黃疸新生兒血清中TORCH特異性抗體的檢測意義

梅 峻 谷 麗 陳艷杰

同濟大學附屬第十人民醫院兒科，上海 200072

TORCH是一組病原微生物的英文名稱縮寫，其中TOX是弓形蟲，RV是風疹病毒，CMV是巨細胞病毒，HSV是單純皰疹病毒，HSV又可分為兩型，即HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型[1]。近年來很多研究表明TORCH感染與新生兒病理性黃疸的發生關系密切，本研究通過對本院住院新生兒感染性黃疸與非黃疸新生兒進行TORCH特異性抗體檢測，結果如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2011年1～4月兒科收治入院的新生兒黃疸100例（新生兒黃疸組），其中男59例，女41例；對照組非黃疸新生兒100例，其中男57例，女43例，新生兒黃疸病例診斷標準參考《實用新生兒學》第3版的診斷標準[2]：①黃疸在出生24 h內出現；②血清總膽紅素＞205.2 mol/L或每日上升85 mol/L；③黃疸持續時間長（足月兒＞2周，早產兒＞4周）；④黃疸褪而復現。兩組新生兒年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 試劑與儀器

各抗原均由中國預防醫學科學院病毒研究所提供；羊抗人IgM酶標記物購于中科晨宇生物科技公司，聚乙二醇（PEG）粉劑購自美國陶氏PEG。各種TORCH-IgM陽性及陰性血清標本來自計劃生育門診，試劑盒是上海生物制品公司生產，所有試劑均在有效期內使用。

1.3 標本采集

所有血清標本均采用腹股溝抽血，標本量3 mL，統一用生化管采集，無抗凝劑，送檢時間：采集完1 h以內。常規法TORCH-IgM系列診斷試劑由本單位研制，經一系列實驗鑒定，符合中國生物制品標準化委員會編寫的中國生物制品規程中的酶聯診斷試劑的基本要求。

表1 兩組住院新生兒TORCH抗體檢測結果

1.4 檢測方法

血清TORCH抗體的檢測方法為酶聯免疫吸附法（ELISA），操作步驟嚴格遵照試劑盒說明書進行，取濃縮洗液稀釋后加入20 μL待檢標本和陰、陽性對照。每孔加入100 μL酶結合物，37℃反應60 min，洗滌5遍，每孔依次加入底物液50 μL，振蕩混勻終止反應。

1.5 判定標準

樣品抗體指數=樣品吸光度（OD）/臨界校正液平均OD，抗體指數≤0.90為陰性，在0.91～0.99范圍為可疑，≥1.00為陽性。

1.6 統計學方法

本研究所有資料均有同一個人錄入，并由同一人負責核實，確保所有資料的準確無誤。采用統計軟件SPSS 16.0對實驗數據進行分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

本研究兩組中200例新生兒，IgM抗體陽性34例，陽性率17.0%。新生兒黃疸組100例中，TORCH-IgM陽性31例，IgM抗體檢出率31.0%，對照組100例中TORCH-IgM陽性3例，IgM抗體檢出率3.0%，兩組TORCH抗體陽性率相比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

新生兒黃疸是新生兒時期的常見病，發病的主要原因是新生兒時期對膽紅素代謝不成熟，血中膽紅素水平增高，出現皮膚黏膜的黃染現象。過高的膽紅素可以透過細胞膜進入細胞內，干擾細胞的代謝功能，引起細胞功能紊亂[3]。嚴重者可產生膽紅素腦病，導致嚴重的后遺癥，因此對于新生兒黃疸應該做到早診斷、早治療。本組資料中顯示新生兒黃疸組患兒TORCH特異性抗體檢出率較對照組明顯高，說明在新生兒黃疸發生原因中，TORCH病毒也是其中一個原因。TORCH病毒在大自然中廣泛存在，感染途徑多樣，如果曾經感染過這種病毒，則抗體IgG出現陽性；如果近期剛感染，則抗體IgM檢測陽性，因IgM抗體一個顯著特點是無法通過胎盤屏障，故新生兒血清中TORCHIgM抗體檢測，可明確表示患兒近期內的感染情況[4]，故本文對新生兒僅檢測抗IgM抗體。本研究表明，TORCH感染以CMV病毒為主，CMV病毒屬皰疹病毒科B亞科，CMV病毒感染的新生兒臨床表現多樣，但大多數以黃疸為首發癥狀，黃疸程度及病程輕重不等[5]。目前關于CMV病毒是如何引起新生兒黃疸的研究正在進行中，新生兒黃疸發病機理中膽汁淤積是重要的一個環節，最近有研究推測機體感染CMV病毒后，會誘發體內腫瘤壞死因子α（TNF-α）的產生，從而通過一系列復雜的免疫反應，損傷新生兒肝臟細胞功能。正常情況下，膽汁在肝內產生后，通過膽管系統轉運，其中各級膽管細胞擔負著極其重要的作用，而CMV病毒感染后會損害膽管細胞功能，造成膽汁轉運排泌受阻，從而引起膽汁淤積，最終導致新生兒黃疸的發生[6]。本組研究中，新生兒黃疸組抗CMV IgM抗體檢測陽性率明顯升高，在TORCH感染中所占比例最高，故表明CMV感染最易誘發新生兒病理性黃疸的發生。新生兒HSV感染大部分是在分娩過程中感染，很少經胎盤或血行感染，本組資料未檢出HSV-IgM抗體，這也表明故抗HSV IgM抗體在新生兒早期檢出率較低，同時抗HSV IgM抗體陽性率與對照組比較差異無統計學意義（P＞0.05），說明HSV感染與新生兒黃疸關系不大。弓形蟲病在世界各地流行較廣泛，由于它可通過胎盤由母體傳給胎兒，故對胎兒及新生兒危害極大，在孕早期感染弓形蟲后，會引起多種胎兒畸形，如腦鈣化、小腦畸形、肝脾腫大等，甚至死胎，在孕晚期感染時，患兒會出現典型的弓形蟲病臨床表現，如肺部感染、肝功能損害、黃疸、血小板減少、腦癱等[7]。本次研究中兩組病例均未檢出TOX-IgM，表明新生兒黃疸的發生與弓形蟲感染關系不大。風疹病毒在人群中普遍易感，屬于RNA病毒，但人體感染風疹病毒后一般癥狀比較輕，故在臨床工作中未予重視。近年來先天性風疹綜合征越來越受到重視，這類患兒往往伴有嚴重的出生缺陷，其中以先天性心臟病、白內障和神經性耳聾尤甚[8]，研究表明本病發生原因多數是未感染過風疹病毒的孕婦在懷孕早期感染了風疹病毒，從而引起胎兒出生缺陷，本組資料檢出1例風疹病毒抗體，故臨床應予以重視。

綜上所述，TORCH病毒感染對新生兒危害巨大，因此應引起兒科醫師的高度重視，研究表明患兒感染TORCH后臨床癥狀不典型[9]，診斷仍依靠實驗室檢查。目前，診斷TORCH感染的方法主要為病原體分離培養、血清學檢測和PCR等方法[10]，PCR法靈敏度、特異度較高，但對試驗平臺要求較高，無法推廣；病毒分離準確性最好，但不易操作，費時費力，臨床推廣較難；而目前條件下血清學檢測相對簡單易用，在臨床工作中已廣泛推廣。本組研究表明，新生兒黃疸組患兒TORCH特異性抗體檢出率明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），表明在新生兒黃疸患兒診治中TORCH抗體測定的必要性，有助于發現早期TORCH感染病例，從而盡早治療，減少病殘率的發生；同時也有助于早期鑒別病理性黃疸病因，減少核黃疸的發生率，因此表明TORCH抗體測定在新生兒黃疸診治中具有舉足輕重的意義。

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