咽炎顆粒藥效學的實驗研究

凌 云，張 沂

咽炎顆粒是古方玄麥甘桔湯加減，主要由甘草、麥冬、玄參和桔梗等組成，具有清熱利咽、養(yǎng)陰解火的功效，經(jīng)系統(tǒng)臨床觀察，對急慢性咽炎具有顯著療效。因其組方合理，經(jīng)過幾十年的臨床驗證，是治療急慢性咽炎的良藥[1]，經(jīng)過治療的患者無數(shù)，深受廣大患者的歡迎[2]。目前，咽炎顆粒已成為海軍總醫(yī)院自制制劑的一個拳頭產(chǎn)品，在院外亦很有影響。

咽炎為局部炎癥，炎癥和痰液刺激是急慢性咽炎的主要共同點。咽炎分為急性和慢性，大多數(shù)為慢性咽炎，但均以炎性為主，同時伴有局部痰液的刺激，因此治療本病的關(guān)鍵是祛痰和抗炎[3]。本實驗研究通過小鼠酚紅分泌量，觀察咽炎顆粒的祛痰作用[4];用二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和大鼠棉球肉芽腫形成[5]，對咽炎顆粒的祛痰、抗炎等藥效學進行實驗研究，為申報軍隊非標準制劑文號提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑 咽炎顆粒為棕色顆粒劑，規(guī)格每袋10 g，海軍總醫(yī)院中藥制劑室提供，批號030916;陽性對照藥物為玄麥甘桔顆粒，北京京鐵華龍藥業(yè)有限責任公司提供，規(guī)格每袋10 g，批號030922;酚紅和二甲苯均為北京化工廠分析純。

1.1.2 動物 昆明種小鼠，雄雌各半，一級BDW95007，體質(zhì)量 18～22 g;Wistar大鼠，雄雌各半，二級，BDW95012，體質(zhì)量180～220 g。動物均由軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心提供，動物質(zhì)量合格證號為SCXK-(軍)2002-001。實驗在軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心進行，溫度25℃，12 h明暗交替，自由飲水及進食，動物室通風良好。

1.2 方法

1.2.1 小鼠祛痰實驗 小鼠隨機分養(yǎng)飼養(yǎng)盒中，稱質(zhì)量標記后，分別給予不同劑量受試藥。咽炎顆粒分高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)劑量組和陽性對照藥(玄麥甘桔顆粒)組(10 g/kg)、空白對照組(蒸餾水)，共5組，每劑量組10只。空白對照組每只小鼠蒸餾水10 g/kg灌胃，咽炎顆粒、玄麥甘桔顆粒用溫蒸餾水溶解后分別灌胃。給藥后30 min，各組均腹腔注射10%酚紅溶液0.2 ml/10 g;0.5 h后，處死小鼠，仰位固定，分離氣管;以注射器抽取5%NaHCO3液0.4 ml，經(jīng)氣管注入肺內(nèi)，抽洗3次，將抽洗液注入小試管。如此重復3次，將3次抽洗液合并，離心，備用。取離心后的紅色澄明抽洗液0.5 ml，加入1.5 ml 5%的NaHCO3液混勻，于UV751CW紫外可見分光光度計上，在546 nm波長處測定吸光度(A546nm)值，從酚紅標準曲線算出各A546nm值的相應濃度。按公式計算各組呼吸道分泌液增加率(%)，呼吸道分泌液增加率(%)=[(給藥組酚紅濃度－空白組酚紅濃度)/空白組酚紅濃度]×100%。

1.2.2 小鼠二甲苯致炎實驗 小鼠隨機分組，稱體質(zhì)量標記后，分別給予不同劑量受試藥。咽炎顆粒分高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)劑量組和陽性對照藥(玄麥甘桔顆粒)組(10 g/kg)、空白對照組(蒸餾水)，共5組，每劑量組10只。咽炎顆粒、玄麥甘桔顆粒用溫蒸餾水溶解后灌胃，每天1次，連續(xù)3 d;最后1次給藥后45 min，將小鼠的右耳用二甲苯棉球接觸5 s;15 min后頸脫臼處死，用直徑6 mm打孔器取等面積左(自身對照)、右耳(二甲苯處理)稱質(zhì)量，觀察二甲苯致右耳廓腫脹程度(右耳質(zhì)量減去左耳質(zhì)量)及相應變化百分率(%)，耳腫脹率(%)=[(右耳質(zhì)量－左耳質(zhì)量)/左耳質(zhì)量]×100%。

1.2.3 大鼠棉球肉芽腫實驗 取大鼠30只，隨機分組，稱體質(zhì)量標記后，用水合氯醛麻醉后，在無菌條件下作腹部切口，將10 mg滅菌棉球植入右側(cè)腹股溝皮下。手術(shù)當日開始給藥，每天1次，連續(xù)7 d;第8天最后1次給藥后45 min將動物斷頭處死，剝離取出棉球肉芽組織，置于60℃烘箱內(nèi)干燥12 h，稱質(zhì)量，減去棉花球質(zhì)量即為肉芽腫組織凈重，肉芽腫減少率(%)=[(對照組肉芽腫凈質(zhì)量－治療組肉芽腫凈質(zhì)量)/對照組肉芽腫凈質(zhì)量]×100%。

1.3 統(tǒng)計學處理 用SAS 9.0統(tǒng)計軟件設計方差分析，組間比較采用t檢驗進行顯著性差異比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 咽炎顆粒對小鼠酚紅分泌的作用 咽炎顆粒的低劑量組雖對小鼠酚紅分泌量有一定的促進作用，但與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。咽炎顆粒中、高劑量組對小鼠酚紅分泌量有顯著的促進分泌作用，與空白對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);與玄麥甘桔顆粒組比較促分泌作用強，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明咽炎顆粒有確切的生津祛痰作用(表1)。

表1 各組對小鼠酚紅分泌量的作用(n=10)

2.2 咽炎顆粒對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用與空白對照組比較，咽炎顆粒對二甲苯所致小鼠右耳廓腫脹均呈劑量依賴性地減輕。5 g/kg咽炎顆粒有一定的抑制耳廓腫脹的作用，但與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);其中10 g/kg和20 g/kg咽炎顆粒組，比陽性對照藥玄麥甘桔顆粒組10 g/kg的作用相似或強，且與空白對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，表明咽炎顆粒對二甲苯所致的急性炎癥有顯著的抗炎作用(表2)。

2.3 咽炎顆粒對大鼠棉球肉芽腫形成的作用 7 d后咽炎顆粒對棉球肉芽腫的形成均有顯著地抑制作用，呈劑量依賴關(guān)系，肉芽腫凈質(zhì)量減少15.81%～48.15%，與陽性對照藥玄麥甘桔顆粒組有相同的作用，比玄麥甘桔顆粒作用強，與空白對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，表明咽炎顆粒對棉球所致的慢性炎癥有顯著的抗炎作用(表3)。

表2 各組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹作用的影響(n=10)

表3 各組對大鼠棉球肉芽腫形成的影響

3 討論

咽炎屬于中醫(yī)的喉痹范疇，主要是指因邪毒侵襲或臟腑失調(diào)所致的咽部、肌膜病癥，包括急喉痹、慢喉痹等。《諸病源候論·喉痛》認為是“風熱毒客于其間”，邪氣搏于臟氣，則生熱，熱乘其肺而搏咽喉”。因此后世對該病的治療偏重于清熱、通腑瀉熱。咽炎臨床上表現(xiàn)為咽部黏膜的急慢性炎癥，患者有咽喉干燥并有異物感。中醫(yī)辯證為虛火上炎、痰熱癥或熱毒壅阻咽喉。根據(jù)咽炎的發(fā)病機制和臨床癥狀，虛火和熱毒貫穿于本病始末。方中玄參、麥冬滋陰降火，養(yǎng)陰生津;甘草清熱解毒，消腫利咽。故筆者認為在治療中必須以滋陰和利咽并重治療咽炎方可取得一定的療效。

咽炎顆粒對小鼠酚紅分泌量有顯著的促進分泌作用，對二甲苯的致炎作用有顯著的對抗作用，對大鼠棉球肉芽腫形成有很好的抑制作用，說明該藥有良好的生津作用和抗炎作用。體外抑菌作用表明，玄參對金葡菌、白喉桿菌、傷寒桿菌、乙型溶血性鏈球菌、綠膿桿菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌等均有不同程度的抑制作用;桔梗所含的桔梗皂苷有非常顯著的祛痰作用，口服桔梗皂甙，可使呼吸道分泌液增加，祛痰作用可連續(xù)7 h以上;甘草中所含的甘草苷給小鼠皮下注射，能對抗巴豆油誘發(fā)的急性滲出性炎癥，對慢性肉芽組織增生的炎癥也有明顯抑制作用;麥冬多糖對恒定磁場輻射引起免疫力低下的小鼠白細胞下降具有較強的對抗作用[6]。諸藥合用，可抑制咽炎的細菌繁殖，起到生津和抗炎作用，提示該藥對急慢性咽炎有較好的治療作用。

本實驗表明咽炎顆粒有明顯的祛痰和抗炎消腫作用，以上藥效學實驗結(jié)果進一步驗證了該藥治療急慢性咽炎的臨床療效，且顆粒制劑是有運用靈活、攜帶方便、質(zhì)量可控不需煎煮等優(yōu)點，為進一步的新藥開發(fā)提供了有力的實驗依據(jù)，從而為申報軍隊非標準制劑文號提供了依據(jù)。

[1]鮑燕燕，凌云，張永林，等.咽炎沖劑治療咽炎269例[J].人民軍醫(yī)，1998，41(12):731-732.

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[3]葉京英，韓德民.慢性咽炎研究進展[J].中國醫(yī)學文摘·耳鼻咽喉科學，2004，19(5):268-271.

[4]劉晉華，李玉萍，尤光甫.清肺消咳顆粒鎮(zhèn)咳祛痰平喘作用的實驗研究[J].解放軍藥學學報，2008，24(6):482-485.

[5]楊建宏，王莉，馬豐才.秦艽提取物鎮(zhèn)咳祛痰抗炎鎮(zhèn)痛作用的實驗研究[J].中藥藥理與臨床，2010，26(1):51-52.

[6]茍興能，張克英，楊興江，等.川麥冬多糖對恒磁場致小鼠免疫損傷的防護作用[J].四川中醫(yī)，2009，27(5):18-19.