片對大鼠血栓形成影響的研究。結果顯示：大鼠腦血栓模型成功；與模型組比，心腦寧片大、中、小劑量組、腦心通膠囊組和阿司匹林組均可顯著減輕血栓濕重 （P<0.01）；大、中劑量心腦寧片組可明顯延長凝血時間（P<0.05），大劑量心腦寧片組和阿司匹林組可顯著提高凝血酶原濃度 （P<0.01）。實驗結果提示：心腦寧片具有明顯抗腦血栓形成的作用，其作用機制可能延長凝血時間、提高凝血酶原濃度，其作用優于心腦通膠囊和阿司匹林片。

志謝 本實驗在河南中醫學院苗明三教授指導下完成，特此致謝

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[3]李儀奎.中藥藥理實驗方法學[M].上海:上海科技出版社，2006.72.

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[5]石鶴坤，甘 雨，秦文艷，等.血絡復欣顆粒對大鼠血栓形成及小鼠腸系膜微循環障礙的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17(3):167-169.